分光光度法测定元胡止痛片中延胡索总生物碱的含量

分光光度法测定元胡止痛片中延胡索总生物碱的含量目的采用分光光度法测定元胡止痛片中延胡索总生物碱的含量，确定最佳

的提取及测定方法。方法用溴甲酚绿与生物碱结合成有机络合物，以定量的有机溶剂提取，用分光光度法在波长413 nm处测定。结果平均回收率为100.9%，RSD为0.53%。结论本方法准确、可靠、重复性好，可作为元胡止痛片的质量控制标准。

[Abstract] Objective Determine the content of total corydalis alkaloid by spectrophotometry in Yuanhuzhitong tablet，Identify the optimal extraction and determination. Methods Use bromocresol green combined with alkaloids into organic complex，extraction with a certain amount of organic solvent, measured at a wavelength of 413nm by spectrophotometry.Results Average recovery was 100.9%, RSD 0.53%. Conclusion This method is accurate，reliable，reproducible and can be used as quality control standards of Yuan hu zhi tong Tablet.

[Key words] Yuanhuzhitong tablet; Total Corydalis Alkaloid; Spectrophotometry

元胡止痛片由延胡索与白芷两味药材组成，主治由气滞血瘀引起的胃痛、胁痛、头痛及痛经，效果确切。药理实验证明，延胡索中所含的生物碱类物质为主要的镇痛成分。处方中所用延胡索多经过醋制，因为游离的生物碱较难溶于水，经醋制后生成醋酸盐而易溶于水。本研究通过分光光度法测定元胡止痛片中总生物碱含量可有效控制元胡止痛片生产投料，确保药品质量。

1仪器与试药

梅特勒-托利多XS-43；TU-1800SPC紫外可见光分光光度计，SBC-100超声波处理器（济宁市超声波仪器厂），所用试剂均为分析纯。元胡止痛片（市售品）；延胡索乙素（中国药品生物制品检定所，批号：110726-200610）。

2方法与结果

2.1供试品溶液制备

取本品20片，糖衣片除去糖衣，精密称定，研细，取约1 g，精密称定，用石油醚（60～90℃）脱脂1 h。取药渣，挥干溶剂后，加1.5%盐酸溶液50 mL，超声处理30 min，滤过，取滤液2 mL，置于分液漏斗中，加醋酸-醋酸钠缓冲液（pH=5.2）20 mL，加溴甲酚绿显色剂2.0 mL，用氯仿15 mL萃取，待静置分层后，分取氯仿层作为供试品溶液。

2.2阴性供试品溶液制备

精密称取白芷细粉0.5 g，按供试品溶液制备方法制得阴性供试品溶液。

2.3对照品溶液制备

精密称取延胡索乙素对照品适量，加1.5%盐酸溶液溶解，配制成每1毫升含0.234 mg的溶液。

2.4线性关系考察

精密吸取对照品溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL，分别置于分液漏斗中，加醋酸-醋酸钠缓冲液（pH=5.2）20 mL，加溴甲酚绿显色剂2.0 mL，用三氯甲烷15 mL萃取，待静置分层后，分取三氯甲烷层，以三氯甲烷为空白，于413 nm测定吸光度。以对照品浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，回归方程为A=2.612 9C+0.001 952（r=0.999 7），线性范围为0～0.234 mg。结果在线性范围内的对照品浓度与吸收度呈良好线性关系。

2.5精密度试验

对同一供试品（批号：070801），按照供试品的提取方法操作，连续测定6次，测得吸光度值为0.553、0.553、0.553、0.552、0.552、0.552，RSD为0.10%（n=6），表明该方法精密度良好。

2.6重复性试验

取同一供试品5份，每份约1 g，分别进行测定，结果平均含量为17.37 mg/片，RSD为0.13%（n=5）。

2.7稳定性试验

取供试品溶液，在室温下放置不同时间（h），分别在0、0.5、1.0、2.0、4.0、6.0定吸光度，观察放置时间对吸光度的影响。测定结果（A）分别为0.241、0.241、0.242、0.243、0.243、0.245，RSD为0.63%（n=6），说明萃取液在6 h内吸光度基本无变化。

2.8准确度测定

采用加样回收法，取已知含量的供试品（批号：071002），分别加入一定量对照品，按上述方法测定，结果平均回收率为100.96%，RSD为0.53%。

表1 回收率试验结果

取样量

（mg）样品含量（mg）加入量（mg）测得总量

（mg）回收率

（%）平均回收率（%）RSD（%）

511.2 4.348 2 2.512 5 6.897 5 100.536 4 100.96

0.53

504.8 4.861 9 2.512 5 7.452 1 101.053 6

521.9 4.860 4 2.512 5 7.492 7 101.624 9

519.2 5.001 7 2.512 5 7.610 4 101.280 2

505.4 4.894 7 2.512 5 7.431 5 100.328 1

2.9样品测定

取不同批次样品，按上述方法进行测定，计算样品中延胡索乙素的含量，结果见表2。

表2 样品含量测定结果（n=2）

批号070901 060920 080201 070818 090101 080401

含量（mg/片） 11.74 6.96 20.61 13.02 12.64 7.31

3讨论

3.1提取方法的选择

取供试品及阴性供试品各1 g，分别以石油醚（60～90℃）与乙醚脱脂，弃去石油醚，取药渣，结果表明以石油醚（60～90℃）脱脂可以去除白芷对试验的干扰。

3.2不同酸度的影响

采用不同浓度（0.5%、1%、1.5%、2%）的盐酸溶液提取，对提取结果进行比较，结果1.5%盐酸溶液提取效果更好。

3.3提取时间考察