不同加热方式对透明质酸钠黏度的影响

不同加热方式对透明质酸钠黏度的影响

刘文庆樊保平陈捷红石滨透明质酸（hyaluronic acid,简称HA）是酸性黏多糖物质之一，是由葡糖醛酸-N-乙酰氨基葡糖为双糖单位组成的直链高分子多糖，通常以其钠盐形式存在。国内外已对HA的分布、化学结构、理化性质、生理功能及应用方面进行了广泛深入的研究[1]，目前HA广泛应用于眼科、骨科等医学领域和化妆品工业中。目前所用的HA的平均分子量一般大于106，近年来的研究发现，分子量较小的HA 具有特殊的生理功能。HA大分子容易发生降解，因此可利用不同的方法处理高分子量HA，得到分子量较小的HA产品。加热降解是简单、易于控制的HA降解方法，本实验就不同加热方式对HA黏度的影响进行了考察。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

恒温水浴（±0.1℃），电热恒温干燥箱,立式灭菌锅、平式黏度计（φ1.0mm）HA，山东福瑞达生化工有限公司生产,批号20011018,20020209。

1.2 方法

1.2.1 HA运动黏度的测定，按中国药典2000版附录VI G的黏度测定法[2]（第一法）测定其运动黏度，精密称取按干品计算的HA100mg于100ml容量瓶中，以蒸馏水溶解，定容至刻度，在25ºC恒温水浴中，以Ф1.0mm平式黏度计测定其运动黏度。

1.2.2不同加热方式对HA运动黏度的影响

1.2.2.160ºC、80ºC、100ºC水浴加热对HA溶液运动黏度的影响将20011018批HA配制成0.1%（g/ml）溶液置于水浴中，每隔15min取样测定其运动黏度，共保温90min。

1.2.2.2121ºC湿热处理对HA黏度的影响取150ml碘量瓶，精密称取按干品计算的HA粉末，加棉塞，置于立式灭菌锅中，121ºC加热处理，取出后加入100ml 水溶解，测定运动黏度。

1.2.2.3 100ºC干烘对HA黏度的影响将HA粉末置于电热恒温干燥箱中，100ºC加热处理，取样测定运动黏度。

1.2.2.4 121ºC加热处理对1%HA溶液运动黏度的影响在2000ml三角瓶中加入

1000ml蒸馏水，在不断搅拌下缓缓加入精密称取按干品计算的HA粉末10g，摇匀，放入立式灭菌锅中，121ºC加热处理，冷却至室温，称取5gHA溶液，放入50ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀，测定运动黏度。

2 结果

2.1 60º C、80ºC、100ºC水浴加热对0.1%HA溶液运动黏度的影响

T/(min)0 15 30 45 60 75 90

60ºC47.5848.5447.9648.6348.5448.7348.54 80ºC47.1047.2947.1946.9145.9545.6746.81 100ºC46.8140.3035.5233.9830.9230.7330.63 2.2 121º湿热处理对HA黏度的影响

T/(hr)0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5

77.9 5.8 3.5 2.0 1.8 1.6 1.3 1.2

运动黏度

/(mm2/s)

2.3 100ºC烘箱内干烘对HA黏度的影响

T/(hr) 0 2 4 6 8 10 12 14

34.8 31.0 26.2 23.0 21.1 18.0 16.9 13.6

运动黏度

/(mm2/s)

2.4 1%HA溶液121ºC降解

T/(hr)0 0.5 1.0 1.5 2.0

39.5 12.5 6.2 5.4 4.1

运动黏度

/(mm2/s)

HA大分子易发生降解[3]，采用不同方式处理所得的低分子量HA，可能会因为降解部位的不同，其生理功能略有差异[4]。与双氧水氧化、紫外线照射、γ射线照射等方法相比，加热处理具有操作简单、易于控制的优点，尤其是HA溶于水后，由于水的保护作用，HA的降解更加温和。60ºC处理0.1%HA溶液，对其黏度几乎没有影响，80ºC短时间（小于60min）处理对其黏度影响甚小，100ºC短时间处理后，其黏度也仅有轻微下降。HA浓度越高，加热处理后，其

黏度下降越剧烈。120ºC湿热处理HA粉末，虽然可以迅速降低其运动黏度，但出现了溶液颜色变黄的现象。120ºC处理1%HA溶液，只有加热时间超过4小时以上，才会出现这种现象。我们采用120ºC加热处理1%HA溶液的方法，可以得到平均分子量小于200000的产品。值得注意的是，HA在其分子量下降到一定程度后,其黏多糖的性质会发生改变，这为制备低分子量HA固体带来了一定的困难。

参考文献

1王凤山，凌沛学，郭学平，等．生化药物研究，北京：人民卫生出版社，1997，266～271

2国家药典委员会．中华人民共和国药典，北京：化学工业出版社，2000，44～

46 （附录）

3凌沛学，贺艳丽，郭学平，等．北京：中国轻工业出版社，2000，21～23

4郭学平，凌沛学，张天民．山东省药学会第五次生化药物学术研讨会论文集，2002，24～27

[原文发表于：2003年全国生化与生物技术药物学术研讨会论文集，丹东，2003，