探索性实验

探索性实验
开头先说点别的。

一，由于今年江门华支睾吸虫大规模流行，因此寄生虫考试很可能考这个；二，找这类学习的文章可以点击分组“学习心得”，不过我只把比较新的给归类了，很老的由于每次都要编辑验证码，我比较懒，就不做了。

好，那么就说说这个探索性实验。

其实探索性实验的流程比较简单，经过分子医学技能的锻炼之后，大家就已经明白了从选题到开题报告这个阶段要怎么做了，而探索性实验，就是多了将之实践并完成论文这一步。

不过，由于是真刀真枪上场了，个中有很多细节是跟分子技能不一样的。

我们一步步来看这一整个过程，不过我本人并非科研类的牛人，也并不对此有很大的兴趣，所以仅仅是根据自身体验所写，难免有疏漏和偏颇。

第一步：组队
探索性实验都是以团队为单位进行实验的，团队成员由于要陪你完成整个实验，所以磨合度很重要，常言道，不怕狼一样的对手，就怕猪一样的队友，虽然探索性实验不存在什么竞争，但是找好合作伙伴是肯定要的，不和谐的团队往往会造成1+1<2的结果，耽误实验又伤感情。

怎么选队友不需要教，关键是成为一个团队之后，就应该有共同的目标，起码是完成实验，队伍里的每个人都应该要有责任心和毅力，而队长则尤其重要，不仅仅是要有责任心和毅力，还要有良好的统筹能力，沟通能力。

队长要做的事情比队员要多上不少，比如联系老师，制定实验计划等，因此最好选有经验的或者是能力强的人做队长，不需要害怕自己能力不够什么的，有时候确实会产生什么都不会的团队，但是不会是可以学的，要对自己有信心。

我自己觉得队友应该选互相沟通比较方便的组合，比如说我们班由于女生和男生住不同的宿舍，而且有个门禁，有什么事未必能立即找到，有时候就不是很方便。

组员应该有较为明确的分工，比如说实验数据的记录应该从头到尾都是由一到两个人来进行，这个人同时还应该有比较强的数据分析能力，另外像什么实验器材药品的管理，定期查看动物等工作，都应该有明确的分工，不要小看这一步，相信我，不分工的话一做起实验来必定天下大乱。

第二步：选题
做什么好呢？这是个很重要的问题。

这可不像分子技能，可以只说个idea出来，这可是要
做实验的，这就涉及到可行性、材料、开销、实验时间等实际问题了。

而且，还得是“探索”，得有创新之处。

但是我可以告诉你们，探索性实验做到现在，其实已经有点山穷水尽，做了这么多届，比较好的idea不少已经被前辈们做过了，而且说句实在话，创新度相当高的idea 实践起来往往很困难，所以我不得不先打击你们一下，所谓“创新”，很可能就是一个普通的概念加了一个可变因素而已。

临床五年制、口腔、公卫等这些专业在选题方面比较有优势，因为生理学过了，病理生理和药理也在学，要从中找灵感比较容易，而八年制是大三下学期就开始，生理生化没学完，病生和药理还没有学，很多东西可谓还没有概念，这个时候联系老师是个不错的办法，老师们虽然研究的方向各有不同，但是选题的思路还是能教给你们的，他们作为指导老师，其中一个任务就是为尚在迷津中的同学提点出一个方向。

这里不得不说下指导老师，指导老师各有不同，有的很nice很负责，有的就比较放羊，有的则不受欢迎。

但是每个班安排哪一位指导老师则完全是天意，如果跟了一个指导不怎么好的老师，这个班会挺惨的。

比如说我们班当时经历一系列混乱的调整后最终由药理学的汪雪兰老师带，她是公认的好老师，我们班普遍做的很顺利，我们组是班上题目最复杂的组，要不是老师的帮助估计真做不完实验；而临床有个班则不走运，跟了病生的邓宇斌老师，说实话他是公认的不好，那个班吃了不少苦头。

因此不要把希望全部寄托在老师身上，绝大多数时候你们只能靠自己。

联系指导老师要注意几点，首先一定要预约，老师很忙，不是全天候伺候我们的，所以要预约时间；第二一定要电话，邮箱短信什么的统统不靠谱，老师不像我们这么潮，就算是潮也不会像我们那样天天挂Q看短信，关键时刻怎能不舍得电话费；第三，讲礼貌，注意控制一次会谈的时间。

我说过，选题涉及可行性，材料，开销，实验时间等因素。

实验用的动物会提前公布可用品种，所以实际上我们的思路已经被严重的限制了，因为如果实验所需的动物模型不能用学校给的品种做出来的话，就是白干；即使是可以做出来，但是所需时间太长也不行。

另外器材和药品，实验室可以提供一部分，但是太稀奇的药或者是平时很少用的器材，学校是不会给你买的，你得自己解决，不过实际上，你往往能在实验室找到清单上没有的东西，说明学校并没有定期清点器材，不然就不会有那么多根本不能用的烂器材放在那里没人管了。

所以到时候去实验室踩点是很重要的。

还有一点，有些药品属于管制药品，不是能随便买的，比如氯胺酮。

然后选题有两个方向，创造性课题或验证性课题，创造性就是一个全新的思路，不用解释，验证性课题可能是由已知的知识出发，用来解决一个新问题，也可能就是纯粹验证一个书上的观点而已，最后一个真的不建议试，因为这样根本没有创新点，而且开题报告的时候获得通过的可能性也相当低。

如果可能的话当然还是做创造性课题，如果实在条件不足，也只能选择前一种验证性课题了，毕竟条件所限。

对于怎么找思路，可以用头脑风暴，也可以查资料祈求有一闪而过的灵感，我个人的观点是，既然实验内容已经被可选动物大大的限制，不妨查阅动物模型方面的文献，从可实现的动物模型上去找思路。

我的组当时的题目是“牛奶对大鼠应激性溃疡预防作用的实验研究”，据说09级实验生理课上由汪老师带的班级已经展示过我们的“成果”，这个题目是我想出来的，不过想出来的过程实属偶然，我就是看了一堆动物模型书之后，发现大鼠应激性胃溃疡模型的建立十分简单，时间上也允许，然后随随便便想到了一个“牛奶护胃”的民间智慧，就这么把它们给组合在一起了，然后没想到的是还真用了这个。

不过每个人都有自己的方法，不能都来这么模仿，免得真有人想不出来。

我认为，选题的时候应该开一个例会，每个人都想一个题目，然后汇总讨论筛选，而且至少需要提供以下信息：题目，动物模型，立论依据，可行性，局限性，备注。

备注的内容可以是动物模型更换了品种之后应该如何调整模型构造所需时间，或者是需要什么特别器材等等。

这些东西一开始都必须想到，不然到时候发现缺少关键物品或遇到技术困难就不容易解决。

第三步，初步制订实验方案并准备开题报告
定好了题目，就要开始有把它做出来的决心了，然后就需要制订探究这个题目所必需的实验方案，动物什么的已经在构思题目的时候想好，然后就是要把整个实验过程给构思出来，最重要的几点包括实验三大基本原则，实验动物的分组及各自处理方式，实验的具体方法步骤，选用的实验结果指标，预期的实验结果及结论。

其中预期结果结论是包括结果有差异和结果没有差异两个的，你要知道，你做的题目未必是个阳性结果，但是阴性结果并不可耻，我并不懂为什么不少人宁愿造假也要造个阳性结果出来，阴性结果至少提示了处理因素并不能达到预期的效果啊,万艾可就是在发现其对心血管作用效果不佳的情况下才发现它可以治疗
ED的。

这个实验过程，需要具体到一个步骤用的器材的规格，所用药品品牌和量，处理因素的具体方式，因为等到正式实验的时候，差不多就是拿这个方案直接做的了，不要随便应付。

标书的要求并不是十分严格，可以找老师指导一下怎么填写，权当一个练习的过程，但是在以后申请课题的时候标书是很重要的，一定要重点突出课题的创新点及研究意义，如果委员会看不出你课题的亮点的话，必然是毫不留情的BAN掉。

然后就是开题报告，就跟分子技能是一样的，在制作开题报告PPT之前，应该再开个例会，把这个开题报告的内容让每个组员都彻底了解，这是当然要做的，连要做什么都不清楚接下来要怎么做啊。

选一个表达能力较好的人来展示讲解PPT，因为别的小组对你们的方案并不理解，而指导老师的研究方向也不一定跟你的课题方向是一样的，老师也不一定完全明白你的思路，因此如何表达出自己的课题的精髓是一门学问，展示之后是提问环节，同学和老师会对你的展示提出问题，这是好事，如果有人提出一个很关键的问题，说明你的方案还不完善，你得感谢这个人，被指出有问题时不必羞愧也无需愤怒，他们并非刁难你，因为不存在竞争，大家应该有一种共同扶持的精神，一起把大家的实验都搞好，事实上现在老师和同学已经很少会提问题，这是个遗憾，因为主要是从能让大家完成任务的角度出发，就不刁难人了，为什么呢，因为三学期制，我们07级真正的实验时间只有一周半到两周（10-14天）
的时间，而八年制依然可以有4周的时间，因此非八年制的班级在那一个月都宛如活在地狱当中，大家第一次领略到什么叫做时间真的TM不够。

当时我们的经费是每组200块，有人大发牢骚说两个礼拜加200块搞毛线科研，但是最终我们还是以老革命的精神完成了任务，我都不得不为自己为国家省了这么多教育成本感到自豪了，因为我们组最后的花费，仅仅是几盒牛奶的钱。

第四步，预实验
之前说过，可能你们要到的动物跟标准动物模型不一样，这时候就要调整处理方式，使得动物模型可以被复制，而你制订的实验方案效果如何一般都是天知道，所以就要通过预实验来验证。

预实验通常是专门用一只动物来做，或者是做未处理组或者是阴性对照组的结果，不必全做掉，拿一只动物就够，主要是熟悉实验流程，以及熟悉实验结果如何记录，还有发现
实际实验中存在的问题，这些问题往往在开题报告时没有办法发现，真的是谁做谁知道，用我们组题目来举例，我们一开始预想有三个实验结果指标，一个是胃酸pH，一个是溃疡数目及各自长径大小，一个是胃蛋白酶活性，而且一开始是打算用小鼠的，但是预实验之后发现，小鼠的胃太小了，因此转回标准动物模型所用的大鼠，但是做的时候又发现，胃液的量太少，根本不能同时测pH和做胃蛋白酶活性，而且根据我的搜索发现，实验室的滴定设备太烂，仅有一根完完整整的碱式滴定管，容量瓶太大，也不知道装过什么东西，总觉得有杂质，于是就放弃了pH的实验指标，只做胃液胃蛋白酶活性，溃疡方面由于大鼠的胃依然较小，这么一个个数溃疡的数目及长径大小是相当繁琐的工作，于是我们制订了一个“溃疡指数”，将溃疡大小值划分为若干区间并归类统计每个数值区间的溃疡数，改用非参数检验，这样数据处理起来比较容易，而且理论上也合理。

第五步，正式实验
经过预实验的调整，接下来就是真刀真枪实干了，正式实验相比前面要轻松一些，因为已经修改过很多次方案了，而且已经有了操作经验了，做起来会比较熟练，但是最重要的实验记录部分一定要严谨！格式一定要简明易懂，不要记下来之后发现忘了记日期，或者是记得自己也看不懂了。

实验步骤多、周期长的，一定要做好日程计划，精确到每12h的实验是最好的，因为万一哪一步花的时间多了，以后的都要受到影响。

另外就是动物的管理，领到动物之后它们就完全交由你照顾了，每天都要去喂水喂食物，不要以为饿它们一天不会有事哦！另外要注意动物的习性，比如说小鼠死掉的话别的小鼠会把尸体埋到木糠里，所以发现小鼠连续两三天变少了，但是不是你杀的，就要清理一下笼子了。

大鼠比较嗜血，也比较凶残，抓的时候要戴劳工手套，而且如果大鼠受伤了，就必须把它隔离开，不然别的大鼠就会攻击它。

还有一点就是雌雄分笼，这一点应该一开始实验室老师就会强调，不然的话……你就当计生办去吧。

我说过了，实验器材种类有限，有时候未必能找到合你心意的东西，所以有时候就要学会发明创造，自己动手丰衣足食。

我们组的实验中，测胃蛋白酶活性需要用到毛细玻璃管，但是实验室给出来的清单是没有的，我们当时很绝望，因为买的话要一个星期才到货，但是我坚持不懈的翻遍两层楼的实验室，终于让我发现一筒玻璃毛细管，而且口径完全符合我们的要求，仅仅需要调整长度而已，不过裁毛细管也是个技术活，一定要果断剪下去。

我们做胃溃疡的模型，是需要将大鼠固定后泡在20℃左右的水里4h，但是问题是，实验室只有蛙板，没有鼠板，怎么办？我们把铁架台的横杆取下来，用蛙板代替鼠板，用纱布条固定好大鼠和横杆，当时第一次弄的时候真的费了一番功夫，不过所幸还是比较顺利的得到了大量溃疡鼠胃。

在实验时，如果需要做病理切片，就要提前跟病理实验室的老师联系，若是需要借用其他实验室的物品，也要提前联系，用好之后要收拾干净。

我们这个实验数溃疡，就借用了寄生虫实验室的解剖显微镜，这是我们单独找寄生虫实验室老师请求使用的，你们若是需要也可以联系。

做实验，是个体力活，虽说实验室说10点半就要关门，但是实际上做到半夜两三点的人还是有不少的，当时可是正值寒冬，你想想看一天十几个小时都呆在实验室，是一件多么枯燥和疲劳的事情。

我们组虽然时间紧，但是安排比较妥当，最晚就做到12点，但是做完收工
之后往往都是怵怵冻人的状态，又累又饿又冷。

更不要说一天下来还没有看书复习。

所以大家要注意身体，累坏了就相当麻烦了。

做实验的时候最好定期向指导老师汇报进度，并请教有什么可以指导一下的，比如说怎么筛选实验数据，怎么去做统计分析等等。

第六步，数据处理分析，准备论文
数据处理需要用软件辅助，一般都是用SPSS，统计学的FTP有的下，但是中山医有个问题就是，只有口腔五年制和法医系会在做探索性实验之前学过统计学，而其他专业的则统统在做完实验之后的大三下学期学习统计学，因此很多人都不会用SPSS，这个时候，可以找师兄师姐帮忙，或者是找认识的口五或法医系的同学，我自己当时学统计的时候做了一份SPSS 的总结，不过只能用来对付机考，但是却可以当SPSS的入门说明书来用，有兴趣的可以问我要，口腔优先，因为方便。

论文的格式要求实验室会公布，也可以问老师，论文的精髓在于实验结果的分析，讨论这两个部分，如果在做实验的时候发现了一些意想不到的新发现，那是挺难能可贵的，可以重点分析一下。

这里建议论文分为若干个部分由各个组员完成，比如实验数据分析部分由记录人员完成，形态学等部分由当时负责观测的人完成，因为他们对于自己观察到的结果理解最深刻，才能更好的表达出实验的结果。

第七步，结题报告
简单讲结题报告就是一个论文的浓缩版PPT，把最重要的部分移植上去大致就是结题报告了，结题报告类似于论文答辩，虽然实际上只是走个形式，但是在以后答辩的时候，一定要对自己的论文了然于胸，把每个部分都弄个清清楚楚，天知道答辩委员会会问你什么问题。

第八步，完成论文，上交课题作业
到了这个地步就差不多功德圆满啦，大家加油吧！
当时做完探索性实验，我感触颇多，现在想起来，我好像再也没有像那时候这么有毅力，在做完实验筋疲力尽的时候还在看书，哪怕只有半小时。

我们圣诞节、元旦节都献给了这批大鼠，我们组两个男生每次做实验给水槽装水倒水，戴着劳工手套抓老鼠，手天天泡冷水里，一天下来累的话都懒得说。

我是负责处死老鼠的，大鼠生命力比较顽强，我必须用铁棒砸晕加断颈处死的方法才能彻底杀干净，一定要杀死啊，因为试过没杀死结果女生开腹的时候老鼠活了过来把女生吓哭了，那段时间天天杀老鼠杀到自己都有点扭曲。

到了做切片的阶段，由于染色必须等一周没商量，因此前期疯狂杀老鼠取胃，但是一开始固定标本的技术不佳，胃都卷起来了，切的时候甚是困难，好在大家都一一克服了，那时候我们真团结啊。

总之，探索性实验是一个智力、体力和毅力的考验，到了后期考试蜂拥而至的时候更是考验大家团结的时候，请记住，当遇到困难时，你需要勇气和决心！。