微生物检测作业指导书

一．目的：为确保产品质量得到控制，依据GB15979及《消毒技术规范》规范制定微生物检测方法。

二．范围：适用于原料、包材、产品微生物检测（细菌/霉菌和真菌总数）。

三．职责：由研发部/实验室负责执行实施。

四．内容

4.1检测前准备：

4.1.1将检测用的试管、刻度吸管等洗净后置于干燥箱内干燥后备用。

4.1.2将使用过的培养皿连同培养基煮沸15-30分钟后，用清洁液洗净晾干备用。

4.1.3 0.9%生理盐水配制：准确称取9g氯化钠，加入1000ml去离子水。

4.1.4 中和剂配方

1) 磷酸盐缓冲液（PBS，0.03mol/L，pH7.2）无水磷酸氢二钠 2.84g磷酸二氢钾 1.36g 蒸馏水加至 1000ml

将各成分加入到1000ml 蒸馏水中，待完全溶解后，调 pH 至7.2～7.4，于121℃压力蒸气灭菌20min备用。

2) 硫代硫酸钠中和剂（0.1%） pH7.2-7.40.03mol/L磷酸盐缓冲液 100 ml硫代硫酸钠0.1g于121℃

压力蒸气灭菌15min备用。

3) 0.3%（W/V）吐温80和0.3%卵磷脂 pH7.2-7.40.03mol/L磷酸盐缓冲液 100 ml吐温80 0.3g+0.3g卵磷脂于

121℃压力蒸气灭菌15min备用。

4) 0.3%甘氨酸 pH7.2-7.40.03mol/L磷酸盐缓冲液 100 ml甘氨酸 0.3g于121℃压力蒸气灭菌15min备用。

5) 对于复方或特殊消毒剂的中和剂，根据厂家提供的资料选用合适的中和剂或用以下中和剂:

4.2灭菌：

4.2.1干热灭菌法(160℃-170℃，2小时):适用于培养皿、取样用称量瓶、刻度吸管的灭菌。4.2.2湿热灭菌法(121℃，0.1Mpa，15-30min)：适用于培养基溶液、生理盐水、培养皿

、吸管、取样棉球等的灭菌。

4.3原料、产品微生物检测：

4.3.1抽样

a固体样品

用消毒取样器于同一个批次三个大包装（三个以上员工的产品）中至少随机抽取90g或抽取12个最小销售包