第1章 细菌形态与结构
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(2)细胞壁的化学组成与结构
革兰染色法
细胞壁化学组成与结构
革兰染色的机理
青霉素的作用
失去细胞壁的细菌
①革兰染色法:
革兰染色法是细菌细胞的ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ合染色法,由丹麦 医生Hans Christian Gram 于1884年创立。 基本步骤: 涂片固定—— 结晶紫初染1min—— 碘液媒染 1min——95%乙醇脱色0.5min—— 番红复染1min 结果: 革兰阳性菌——兰紫色; 革兰阴性菌——红色。
c 由四肽侧链上第一条第3位L-赖aa与第二条第4位D丙 aa之间形成甘氨酸五肽。青霉素作用于第 4和第 5个 甘 aa之间这三者之间构成了十分坚韧的三维立体结构。
②磷壁酸:是 G+ 菌特有成分,是一种核糖醇或甘油 的多聚物,并带有一些氨基酸或糖。约 30 个或更多 的磷壁酸分子组成长链,穿行于肽聚糖层中。 壁磷壁酸:长链的一端与肽聚糖上的胞壁酸以共
价链连接,另一端游离于细胞壁外,称
为壁磷壁酸。
膜磷壁酸:长链的一端与细胞膜外层的糖脂以共
价键相连,另一端穿过肽聚糖层到达
细胞壁表面,叫膜磷壁酸,又叫
脂磷壁酸。
壁磷壁酸(含量多,通过共价键与
肽聚糖分子结合,并延伸到肽聚糖分
子表面)
膜磷壁酸
(与细菌细胞膜 的脂类结合)
磷壁酸功能: a 是G+特有成份,是特异的表面抗原, 与血清分型有关。 b 与Mg2+结合,以维持细胞膜上一些酶 活性。 c 对宿主细胞具有粘附作用,是A群链球 菌毒力因子,或为噬菌体提供特异的 吸附受体。
双杆菌
链杆菌
杆菌(bacillus):大小及排列方式不同
炭疽杆菌 3-10 μ m
大肠杆菌 2-3 μ m
(三)螺旋菌(spirilla)
螺旋状的细菌称为螺旋菌。 根据其弯曲情况分为: 弧菌(vibrio):螺旋不满一圈,菌体呈弧形或逗号形 例:霍乱弧菌、逗号弧菌 螺旋菌(spirillum):螺旋满2—6环,螺旋状 例:干酪螺菌 螺旋体(spirochaeta):旋转周数在6环以上,菌体柔 软。 例:梅毒密螺旋体
1. 单球菌:
细胞分裂沿一个平面进行, 新个体分散而单独存在.
如尿素微球菌(Micrococcus
ureae)
2. 双球菌:
细胞沿一个平面分裂,新个 体成对排列.
如肺炎双球菌 (Diplococcus pneumoniae)
3. 链球菌:
细胞沿一个平面进行分裂,新个体不 但可保持成对的样子,并可连成链状. 如: 乳链球菌 (Streptococcus lactis)
第一节 细菌的形态和大小 一、细菌细胞的形态及排列状态 二、细菌的大小
一、细菌细胞的形态
细菌按其外形,主要有
球菌 杆菌 螺旋状菌
⊕
Bacterial shape examined microscopically
(一)球菌(coccus)及其排列状态
菌体呈球形或近似球形,以典型的二分裂殖方式 繁殖,分裂后产生的新细胞常保持一定的空间排列方 式.根据细胞分裂的方向及分裂后的各子细胞的空间 排列状态不同,可将球菌分为以下几种: 单球菌、双球菌、链球菌、四联球菌、八叠球菌、葡 萄球菌等。
细胞按三个互相垂直的 平面进行分裂后,每八 个球菌特征性地连在一 起成立方体形. 如藤黄八叠球菌 (Sarcina ureae)
6. 葡萄球菌:
细胞无定向分裂,多个 新个体形成一个不规则 的群体,犹如一串葡萄。 如: 金黄色葡萄球 菌(Staphylococcus
aureus)
白色葡萄球菌 (Staphylcoccus albus)
革兰阳性或阴性菌,形成L型大多染成革兰阴性。
临床分离葡萄球菌L型
葡萄球菌L型回复后
培养特性和菌落形态
细菌L型生长缓慢,营养要求高,必须用高渗的培养基。 细菌L型在高渗的培养基上生长后形成三种类型的菌落。
油煎蛋样菌落 (典型L型菌落)
颗粒型菌落
丝状菌落
2、细胞膜 细胞膜是紧贴细胞壁内侧 包围细胞质的一层柔软、富有 弹性的半透明薄膜。
与细菌黏附和特 定物质摄取有关
使肽聚糖与外膜 层牢固连接
脂蛋白
参与营养物质转运
②内胞壁(也叫周质间隙): 比较薄,主要成分为粘肽。含有 G -特有 AA, L-二氨基庚二酸。 主要骨架和交联方式与G+菌相似,肽侧链上 的 L- 赖氨酸被 L- 二氨基庚二酸取代,且 L- 二氨基 庚二酸与D -丙氨酸之间直接相连,中间没有甘氨 酸五肽桥。
脂蛋白:交联外膜和内胞壁的肽聚糖层
脂多糖(lipopolysaccharid, LPS)
侧链多糖(有种型特
异性)
核心多糖(有属特
异性)
类脂A
(无种属特 异性,内毒 素的主要毒 性成分)
功能:(1)能够吸附钙离子、镁离子等阳离子; (2)为噬菌体提供特异的吸附受体
外膜蛋白(OMP)
分子筛作用
微孔 蛋白
④青霉素的作用
作用于肽聚糖肽桥 的联结,即抑制肽聚 糖的合成,故仅对生 长着的菌有效,主要 是G+菌。
细菌细胞壁的缺陷型
①细菌L型:细菌自发或经诱导剂诱导下, 细菌的细胞壁缺损或失去了细胞壁的细菌。 菌体呈多形态型,能长久或短暂地进行分裂 和繁殖,其菌落为“油煎蛋样”。(霉形体 菌落也为油煎蛋样)通常将细胞壁缺陷的细 菌,包括原生质体及原生质球统称为L形细 菌。
①细胞膜的化学组成
主要包括
蛋白质 磷脂 糖类 少量核酸
G-细胞壁构造(以大肠杆菌为代表)
①外胞壁(由外向内) 特异性多糖:也叫O特异性链,由3-5个低聚糖单位重 复构成的多糖链,是G-菌体抗原也叫“O ”抗 脂多糖 原有种、型特异性。
核心多糖:位于类脂A外层,由葡萄糖,半乳糖组成,与
类脂多共价联结,具有属特异性。 类脂A:是细胞内毒素的主要成分,能致使动物发热, 白C增多,直至休克死亡,G-类脂A相似,无种属特异性。 外膜:磷脂双分子层,蛋白质穿插其中。(液态镶嵌膜型)
第一篇 总 论
第一章 细 菌的形态和结构
定义:细菌是原核生物界中的一大类单细 胞微生物,它们的个体微小、形态与结构 简单、具有细胞壁、细胞膜、细胞质、核 质,无真正的细胞核、无核膜,以二等分 裂方式繁殖和普通光学显微镜下可见的一 类微小生物。
生存环境:温暖潮湿、富含有机物的地方, 都有大量细菌活动。有特殊的臭味或酸败 味,发粘、发滑。
②细胞壁的化学组成与结构 细菌细胞壁的化学组成:
革兰阳性细菌与革兰阴性细菌细胞壁成分比较 革兰阳性 厚度 肽聚糖 脂类 磷壁酸 外膜 脂蛋白
厚 15-80nm 多 40%-95% 少 1%-4% 有 无 无
革兰阴性
薄 10-15nm 少 10%-20% 多 11%-22% 无 有 有
脂多糖
无
有
②细胞壁的化学组成与结构
革兰阴性菌肽聚糖—聚糖骨架、四肽侧链
G-
G+细胞壁构造(以葡萄球菌为代表) ①肽聚糖(粘肽)粘肽的组成:
a 由 N-乙酰葡萄糖胺和 N-乙酰胞壁酸通过 β -1,4糖苷 键交联成骨架。溶菌酶可作用于 β -1,4糖苷键使之断 裂。
b 由 L-丙氨酸, D-谷 aa, L-赖 aa, D-丙 aa形成四肽侧 链,均连结于胞壁酸
②原生质体:G+菌用溶菌酶或抗生素处理后, 完全除去细胞壁,剩下的由细胞膜包裹细 胞质的球状菌体。它由人工方法形成,不 能进行分裂和繁殖。 ③圆质体(原生质球):G-菌除去细菌壁 中的肽聚糖成分,而仍然保留细胞壁的其 他成分形成一个疏松的有“外套”的球状 体。
形态和染色性
细菌L型呈高度多形性,大小不一。着色不匀,无论其原为
菌苔:各“菌落”相互连接形成一片。 平板培养
二、细菌的大小
(1)长度单位:细菌个体微小,要经染色后在光 学显微镜下才能看见。微米(μm) (2)表示: 球菌:直径 杆菌: 宽×长 螺菌: 宽、长、螺距
通常球菌直径:0.2 — 1.5 μ m, 杆菌:长1— 5 μm, 宽0.5— 1 μm。 例如:E.coli:平均长度:2 μm ; 宽度0.5μm 1500个大肠杆菌头尾相接等于3mm; 109个大肠杆菌重1 mg.
无乳链球菌(Streptococcus
agalactiae)
溶血链球菌 ( Streptococcus
hemolyticus)
4. 四联球菌:
细胞分裂是沿两个相垂直的 平面进行,分裂后每四个细 胞特征性地连在一起,呈田 字形.
如四联微球菌
(Micrococcus tetragenus)
5. 八叠球菌:
细菌大小举例
菌名 直径或宽×长/ (μ m×μ m)
乳链球菌 金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 枯草芽孢杆菌 霍乱弧菌
0.5 ~1 0.8 ~1 0.5 × (1 ~3) (0.8 ~1.2) ×( 1.2~3) (0.2 ~ 0.6) ×(1 ~ 3)
第二节、细菌的构造
基本结构包括: 细胞壁、细胞膜、细胞质、拟核 特殊结构包括: 荚膜、鞭毛、纤毛、芽孢。
3-6%食盐 鼠疫杆菌────→多形态性(衰残型)。 琼脂培基
流感嗜血杆菌
▼细菌的异常形态
结核杆菌的正常形态
结核杆菌的异常形态
▼细菌特殊形态
柄细菌、肾形菌、臂微菌、网格硫细菌、 贝日阿托氏菌(丝状)、具有子实体的粘细 菌等是特殊形态的细菌。
▼细菌的群体形态
菌落:单个细菌在适当的固体培养
基表面或内部,经过一段时间培养 后,生长繁殖出数量巨大的菌体, 形成肉眼可见、有一定形态的群体。 可用于细菌的分离、纯化、计数和 鉴定。
细菌细胞壁的结构:
细胞壁的基本骨架——肽聚糖
肽聚糖:是由 N—乙酰胞壁酸(NAM)和N—乙酰葡
糖胺(NAG)以及少数氨基酸短肽链组成的亚单位聚 合而成的大分子复合体。
肽聚糖单体:是由NAG 、 NAM 、肽尾、肽桥构成。
细胞壁的基本骨架——肽聚糖
N-乙酰葡糖胺 N-乙酰胞壁酸
溶菌酶作用点
+ G
青霉素作用点
①革兰染色法
阳性菌
阴性菌
细菌细胞壁的结构
革兰阳性菌细胞壁:由肽聚糖和磷壁酸组成
壁磷壁酸 膜磷壁酸 阳性菌特有
肽聚糖
革兰阴性菌细胞壁 外膜(外壁层):
位于肽聚糖层的外部。 脂多糖 微孔蛋白 外膜蛋白 脂蛋白 磷脂
微 微 孔孔 蛋蛋 白白 磷 脂
内壁层(周质间隙):
紧贴胞膜,仅由1—2层肽聚糖 分子构成。
出现不同的反应。
G+ 菌:细胞壁厚,肽聚糖含量高,交联度 大,当乙醇脱色时,肽聚糖因脱水而孔径 缩小,故结晶紫-碘复合物被阻留在细胞内, 细胞不能被酒精脱色,仍呈紫色。 Gˉ菌:肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色 不能使其结构收缩,因其含脂量高,乙醇将 脂溶解,缝隙加大,结晶紫-碘复合物溶出 细胞壁,酒精将细胞脱色,细胞无色,沙 黄复染后呈红色。
间体
细胞壁 细胞膜
质粒 核体 核蛋白体 内含物
细胞质
气泡
细菌结构模式图
细菌细胞结构
(一)细菌细胞的基本结构
1、细胞壁 细胞壁是位于菌体的最外层,一层无色透明,坚韧 而有弹性的膜状结构。细胞壁约占细胞干重的10%—25%。 (1)细胞壁的功能 保护细胞免受外力损伤,维持菌体外形 协助鞭毛运动 与胞膜一起完成细胞内外物质交换 为正常细胞分裂所必需 与细菌的抗原性,致病性和对噬菌体的敏感性密切相关
(二)杆菌(bacillus)及其排列状态
杆菌是细菌中种类最多的类型,因菌种不同,菌体细胞的长 短、粗细等都有所差异。
杆菌的形态:短杆状、长杆状、棒杆状、梭状杆状、月亮 状、竹节状等;按杆菌细胞繁殖后的排列方式则有链状、 栅状、“八”字状等。
梭状芽孢杆菌 短杆菌
长杆菌
杆菌(bacillus):分裂后排列方式不同
补:▼影响细菌形态的 因素
培养时间、 培养温度、 培养基成分、 浓度、 pH值
▼细菌的衰老型和多型性
细菌在适宜条件下培养,在对数繁殖期的 菌形比较典型和一致。不良环境或老龄期,会 出现和正常形状不一样的个体,称为衰老型或 退化型(involution form)。重新处于正常的培 养环境时,可恢复正常的形状。但也有些细菌 ,纵使在适宜的环境中生长,其形状也很不一 致,这种现象称为多形性(pleomorphism),如 嗜血杆菌 (Hoemophilus)。
G+` G-肽聚糖的组成不同
肽尾第三氨基酸不同 G+ 赖氨酸
G- 二氨基庚二酸
G,M都是ß -1,4-糖苷键连接 肽桥 G+:5个甘氨酸 G-:肽键
③ 革兰染色原理:
第一步:结晶紫使菌体着上紫色 第二步:碘和结晶紫形成大分子复合物,分 子大,能被细胞壁阻留在细胞内。 第三步:酒精脱色,细胞壁成分和构造不同,