维生素C的定量测定——磷钼酸法精

四、实验试剂
1. 桔子，绿色菜叶等 10-20g 2. 5% 钼酸铵 3. 0.05M草酸-0.02MEDTA溶液 4. 硫酸 （硫酸:水=1:19） 5. 乙酸 （乙酸:水=1:5） 6. 偏磷酸-乙酸 7. 标准维生素C溶液 （4℃，1W）
五、实验步骤
1. 制作标准曲线 取6支洁净试管，编号按照下表操作，以A760nm为纵坐 标，以V.C质量（µg）为横坐标制作标曲。
试管 试剂(ml) 标准维生素C溶液 蒸馏水 草酸—EDTA溶液 偏磷酸-乙酸 1:19硫酸 5% 钼酸铵
V.C质量（µg） A760nm
123
4
5
6
样品
0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 0.5
1.0 0.8
0.6 Байду номын сангаас.4 0.2 0.0 0.5
各2.0ml 各0.5ml 各1.0ml 各2.0ml 混匀，30℃ 水浴15min，立即比色
0 50 100 150 200 250
0.000
五、实验步骤
2. 样品测定 材料洗净擦干，称取1g，加入草酸—EDTA溶液10ml研磨充分，取 上清离心，4000rpm，5min，留上清备用，样品参照上述表格操作， 根据A760nm值在标曲上查找V.C质量。 3.计算 m = m0.v1× 100 / （m1 v2× 103） 说明: m 100g样品中含V.C质量（mg） m0. 查标曲得V.C质量（µg） v1 稀释后总体积 （10ml） m1 称样体积（1g） v2 测定时取样体积 （0.5ml） 103 µg 换成mg
维生素C的定量测定
——磷钼酸法
一、实验目的
了解维生素C的测定方法，理解其理化性质。
二、实验原理
钼酸铵在一定条件下（硫酸和偏磷酸根离子 存在）与维生素C反应生成蓝色结合物，在 一定范围内，A与浓度成正比
三、实验器材
1.分光光度计（760nm），比色皿 2.计算纸（9 cm×9 cm） 3.37℃水浴 4.离心机 （离心管100ml 、50ml） 5.组织捣碎机