茶多酚抗癌活性

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!营养卫生
食品科学
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茶多酚抑制人膀胱癌细胞生长的研究
郭峰
摘 要
张军
同济大学医学院生物教研室源自上海"##((!
研究不同浓度茶多酚对人膀胱癌 *+ 细胞的抑制和杀灭的作用。 用细胞生长曲线观察不同剂量的茶多酚对 *+
细胞增殖的影响， 用琼脂糖凝胶电泳来检测细胞凋亡还是死亡。结果表明： 细胞生长曲线证实茶多酚对 *+ 细胞生长有 明显的抑制作用，抑制强度与茶多酚浓度呈正相关；!", - ,## !. / 0& 浓度茶多酚琼脂糖凝胶电泳呈典型的 “ 梯状电泳 1 2)3 &45567 8 带； 茶多酚在浓度 !### !. / 0& 时， 人膀胱癌 *+ 细胞被杀灭。 关键词 茶多酚 膀胱癌 细胞凋亡
作用于体外培养的膀胱癌 *+ 细胞株，观察 *+ 细胞 的生长情况和生理生化改变，为了解茶多酚是否能 够抑制人类泌尿系统肿瘤以及茶多酚是如何抑制人 类膀胱癌细胞生长的机制提供有一定价值的依据。 ! !O ! 材料与方法 茶多酚的制备
ILP：参照文献 M " N 。茶多酚：用含量为 Q,H 的 茶 多 酚 1 购 于 浙 江 大 学 茶 叶 研 究 所 8 用 ILP 配 制 为 !#H 浓度后，用 #’ ""!0 滤菌器过滤，分装后避光 RS 保存备用。 " "O ! 方法 膀胱癌 *+ 细胞株培养
同浓度茶多酚培养，其中 #!. / 0& 茶多酚组为空白对 照组并在 "R、 R\、 ["< 做细胞计数，每组 ( 瓶，取 其平均数。计数时，用 #’ "H 台盼蓝 1 Y<7%04 产 8 ILP 溶液与待测细胞悬液等量混合，置于血细胞计数板 下，计活细胞数，绘制生长曲线。 "O ( 琼脂糖凝胶电泳 按文献介绍的方法进行 M ( N 。主要步骤为：茶多酚 作 用 "R<@ 收 集 细 胞 1 ! ] !#V 个 / 0& 8 ， 抽 提 细 胞 2)3； 取 制 备 好 的 样 品 2)3"#!& 用 !H 琼 脂 糖 电 泳，^$ 灯下观察、摄影。 ( (O ! 结果 茶多酚对 *+ 细胞增殖生长的影响
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食品科学
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实膀胱癌 ./ 细胞在茶多酚在 "7# * 7##!+ , -& 时，细 胞发生凋亡。以 7##!+ , -& 的茶多酚浓度处理 ./ 细 胞 "56 后的细胞凋亡的 1)2 梯形条带最为明显。当 茶多酚浓度在 !###!+ , -& 处理 ./ 细胞后， ./ 细胞 被杀灭，琼脂凝胶电泳检测到 1)2 呈 =-:8; 带型。 茶多酚浓度小于 !"7-+ , -& 时，在琼脂凝胶电泳检测 中 1)2 梯 形 条 带 不 明 显 。 见 图 (。 本 实 验 提 示 用 7##!+ , -& 茶多酚浓度处理 ./ 细胞，时间处理 "56 是抓取 ./ 细胞凋亡的最佳剂量。用细胞生长曲线研 究表明，茶多酚在 ! * !"!+ , -& 浓度范围内即可对 ./ 细胞生长有抑制作用。茶多酚浓度越大， ./ 细胞 受抑制程度越大；茶多酚作用时间越长，对 ./ 细胞 生长抑制也越大。 茶抗癌的机制之一是茶多酚使癌细胞凋亡，国 内有人用茶多酚或茶浸出液在体外诱导癌细胞凋亡 的报道，如白血病 >? @ A# 细胞、大肠癌 ?B$B 细胞 和胃癌细胞凋亡的报道，研究热点主要集中在茶抗 消化道肿瘤上 C 5 * D E 。我们的研究对象选择膀胱癌 ./ 细胞株，是因为我们想了解茶多酚是否能够在体外 抑制泌尿系统肿瘤细胞的生长。我们的研究表明， 茶多酚能在很低的浓度 ! * !"!+ , -& 范围即可抑制 ./ 细胞的生长。实验同时证明，茶多酚的浓度是决 茶多酚在 ! * !"!+ , -& 的浓度下对 ./ 细胞增殖 生长均有不同程度的抑制作用。茶多酚的浓度越 大，作用时间越长， ./ 细胞生长受抑制程度越大， 生长曲线见图 !。 图 ! 图 " 结果表明：茶多酚在 ! * !"!+ , -& 浓度 范围内对 ./ 细胞生长均有抑制作用。茶多酚浓度越 大 ， ./ 细 胞 受 抑 制 程 度 越 大 ； 茶 多 酚 作 用 时 间 越 长，对 ./ 细胞生长抑制也越大。 (0 " 茶多酚对 ./ 细胞作用后核内 1)2 的影响
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定 ./ 细胞是被抑制还是细胞凋亡或者被杀灭的关 键。
参考文献 赵燕， 曹进， 祝合成 ’ 茶抗消化道系统肿瘤的研究进展 C / E ’ 肿瘤， !FFG ， !G 3 " 4 ： !"! * !"(’ 刘鼎新， 吕证宝 ’ 细胞生物学研究方法与技术 C H E ’ 北京医科 大学， 中国协和医科大学联合出版社 !FF# ， !! ： F @ !!’ 彭黎明， 王曾礼， 邓承祺等 ’ 细胞凋亡的基础与临床 C H E ’ 人民 卫生出版社 "### ， D： !7( * !G!’ 李楠， 宋炳辉， 林亚伦等 ’ 茶多酚的研究进展 ’ 江西中医学 院学报， !FFF ， !! 3 ( 4 ： !5# * !5!’ 谭晓华， 周殿元 ’ 茶多酚抗癌机理新进展 ’ 肿瘤， "### ， "# 3"4： !(G * !5#’ 赵燕 ， 曹进 ， 刘 箭卫 等 ’ 茶多 酚在 体外 诱导 >? @ A# 细胞 的凋亡 ’ 中华病理生理杂志， !FFF ， !7 3 ( 4 ： "A5 * "AD’ 谭晓华， 张亚历， 周殿元等 ’ 绿茶水提取物诱导体外培养 的 大 肠 癌 ?B$B 细 胞的 凋 亡 ’ 癌症 ， !FFG ， !D 3 ( 4 ： !D! * !D5’
经过不同浓度的茶多酚 3 # * !##!+ , -& 4 处理 "56 后，茶多酚 "7# * 7##!+ , -& 组的 ./ 细胞 1)2 呈现 “ 梯状” 3 &899:; 4 图谱。当茶多酚浓度超过 !###!+ , -& 时， ./ 细胞 1)2 呈 <-:8; 带纹，表明 ./ 细胞已 经死亡。茶多酚 !"7!+ , -& 浓度组电泳结果与空白组 基本 一致。结果见图 (。 5 讨论 本实验用检测细胞凋亡琼脂糖凝胶电泳法，证
茶多酚 1 ;64 ?<%&E?<6:%&> 8 是中国人最喜爱的饮料 茶叶中的一种成分，它是一种酚类化合物。近期研 究表明，茶多酚对人类消化系统的胃癌、大肠癌细 胞有抑制和杀灭作用 。本实验用不同浓度的茶多酚
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细胞生长曲线绘制 取对数生长期的细胞，分别加入 # - !"!. / 0& 不
采用 TIU9 !VR# 培养液，含青霉素 !##!. / 0&、 硫 酸 链 霉 素 !##!. / 0&、 庆 大 霉 素 !##!. / 0&， 含 !#H 小 牛 血 清 ， 抽 滤 灭 菌 ， 以 !’ #0%& / W XY& 或 !’ #0%& / W )4ZX 调节 ?X 值至 [O #，细胞接种于 ,#0& 培养瓶中， ([S ,H YZ" ，饱和湿度空气中培养。 *+ 细胞株来源于北京大学泌尿外科研究所。