马铃薯的脱毒培养快繁

2、影响脱毒效果的因素
（1）外植体大小：0.2-0.3 mm，带1-2个原基为好
（2）茎尖所处部位：块茎脐部休眠芽的生长点、 块茎顶部的粗壮芽、植株主茎的生长点
（3）病毒种类及复合感染（脱毒更困难）
PSTV（条纹病毒）、PVS（S病毒）、PVX （X病毒）、PVM（M病毒）、PAMV（丛矮病 毒）、PVY（Y病毒）、PVA（A病毒）、PVRV （卷叶病毒）
（3）接种： 把芽置于解剖镜下，左手用一把镊子将
芽按住，右手用解剖针将叶片和叶原基剥 掉，当形似一个闪亮半圆球的顶端分生组 织充分暴露出来后，用锋利的长颈刀片将 分生组织切下来，上面可带/也可不带叶原 基，再用刀片将其接种到培养基上。
（4）培养基： MS 培 养 基 （ 提 高 NH4+ 、 K+ 浓 度 ， 利 于
茎尖成活）。加入调节物质6-BA 0.5 mg/L， NAA 0.1-1.0 mg/L。 培养条件：温度25±2 ℃，光照16 h/d
当新梢长至2-3 cm时，转至生根培养基 （MS培养基中加入0.3 mg/L的NAA）
（5）病毒鉴定（指示植物法）： 马铃薯的病毒指示植物：苋科的千日红、
藜科的杖藜、茄科的洋酸浆、毛曼佗罗等。 从被检植株上取下叶片，置于等容积的
（1）单茎节扩大繁殖：
培养条件：22 ℃，16 h补充光照1000 lx
常 用 培 养 基 ： MS+3% 蔗 糖 + 琼 脂 ； MS+2% 蔗 糖 ； MS+CCC 50 mg/L+6-BA 6.0 mol/L+0.8%琼脂，或MS+50-100 mol/L香豆 素；MS+3%蔗糖+4%甘露醇+0.8%琼脂。
3、无毒材料的保存
➢将无毒原种种在温室或防虫罩内灭过菌的土壤 里，以防蚜虫传毒或机械传毒 ➢大规模繁殖时，种植在田间隔离区内 ➢春播早留种和夏播留种 ➢经过茎尖脱毒处理的无病毒植株，再通过离体 培养进行繁殖与保存
（二）微型薯生产技术
1、试管生产
（1）单茎节扩大繁殖：由无性繁殖的 试管苗中获得茎切段（每个茎段带1-2个 叶 片 或 腋 芽 ） ， 每 个 三 角 瓶 里 接 4-5 个 茎 段，进行培养。
马铃薯的脱毒培养快繁
水 培 法 与 雾 培 法
一、马铃薯的脱毒与快繁 （一）茎尖培养与脱毒 1. 茎尖培养脱毒程序 （1）取材：芽长到15 cm时，将顶端切 下6-8 cm，去掉下面2片叶，在切口处涂上 生根生长调节剂后，把切条植入一口径为 10 cm、内装消毒营养土的花盆中，后用 玻璃烧杯罩上，保持10 d。
马铃薯的脱毒试管苗
再将其转入生长箱中，每天光照16 h， 光照强度3000-4000 lx。2 周后去掉顶芽， 以促进腋芽的生长。当腋芽长到1-2 cm时， 折下腋生枝，用于消毒、接种。
（2）消毒： 水洗干净，无菌条件下先用70%的酒精
浸组织15-20 s，再用2%次氯酸钠溶液浸泡 4-5 min，然后用无菌水冲洗3 次。
缓冲液（0.1 mol/L 的磷酸钠）中，研成匀 浆。在指示植物的叶片上撒少许600 号的金 刚砂。
然后将被检植物的叶汁液涂于其上，并 稍加摩擦，以使指示植物叶表面细胞受到 侵染，但又不要损伤叶片。约5 min后，用 水轻轻洗去接种叶片上的残余汁液。一周 后如果表现病毒病症状，则说明被检再生 植物脱毒失败。
➢将地膜重新覆盖或将孔土封严，在畦上 搭架，封盖另一层塑料拱棚薄膜，栽后20 d除去地膜培土，将架上的地膜Leabharlann Baidu成45-50 目的防虫纱网，上面再盖薄膜，气温升到 10度左右，除去膜，留纱网到收获。需水 时从上面喷或自一端开口进行沟灌。
4、微型种薯的扩大繁殖
采用试管、温室、底畦生产的微型薯原原 种，可进一步通过塑料大棚或大田在春秋 两季扩大繁殖，以提供足够大田使用的优 良种薯。
思考题：
１、对马铃薯脱毒苗的培养大致分几个 阶段？各阶段是怎样操作的？ ２、马铃薯的生物学习性有哪些？
当小植株4-5 cm时，进行第二步培养。
（2）微型薯诱导： 要求：有一定量的植物生长物质，暗培养 培养基：MS+50-100 mg/L香豆素的液体 或固体培养基
2、微型薯温室多层架盘工厂化生产
➢4-6 层架进行培养，育苗盘规格60 cm×25 cm×4-6 cm，育苗基质为蛭石或马粪。
➢三角瓶繁殖的脱毒苗以单茎节或双茎节扦 插，在人工调控的温度、光照下，经过6090 d即可收获。
微型薯
直 接 定 植 试 管 苗 和 剪 尖 扦 插 法
3、底畦栽植脱毒苗生产小薯或微型薯
➢备畦：长方形，深33 cm、宽1.2 m，挖 出的土堆放在距畦33 cm处的东西两边和 北端，铺施30-50 kg厩肥/m2，深翻20 cm， 翻匀耙平、浇足底水，以备来年春季栽苗。
➢土壤消毒及栽苗：播种前半月，畦内喷 800倍乐果灭蚜，封盖塑料膜，播种时可 揭膜移栽，南北向，行距40 cm，株距1015 cm双株，密度40-60株/m2。