几种茶多酚测定方法的比

几种茶多酚测定方法的比较

陈惠衡施玲

（湖南农业大学长沙 410128）

摘要用几种不同的测定方法，对不同种茶叶原料提取物中多酚的测定结果进行了比较，提出了几种测定方法之间的差异和规律。

关键词茶多酚、酒石酸铁法、Folin—Denis、HPLC法

茶多酚是茶叶中的主要有效成分，茶中多酚含量的多少，可以反映出茶叶品质的优劣。测定茶多酚的方法很多，但我们所常用的方法有酒石酸铁法和菲林试剂法，特别是前者，以其快速简便，容易掌握重现性好而经常使用。但是在实验过程中，笔者发现，茶的品种不同，用不同的方法测定出来的多酚结果也不同，并且从大量的分析数据中找出了其中的规律。

1．实验材料与方法

1.1 仪器与材料

高效液相色谱（美国Beckman公司）

754紫外－可见分光光度计（上海分析仪器厂）

金农公司生产的速溶绿茶、儿茶素

1.2 实验方法

1.2.1 酒石酸铁法见GB 8313－87

1.2.2 Folin－Denis法

1.2.2.1 原理：Folin试剂能氧化茶多酚和其它还原性物质并显色。

1.2.2.2 试剂：15%碳酸钠菲林试剂

1.2.2.3 实验步骤：

（1）绘制标准曲线：吸取标准单宁酸溶液0－10ml一组，分别置于100ml容量瓶中。各加水75ml，Folin试剂5ml，15％碳酸钠溶液10ml，加水定容至刻度，混匀。在30℃条件下，恒温反应30min，于波长760nm处测定吸光度，计算出线性回归方程。

（2）样品的测定：精确称取40.00－120.00mg（视样品的含量多少而定），加水溶解后定容至100ml。取1ml试液置于100ml容量瓶中，以下步骤同标准曲线绘制。测定吸光度。利用回归方程计算含量。

（3）实验注意事项：实验过程中温度和时间对其结果有较大影响，必须恒温、定时。

1.2.3 儿茶素的HPLC分析

样品制备：

a: 精确称取30mg儿茶素样品于50ml容量瓶中，用水稀释，超声5min，冷却定容；

b: 0.45um超滤膜处理后待分析；

1.2.4 仪器：美国Beckman公司生产的HPLC，126泵，168检测器

1.2.5 色谱条件：

色谱柱ODS4.6× 200mm，5um 波长：278cm

流速：1.3ml/min 柱温：30℃进样量：10ul

梯度洗脱：

2．实验结果与讨论

2．1 按不同的大小叶种配比所生产的速溶绿茶及茶多酚测定结果见表一。

表一：不同品种各种拼配比例的茶多酚含量

从表一的实验数据不难看出，随着大叶种原料比例的增加，菲林试剂法测定的多酚数据逐渐增加，而酒石酸法测定得的多酚数据则逐渐减少。反之亦然。那么为什么会出现这种规律呢？我们可从以下大小叶种原料生产的绿茶及儿茶素的HPLC图谱中儿茶素组成的差异来说明问题。见图1-4及表二。

2．2 绿茶、儿茶素的HPLC图谱

小叶种绿茶图谱图1 大叶种绿茶图谱图2 小叶种儿茶素图谱图3 大叶种儿茶素图谱图4

表二：不同产品儿茶素组分的含量

比较图1、图2、图3、图4及表二的分析数据可以看出，在小叶种绿茶和儿茶素中，EGCG、EGC这些能反映小叶种特征的儿茶素组分的含量高于大叶种，特别是EGCG的含量。而在大叶种中DL－C，EC、ECG这些能反映大叶种特征的儿茶素组分的含量则高于小叶种，而酒石酸铁法和菲林试剂法由于与各儿茶素组分的显色机理不同，从而与不同的儿茶素组分反应的显色能力强弱也各不相同。酒石酸铁法的试剂对EGCG、EGC的显色较敏感，而菲林试剂则对DL－C、EC、ECG 的显色较敏感。由此可见要比较一个茶叶品种或茶叶制品的品质如何，不能单评某一种实验取得的结果，而必须进行全面的分析。

为了更全面、更合理的了解一个茶叶品种和制品的品质，笔者认为任何茶叶原料或茶制品都应该用两种方法进行分析，我们可以从以下分析数据来加以说明。见表三。

表三：不同产品的多酚含量

从表三中的数据可见，1、2号样虽然都是大叶原料所生产的产品，但是它的内含物仍然有差异，1号样的多酚含量不仅高于2号样，而且1号样的大叶种特征更加明显。3、4号样虽同为小叶种，但它们的多酚含量差异明显，3号样不仅多酚高于4号样，而且小叶种的特征也更明显。这些产品的内含物之所以有差异，笔者认为，在同样的提取工艺条件下，原料是最主要、最直接的影响因素。因此，只有对产品全面的分析，才能使我们在生产上能根据客户或市场对产品的要求，有的放矢的投放原料，或在生产过程中调整原料的配比，合理的搭配，生产出不仅成本低，而且多酚含量达标、儿茶素组分配比合理的产品，以满足市场

2．3 回收率实验

在样品中加入一定量的单宁酸标样，按测定茶多酚的酒石酸铁法和菲林试剂法进行测定，重复5次，计算平均回收率，结果如表四。

表四：回收率

实验证明，用本文的方法进行测定，回收率满意

参考文献：

茶叶品质理化分析上海科学技术出版社

茶叶生物化学农业出版社

茶叶化学工程学西南师范大学出版社