苯系物的高效液相色谱分析
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实验精确度%
九、实验方法指示及注意事项
1、进样量应控制在检测器的允许范围之内，否则将得到锯齿状的平顶峰。
2、检测器的检测波长设定在275nm。
3、本实验的样品成份复杂，如果不先萃取而直接进样，虽然操作简单，但会影响色谱柱寿命。
十、尚待解决的问题
十一、对学生的要求
1. 文献调研
2. 对目标对象样品的背景知识了解
备注
实验设计者：孟庆华
首开实验时间：2007.2
编写人：孟庆华
编写时间：2007.2
3. 每次进样后，要等所有组分的峰均流出后方可停止，然后进行下一个样品的实验。
4. 每次分析新样品前要用待测样品润洗进样器及六通阀进样口。
5. 实验结束后，应用100％甲醇冲洗色谱柱，以免残留物留在柱内。
十二、参考文献
《实验化学》（上、下）
朱明华《仪器分析》高等教育出版社，2000年。
Prostar 345 Operation manual, 美国Varian。
2.样品测定
将平均峰面积（227547）代入回归方程求出可乐样品中
浓度为：76.70mg/ml.
八、对实验结果和实验中某些现象的分析讨论
1、本实验中应根据色谱柱的类型及所分析的样品选择相应的流动相的组成。由于采用C18反相柱，一般应选用甲醇－水作流动相，并控制好甲醇和水的比例。
2、进样要求没有气相色谱严格，注意进样阀的位置在进样时要处于Lode位，否则进样无效。
四、实验用主要仪器设备、消耗品
仪器设备名称
规格
消耗品名称
规格
高效液相色谱仪
甲醇
紫外检测器
色谱柱
HPLC过滤装置
分液漏斗
平头微量进样器
五、实验原理及原始计算数据、所应用的公式
在色谱法中，当色谱的操作条件一定时（如柱长、柱类型、内径、柱温、流动相类型、流速等）各组分都具有确定的保留值（体积和时间）。当样品的组分较为简单时，可将其中各峰的保留值与相应的标准样品在同一条件下测得的保留值对照，即可确定混合物中各个成份。
3、掌握标准曲线定量方法
二、实验内容
1、标准系列溶液的配制
2、标准曲线的制作
3、样品处理
4、实际样品的测定
三、实验示意图
操作步骤：泵——紫外检测器——计算机——联机——编辑分析方法——色谱分析
色谱条件：
柱温：室温，流动相：甲醇/水＝60、40，流动相流速：1.0ml/min，检测波长：275nm。
进样量：20μl
液相色谱法是以液体作为流动相的色谱法。高效液相色谱法是利用样品种各组分在色谱柱中固定相和流动相间分配系数或吸附系数的差异，将各组分分离后进行检测，并根据各组分的保留时间和响应值进行定性、定量分析。
当流动相的极性大于固定相的极性时，称为反相色谱。
本实验以咖啡因为测定对象，以反相高效液相色谱技术来分离检测可乐中咖啡因含量。
实验编号CA393002
实 验 指 导 书
实验项目：苯系物的高效液相A393
面向专业:化学
学院(系):化学化工学院
实验室:基础化学实验中心代号:11101
2007年2月18日
一、实验目的
1、了解高效液相色谱仪的基本结构和基本操作
2、了解反相色谱法的原理、优点和应用
样品，采用反相色谱技术进行分离，紫外检测器检测，以咖啡因标准系列溶液色谱峰峰面积对其浓度作标准曲线，再根据样品中的咖啡因峰面积，由标准曲线得出其浓度。
六、实验数据记录
1、标准曲线的制作
2．样品的测定
3 保留时间
七、实验结果计算及曲线
1 标准曲线
回归方程：Y=-85272+4011.92X
相关系数：R=0.9844
九、实验方法指示及注意事项
1、进样量应控制在检测器的允许范围之内，否则将得到锯齿状的平顶峰。
2、检测器的检测波长设定在275nm。
3、本实验的样品成份复杂，如果不先萃取而直接进样，虽然操作简单，但会影响色谱柱寿命。
十、尚待解决的问题
十一、对学生的要求
1. 文献调研
2. 对目标对象样品的背景知识了解
备注
实验设计者：孟庆华
首开实验时间：2007.2
编写人：孟庆华
编写时间：2007.2
3. 每次进样后，要等所有组分的峰均流出后方可停止，然后进行下一个样品的实验。
4. 每次分析新样品前要用待测样品润洗进样器及六通阀进样口。
5. 实验结束后，应用100％甲醇冲洗色谱柱，以免残留物留在柱内。
十二、参考文献
《实验化学》（上、下）
朱明华《仪器分析》高等教育出版社，2000年。
Prostar 345 Operation manual, 美国Varian。
2.样品测定
将平均峰面积（227547）代入回归方程求出可乐样品中
浓度为：76.70mg/ml.
八、对实验结果和实验中某些现象的分析讨论
1、本实验中应根据色谱柱的类型及所分析的样品选择相应的流动相的组成。由于采用C18反相柱，一般应选用甲醇－水作流动相，并控制好甲醇和水的比例。
2、进样要求没有气相色谱严格，注意进样阀的位置在进样时要处于Lode位，否则进样无效。
四、实验用主要仪器设备、消耗品
仪器设备名称
规格
消耗品名称
规格
高效液相色谱仪
甲醇
紫外检测器
色谱柱
HPLC过滤装置
分液漏斗
平头微量进样器
五、实验原理及原始计算数据、所应用的公式
在色谱法中，当色谱的操作条件一定时（如柱长、柱类型、内径、柱温、流动相类型、流速等）各组分都具有确定的保留值（体积和时间）。当样品的组分较为简单时，可将其中各峰的保留值与相应的标准样品在同一条件下测得的保留值对照，即可确定混合物中各个成份。
3、掌握标准曲线定量方法
二、实验内容
1、标准系列溶液的配制
2、标准曲线的制作
3、样品处理
4、实际样品的测定
三、实验示意图
操作步骤：泵——紫外检测器——计算机——联机——编辑分析方法——色谱分析
色谱条件：
柱温：室温，流动相：甲醇/水＝60、40，流动相流速：1.0ml/min，检测波长：275nm。
进样量：20μl
液相色谱法是以液体作为流动相的色谱法。高效液相色谱法是利用样品种各组分在色谱柱中固定相和流动相间分配系数或吸附系数的差异，将各组分分离后进行检测，并根据各组分的保留时间和响应值进行定性、定量分析。
当流动相的极性大于固定相的极性时，称为反相色谱。
本实验以咖啡因为测定对象，以反相高效液相色谱技术来分离检测可乐中咖啡因含量。
实验编号CA393002
实 验 指 导 书
实验项目：苯系物的高效液相A393
面向专业:化学
学院(系):化学化工学院
实验室:基础化学实验中心代号:11101
2007年2月18日
一、实验目的
1、了解高效液相色谱仪的基本结构和基本操作
2、了解反相色谱法的原理、优点和应用
样品，采用反相色谱技术进行分离，紫外检测器检测，以咖啡因标准系列溶液色谱峰峰面积对其浓度作标准曲线，再根据样品中的咖啡因峰面积，由标准曲线得出其浓度。
六、实验数据记录
1、标准曲线的制作
2．样品的测定
3 保留时间
七、实验结果计算及曲线
1 标准曲线
回归方程：Y=-85272+4011.92X
相关系数：R=0.9844