对虾传染性肌肉坏死病研究进展

收稿 日期 ：０ ９０ —２ 修 回 日期 ：０ ９０一０ ２ ０—２０ ； ２ ０ —５ｌ 基 金 项 目： 山东 省 高等 学 校科 技 计 划项 目（ ０ ９ ；山东 省 高 等 学 校 优 ２０ ）
秀 骨 干 教 师 国 际 合 作 培 养 项 目 （０ ７ ； ｌ Ｃ ａｔＲ ｓａｃ ａ ｏａ ２ ０ ） Ｇｕｆ ｏ ｓ ｅｅｒｈＬ ｂ ｒ
中 图 分 类 号 ：９ ５ ￥ ４
文献标识码 ： Ａ
文 章 编 号 ： ０ ０ ３ ９ （ ０ ９ ０ — ０ ９０ ｉ ０ — ０ ６ ２ ０ ） ９０ ８ — ３
对 虾 传 染 性 肌 肉 坏 死 病 （ｎｅｔ ｕ ｏ ｅｒ — ｉｆｃｉ ｓｍｙ ｎ ｃｏ ｏ
ｓｓ ＭＮ） 初 于 ２ ０ ｉ，Ｉ 最 ０ ２年 ８ 月 爆 发 于 巴 西 Ｐａ ｉ ｉｕ 州
率可 达 ７ ％ ， 其在 接 近成体 阶段 ， Ｏ 尤 对虾感 染 此病 将 造成 更大 的 经济损 失 。引发 此 病 的原 因可 能 与对 虾 的环 境及 生 理 胁 迫 有 关 ， 如养 殖 过 程 中温 度 及 盐 度 过高 或过 低 、 网捕虾 、 喂劣 质饲 料等 口 ］ 撒 投 。
ｖｒ ａ ） ｅ ａ ｉ ｉ ｄ ｅ 。Ｓ ｎ ｐｎ等 将 印 度 尼 西 亚 的 Ｉ ＮＶ 再 次 ｉ Ｍ 测 序 （ ｎ ａ ｋａ ｃｓｉｎｎ ．Ｅ ０ １ ４ ） 发 现 印 度 Ｇｅ Ｂ ｎ ｃｅｓ ｏ Ｆ ６ ７ ４ ， ｏ
４ 检 测 方 法
目前 ， 已建 立 了几 种 针对 传染 性 肌 肉坏 死 病 毒 的组织 学及 分子生 物学 检测 方法 。如 Ｌｇ ｔ ｅ 等ｕ ｉｈ ｎ ｒ Ｊ 采 用 常规组织 切 片技术 发现 Ｉ ＭＮＶ 主要感 染对 虾的 肌 肉组 织和 淋 巴器 官 ， 感染 组 织 有 深 色 嗜 碱 包 涵 且 体 。Ｐ ｕｏ ｏ ｌｓ等 口 朝建 立 了 Ｉ ＭＮＶ 的套式 Ｒ — Ｃ Ｔ Ｐ Ｒ检 测 方法 ， 计 了 ２对 引 物 ， 引物 扩 增 片段 ３ ８ｂ ， 设 外 ２ ｐ 最 低可 检测 到 １ ０拷 贝 的 Ｉ Ｖ， 引物 扩 增 片 段 ０ ＭＮ 内
前 景做 一综 述 。
２ 病 原 特 性及 分 类地 位
２０ ０ ４年 ， 美 国亚 利 桑 那 大 学 水 产 病 害实 验 室 经 研究 ， 该病 由一种 新病 毒 引起 ， 定名 为 传 染 性 肌 肉 暂
坏 死 病 毒 （ｎｅｔ ｕ ｏ ｅｒｓｓｖｒ ｓ Ｍ ＮＶ）ｌ。 ｉｆｃｉ ｓｍｙ ｎ ｃｏ ｉ ｉ ，Ｉ ｏ ｕ ＿ Ｊ
个 阶段均 可 感 染 ， 因此 在 整个 养 殖 季 节 的 累计 死 亡
的凡 纳滨 对虾 （ ｉ ｐ ｎ ｅ ｓ ａ ｎ ｍｅ ） 殖 场 ， 很 Ｌ ｔ ｅａ ｕ ｎ ａ ｉ 养 ｏ ｖ 并 快在 巴 西 东 北 沿 岸 蔓 延 开 来 ， 目前 已 传 至 亚 洲 。 ２０ ０ ４年 ， 美 国亚 利 桑那 大 学 （ ｉｅｓ ｙｏ ｉ — 经 Ｕｎｖ ｒｉ ｆ ｚ ｔ Ａｒ ｏ ｎ ）水 产 病 害 实 验 室 研 究 ， 病 为 一 种 新 的对 虾 疾 ａ 该
尺
对 虾传 染 性 肌 肉坏 死 病 研 究 进 展
Ａ ｄＶａｎＣｅ ｉ Ｄｅｎａｅｌ１ Ｓ ｌ ｐ ● ｎ Ｃｔ ＾ １ ● ｎ ●Ｉ １ ● ｎｒ ｃ ｍ ｌ Ｊ０ＵＳ ｍ Ｖ０ｎｅ ｏＳ● ｌ ｎｔ ｅ ● ｃｒ Ｉ Ｓ
闫冬 春 Ｋａｈ ．Ｊ ， ｔ ｙＦ ．Ｔａ ｇ ， ｎ ｌ ｎ Ｄｏ ａｄ Ｖ．Ｌｇ ｔ ｅ ｉｈ ｎ ｒ
ｏ ｕ ｃ ｌｕ ｅ Ｃｅ ｔｅ ｎ ＡｓａＰａ ｉｉ， ＮＡＣＡ ） ｆＡｑ ａ ｕ ｔ ｒ ｎ ｒ ｓ ｉ ｉ— ｃｆ ｃ 和
区 ， 巴西 水 产 养 殖 业 造 成 严 重 的经 济 损 失 。２ ０ 给 ０６ 年 ６月 ， 印度 尼 西 亚 东 爪 哇 （ ａｔＪｖ ） 虾 养 殖 场 Ｅ ｓ ａａ 对
１ Ｏ拷 贝 的 Ｉ ＭＮＶ。 中 国 台 湾 Ｆ ｒ ｎ ｎｅｌ ｅ ｅ ａｍｉｇ Ｉ ｔｌｇ ｎ ｉ Ｔｅｈ ｏｏ ｙ 司 （ ｗｗ．ｑ ０ ０ ｉ ｃｍ） 美 国亚 利 ｃ ｎ ｌｇ 公 ｗ ｉ２ ０ ｋｔ ｏ 与 ． 桑那 大 学水 产 病 害 实 验室 合 作 ， 发 出 Ｉ Ｖ Ｔ 研 ＭＮ Ｒ —
（．鲁 东大 学 生 命 科 学 学 院 ，山东 烟 台 ２ ４ ２ ； ．Ｄｅ ａｔ ｎ ｆＶｅｅｉａｙ Ｓ ｉ ｃ ｎ ｃｏ ｉｌｇ ， １ ６０ ５ ２ ｐ ｒｍｅ ｔｏ ｔｒ ｒ ｃ ｎ ｅａ ｄ Ｍｉ ｂｏｏ ｙ ｎ ｅ ｒ
Ｕｎｉ ｅ ｓｔ ｆＡｒｚ ｎａ，Ｔｕｃ ｏ ｖ ｒ ｉｙ ｏ ｉｏ ｓ ｎ，Ａ ｒｚ ｎａ ８５ ２１，ＵＳＡ） ｉｏ ７
尼西亚 的 Ｉ Ｖ 核酸序列与 巴西 的重 复率 为 ９． ， ＭＮ ９６
如此 高度 的相似 率进 一 步验 证 了 印度 尼西 亚 的 Ｉ Ｍ—
ＮＶ 来 源 于 巴 西 。
标记 的 Ｉ ＭＮＶ 探 针结 合 ， 对 虾 的血 淋 巴和 肌 肉 中 在 观察 到 明显 的蓝紫 色 。Ａｎ ｒｄ 等 建立 了 Ｉ ｄａ ｅ ＭＮＶ 的 ｒａ ｔ Ｔ Ｐ Ｒ 定量 检测 方 法 ， 低 可 检 测 到 ｅｌｉ Ｒ — Ｃ — ｍｅ 最
ｔ ｎｏ ｈ ｉ ｄ Ｎａｉｎ ， ＡＯ） 入 亚 太 地 区 水 ｉ ｆ ｅＵｎｔ ｔ ｓ Ｆ ｏ ｔ ｅ ｏ 列 生动 物监 测 季 度 报 告 （ ＱＡＡＤ） 的病 害 监 测 名 录［ 。 ４ ］ ２０ ０ ７年 ， 际 兽 疫 局 （ ｅＷ ｏｌ ｒ ａ ｉ ｔ ｎ ｆｒ 国 Ｔｈ ｒ Ｏ ｇ ｎｓ ｉ ｏ ｄ ａｏ
Ｍ ａｉｅＳ ｉｎ ｅ／ １３ ， ． ／ ０ ９ ｒ ｃｅ ｃ ｓ Ｖｏ． ３ Ｎｏ ９ ２ ０ ｎ
８ ９
ｆ ＝ ７
囊膜双链 Ｒ Ａ病毒 ， 径 ４ ｍ。此病毒 长 ７５０ｂ Ｎ 直 ０ｎ ６ ｐ （ ｎ ａ ｋａｃ ｓｉｎｎ ．ＡＹ ８ ２ ， Ｇｅ Ｂ ｎ ｃｅｓ ｏ ｏ ５ ０ ９ ） 包括 ２个 开放 ７ 阅读框 （ Ｒ １ Ｏ ２ ， 中 ＯＲ １编 码 一 个 Ｒ Ｏ Ｆ ， ＲＦ ） 其 Ｆ ＮＡ 结合蛋 白和一 个衣壳 蛋 白 ， Ｒ ２编码 一个 由 ７ ６个 Ｏ Ｆ ３ 氨基 酸组 成 的依赖 于 Ｒ ＮＡ 的 Ｒ ＮＡ 聚 合 酶 （ ＮＡ— Ｒ ｄｐ ｎ ｅ ｔ ＮＡ ｐ ｌｍｅａ ｅ ［ ］ ａ ｇ等 采 用 ｅ ｅ ｄ ｎ Ｒ ｏｙ ｒｓ ） 。Ｔ ｎ 。 冷 冻 电镜 技 术 及 三 维 构 象 观 察 了此 病 毒 的 精 细 结 构， 发现 Ｉ ＭＮＶ 具有 一个等 轴衣壳 ， 该衣 壳 由 １０个 ２ 亚单 位组 成 。 目前 该 病 毒 已列 入 整体 病 毒 科 （ ｔ Ｔｏｉ —
ｔ ｒ ｎ ｏ ｔｕ Ｍ ａ ｉ ｈ ｉ ｐ Ｆ ｒ ｎｇ Ｐｒ ｇ ａ ，ＣＳ ｏ ｙ Ｃｏ ｓ ｒ ｉ ｍ ｒｎｅ Ｓ ｒｍ ａ ｍｉ ｏ ｒ ｍ ＲＥＥＳ，ＵＳ ＤＡ
（ ０ ２ ３ ８ ８ ０ ３ ５ ２ ０ —８ ０ —１ ４ ）
作 者简 介 ： 闰冬 春 （９１） 女 ， １７一 ， 山东 菏 泽 人 ， 教 授 ， 士 ， 副 博 主要 从 事 水 产 动物 病 害研 究 ， 电话 ：５ ５６７ １２ Ｅ ｍａ ：ａ ｄｈ ｏｇｈ ｈｔ ｉ ｃｒ ０３—６ ２ ， ｉ ｙｎｃｄ ｎｚ＠ ｏｍａ．ｏ ５ ｌ ｌ ｎ
染 的 可能 是 鳃 中 的血 细 胞 。该 病 发 展 较 慢 ， 像 白 不 斑 综 合征 致对 虾 爆 发 性 死 亡 ， 因 在 养 殖 过 程 中 各 但
对虾 中提 取 了 此 病 毒 ， 用 氯 化 铯 密 度 梯 度 离 心 法 并 对病毒进 一步纯 化 。电镜 观察表 明 ， 病毒是一 种无 此
１ ９ｂ ， 二次 扩 增后 最 低 可检 测 到 １ ３ ｐ 经 ０拷 贝 的 Ｉ Ｍ— ＮＶ。Ｔ ｎ ａ ｇ等＿ 】 立了 Ｉ 建 ＭＮＶ 的原位 杂交方 法 （ｎ Ｉ－ ｓｔ ｙ ｒ ｉ ｔ ｎ ， 组 织 切 片 中 经抗 体 与 地 高 辛 ｉ ｈ ｂｉ ｚ ｉ ）在 ｕ ｄａｏ
对 虾 传 染 性 肌 肉坏 死 病 最 初 于 ２ ０ ０ ２年 ８月 爆 发于 巴西 Ｐａ ｉ ， 很 快 传 至 Ｃ ａａ ｉｕ 州 并 ｅ ｒ ，Ｍａａ ｈ ｏ ｒｎ ａ ，
Ｒｉ Ｇｒｎ ｅｄ ｒｅ ｅｎ ｍｂ ｃ ｏ ａ ｄ ｏＮｏｔ ，Ｐ ｒ ａ ｕ ｏ及 Ｐ ｒｉａ等 地 ａａｂ
凡纳 滨对 虾 出现 大 量 死 亡 ， 发病 对 虾 出 现 传 染 性 肌 肉坏 死 症状 。经泰 国 Ｍａ ｉｏ 大学 对 虾分 子 生 物学 ｈｄ ｌ
及生 物化 学 研 究 中心 用 试 剂 盒 检 测 ， 诊 为 传 染 性 确
联合 国粮 农 组 织 （ ｏ ｄ ａ ｄ Ａｇ ｉ ｌ ｒ ｇ ｎｚ— Ｆ ｏ ｎ ｒ ｕｔ ｅＯｒ ａ ｉ ｃ ｕ ａ
病 ， 据其 症 状 ， 定 名 为传 染 性 肌 肉坏 死病 。该 病 根 暂 在 整个 养殖 季 节 可 致 对 虾 累 计 死 亡 率 达 ７ ， ０ ３ ０ ２ ０ 年给 巴西 水产 养殖 业 造 成 ２ ０ ０ ０万 美 元 的经 济 损 失 ， 至 ２０ ０ ５年末 ， 虾传染 性 肌 肉坏 死 病 给 巴西 水 产 养 对 殖业 造成 的 经 济 损 失 达 ４ ４亿 美 元 ＿ ］ ０ ６年 ， ． 】 。２ ０ 该 病 被 亚 太 地 区水 产 养 殖 发 展 网络 中心 （ ｔ ｒ Ｎｅｗｏ ｋ
播 的风险 。
Ａｎｍａ Ｈｅｌ ，ＯＩ ） 其 列 入 需 要 报 告 的 水 生 动 ｉ ｌ ａｔ ｈ Ｅ将
物病 毒性 疫 病 ［ 。作 者 主要 根 据 ２ ０ ～ ２ ０ ５ ］ ０ ４ ０ ９年 的
最 新 文献 ， 这 一 新 的对 虾 疾 病 的 研 究 现 状 及 研 究 对
１ 临床症状及地理ห้องสมุดไป่ตู้布
凡 纳 滨对 虾 仔 虾 （ ｏ ｔ ｒ ａ ） 幼 虾 （ｕ ｅ ｉ ｓ ｐ ｓｌ ｖ ｅ 、 ａ ｊ ｖ ｎｌ ） ｅ
Ｐ ｕｏ ｏ ｌｓ等 采 用蔗糖 密 度梯 度 离心 法 从发 病 凡 纳滨
及 接 近成体 虾 （ ｕ ａ ｕｔ 均 可 感 染 传 染 性 肌 肉 坏 死 ｓｂｄ ｌ ） 病 ， 染对 虾 腹部 末端 体 节 及尾 扇 出现 肌 肉坏死 ， 感 呈 现肌 肉发 白及 不 透 明症 状 ， 观 呈 烤 焦 状 。组 织 学 外 观察 表 明 ， 病 主 要 感 染 对 虾 的 肌 肉组 织 和 淋 巴器 该 官 ， 常伴 随 着浮 肿及 血 细胞 纤 维 化 ， 且 在坏 死 肌 纤 维 及纤 维化 的 血 细 胞 之 间 常 有 液 体 堆 集 ， 淋 巴 器 官 在 及 肌 肉细胞 质 中常有 深 色 嗜 碱 包 涵体 口 。在 组 织 切 ］ 片中， 观察 到 对虾 的鳃 有 时 也 能被 感 染 ， 真 正 被 感 但
肌 肉坏死 病 。分 析 其 传 播 途 径 ， 能 是 印 度 尼 西 亚 可 育苗 场用 了 巴 西 走 私 过 来 的 亲 虾 所 致＿ 。 至 此 ， ６ ］ 确 定对 虾传 染 性 肌 肉坏 死 病 已传 入 亚 洲 ， 也 说 明对 这 虾苗 种和 亲 本 的 跨 国际 、 区域 移 动 加 剧 了病 原 传 跨