连翘果实中的化学成分研究
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化合物 13 无色柱状晶体 ( 丙酮) ,mp 129 ~ 131 ℃ 。 ESI-MS m / z 485 [M - H ]- ,509 [M + Na]+ ,525[M + K]+ 。1 H-NMR( CDCl3 ,600 MHz) δH: 5. 08( 1H,t,J = 7Hz,烯 氢 ) ,2. 05 ( 3H,s,-OAc ) , 4. 48 ( 1H,dd,J = 7. 0,7. 0Hz,3-αH) ,1. 68,1. 64, 1. 14 ( 各 3H,s,各 为 CH3 ) ; 13 C-NMR ( CDCl3 ,150 MHz) δC: 38. 6 ( C-1) ,23. 7 ( C-2) ,81. 0 ( C-3 ) ,37. 8 ( C-4) ,59. 1( C-5) ,18. 2( C-6) ,34. 5( C-7) ,40. 0( C8) ,51. 2 ( C-9) ,37. 2 ( C-10) ,21. 3 ( C-11) ,24. 7 ( C12) ,41. 7 ( C-13 ) ,50. 8 ( C-14 ) ,31. 3 ( C-15 ) ,27. 5 ( C-16 ) ,50. 5 ( C-17 ) ,16. 1 ( C-18 ) ,15. 5 ( C-19 ) , 77. 2 ( C-20 ) ,25. 9 ( C-21 ) ,41. 0 ( C-22 ) ,22. 7 ( C23) ,124. 4( C-24) ,129. 9( C-25) ,24. 7( C-26) ,17. 5 ( C-27 ) ,28. 0 ( C-28 ) ,16. 5 ( C-29 ) ,16. 7 ( C-30 ) , 21. 3( 乙酰基上甲基碳) ,171. 0( 乙酰基上羧基碳) 。 以上数据与文献[4]报道的 20 ( S) -dammar-24-ene3β,20-diol-3acetate 一致。
第 37 卷第 1 期 2012 年 1 月
·化学·
Vol. 37,Issue 1 January,2012
连翘果实中的化学成分研究
邹琼宇1 ,邓文龙2 ,蒋舜媛2 ,张磊2 ,彭树林1 ,丁立生1*
( 1. 中国科学院 成都生物研究所,四川 成都 610041; 2. 四川省中医药科学院 中药材品质与创新中药四川省重点实验室,四川 成都 610041)
2 800 g。总浸膏分散于 12L 热水中,依次用石油醚、 乙酸 乙 酯、正 丁 醇 萃 取。其 中 乙 酸 乙 酯 萃 取 部 分 1 100 g以石油醚-丙酮梯度( 50∶ 1 ~ 1∶ 1) 洗脱,经 TLC 检测合并分为 A-H 部分。从正丁醇萃取部分 800 g 以氯仿-甲醇梯度( 50∶ 1 ~ 1∶ 1) 洗脱后,经 TLC 检测合 并分为 I-N 部分。从 E 部分经硅胶柱色谱依次分出 15( 1. 9 g) 、16( 3. 9 g) 和 1 ~ 5 的混和物( 0. 7 g) ,F 部 分通过硅胶柱和凝胶柱色谱分别得化合物 6 ~ 10 的 混和物( 1. 6 g) 和 17( 4. 3 g) 。另外通过色谱与重结 晶等方法从 B 部分分离到 11( 1. 6 g) 和 12( 26 mg) , 从 C 部分得到 13( 89 mg) 和 14( 2. 1 g) ,从 D 部分得 到 14( 1. 6 g) ,从 G 部分得到 18( 30 mg) 和 21( 66 mg) , 从 I 部位得到 19( 43 mg) 和 22( 3. 1 g) ,从 J 部位得到 23( 1. 9 g) 和 24( 33 mg) ,从 M 部分得到 20( 4. 5 g) 。 3 结构鉴定
δH
4. 48( dd,6. 6,11) 4. 42( dd,5,11) 5. 14 4. 34( dd,4. 4,6. 8) 4. 29 1. 89,2. 28 2. 02,1. 77 2. 25,2. 15 5. 51( dt 15. 2,6. 5) 5. 55( dt 15. 2,6. 5) 1. 98 1. 26 ~ 1. 36 8. 68( d,9. 0)
[关键词] 连翘; 神经酰胺; 分离鉴定
连翘 Forsythia suspensa ( Thunb. ) Vahl 为木犀 科 Oleaceae 连翘属植物,又名黄花条、连壳等,系多 年生落叶灌木。中药连翘指其干燥果实,是我国临 床常用传统中药之一,为治疗肺炎、伤寒、痢疾等多 种感染性疾病的常用药。中药连翘具有多种药理活 性,化学成分也很丰富[1]。为了更全面地阐明该药 材的活性物质基础,通过正、反相硅胶柱色谱、凝胶 柱色谱及薄层制备色谱等分离方法,并采用包括串 联质谱和一维及二维核磁共振波谱等现代波谱解析 技术从该药材中分离鉴定出 24 个化合物。其中 10 个神经酰胺类化合物为首次从连翘中分离得到,其 中有 4 个的结构为首次报道。 1 材料
174. 3 76. 7 74. 1 32. 9 26. 9 30. 2 ~ 30. 7 32. 5 23. 3 14. 7
δH 4. 50( dd,6. 5,11) 4. 37( dd,5,11) 5. 08 4. 31( dd,4. 4,6. 8) 4. 28 1. 95 1. 75,1. 70 2. 25 5. 55 5. 51 1. 97 1. 24 ~ 1. 35 8. 68( d,8. 8)
4. 60( dd 3. 7,4. 0) 1. 25 1. 23 1. 24 ~ 1. 35 1. 24 ~ 1. 35 1. 24 ~ 1. 35 1. 24 ~ 1. 35 0. 87( t,6. 4)
6 ~ 10
δC 61. 7
52. 6 76. 5 72. 6 33. 9 26. 4 33 130. 5 130. 4 32. 6 29. 4 ~ 30. 2
第 37 卷第 1 期 2012 年 1 月
Vol. 37,Issue 1 January,2012
50. 6,52. 4,80. 9 ( CH × 5) ,31. 8,37. 4,37. 8,38. 2, 41. 1,134. 0,134. 6,171. 0( C × 8) 。数据与文献[4] 报道一致,确定为 iso-bauerenyl acetate。
175. 0 72. 2 35. 4 25. 1 29. 2 29. 4 ~ 30. 2 31. 8 22. 6 14. 0
化合物 11 无色针晶,mp 222 ~ 223 ℃ 。ESIMS m / z 491[M + Na]+ ,507[M + K]+ 。1 H-NMR ( CDCl3 ,600 MHz ) δH ∶ 2. 04 ( 3H,s,-OAc ) ,4. 49 ( 1H,dd,J = 4. 4,4. 3Hz,3-αH) ,1. 05 ( 3H,s,CH3 ) , 1. 00 ( 1H,d,J = 5. 3Hz,CH3 ) ,0. 97 ( 6H,s,CH3 ×
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R) -2',3'-二羟基-二十六碳酰胺]-8-十八碳烯-1,3, 4-三醇( 5) 。其中 1,2,4,5 为新化合物。化合物 3 又称通草神经酰胺[2]。
图 1 化合物 1 ~ 5 的结构以及重要的 HMBC 相关和二级质 谱裂解 Fig. 1 The structures and the key HMBC correlations and MS / MS data of compounds 1-5
表 1 化合物 1 ~ 5 和 6 ~ 10 的1 H-NMR 和13 C-NMR 数据 Table 1 The 1 H-NMR and 13 C-NMR spectral data of compounds 1-5 and 6-10
No.
1
2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 ~ 15 NH 1' 2' 3' 4' 5' ( CH2 ) n CH2 CH2 CH3 CH2 CH2 CH3 CH2 CH2 CH3
化合物 1 ~ 5,白色粉末。ESI-MS m / z 692,706, 720,734,748 [M + Na]+ ; m / z 668,682,696,710, 724 [M - H ]- ,二 级 质 谱 裂 解 见 图 1。IR ( KBr) 3 580 ~ 3 290,1 658 cm - 1 。其1 H-NMR 和13 C-NMR 数据见表 1,重要的 HMBC 相关见图 1,通过与文献 [2]比较,化合物 1 ~ 5 的结构可确定为( 2S,3S,4R, 8E) -2-[( 2'R) -2',3'-二羟基-二十二碳酰胺]-8-十八 碳烯-1,3,4-三醇 ( 1 ) 、( 2S,3S,4R,8E) -2-[( 2' R) 2',3'-二羟基-二十三碳酰胺]-8-十八碳烯-1,3,4-三 醇( 2) ,( 2S,3S,4R,8E) -2-[( 2' R) -2',3'-二羟基-二 十四碳酰胺]-8-十八碳烯-1,3,4-三醇( 3) ,( 2S,3S, 4R,8E) -2-[( 2'R) -2',3'-二羟基-二十五碳酰胺]-8十八碳烯-1,3,4-三醇( 4) 和( 2S,3S,4R,8E) -2-[( 2'
化合物 12 无色板状结晶 ( 丙酮) ,mp 139 ~ 140 ℃ 。 ESI-MS m / z 491 [M + Na]+ ,507 [M + K]+ 。1 H-NMR ( CDCl3 ,600 MHz ) 与13 C-NMR ( CDCl3 ,150 MHz) 数据与文献[4]报道一致,确定为 β-amyrin acetate。
化合物 6 ~ 10,白色粉末,ESI-MS m / z 677,691, 705,719,733 [M + Na]+ ; 653,667,681,695,709 [M - H ]- 。化合物 6 ~ 10 的1 H-NMR 和13 C-NMR 数 据见表 1。与从羊耳菊中分离鉴定出的 5 个神经酰 胺同系物[3] 比 较 它 们 的 波 谱 数 据 一 致,即 化 合 物 6 ~ 10分别鉴定为( 2S,3S,4R,8E) -2-[( 2' R) -2'-羟 基-二十 二 碳 酰 胺]-8-十 八 碳 烯-1,3,4-三 醇 ( 6 ) , ( 2S,3S,4R,8E ) -2-[( 2' R ) -2'-羟 基-二 十 三 碳 酰 胺]-8-十八碳烯-1,3,4-三醇( 7) ,( 2S,3S,4R,8E) 2-[( 2'R) -2'-羟基-二十四碳酰胺]-8-十八碳烯-1,3, 4-三醇( 8 ) ,( 2S,3S,4R,8E) -2-[( 2' R) -2'-羟基-二 十五碳酰 胺]-8-十 八 碳 烯-1,3,4-三 醇 ( 9 ) 和 ( 2S, 3S,4R,8E) -2-[( 2'R) -2'-羟基-二十六碳酰胺]-8-十 八碳烯-1,3,4-三醇( 10) 。
Bruker AV-600 核 磁 共 振 仪 ( TMS 为 内 标 ) , Finnigan LCQDECA质谱仪,XRC-1 型显微熔点仪,Perkin-Elmer 341 旋光仪,Perkin-Elmer FTIR 红外光谱 仪,薄 层 色 谱 ( GF254 ) 和 柱 色 谱 硅 胶 ( 160 ~ 200, 200 ~ 300 目) 均为青岛海洋化工厂产品。
[摘要] 目的:更全面地阐明中药连翘的活性物质基础。方法: 利用多种色谱方法分离连翘 Forsythia suspensa 果实的化 学成分,并通过 ESI-MS / MS 及 1D-和 2D-NMR 等波谱方法鉴定出 24 种化合物,它们的结构类型分别属于木脂素、黄酮、环己乙 醇衍生物、三萜和神经酰胺。结果和结论: 发现化合物 1 ~ 10 为首次பைடு நூலகம்中药连翘果实中分离得到的神经酰胺类化合物,其中 1,2,4,5 的结构为首次报道。
1 ~5
4. 76( d,4. 6) 4. 55 2. 05 1. 83,1. 65 1. 26 ~ 1. 36 1. 26 ~ 1. 36 1. 46 0. 88( t,6. 9)
δC 62. 3
53. 5 77. 2 73. 2 34. 3 27. 1 33. 7 131. 1 131. 2 33. 5 30. 2 ~ 30. 7
连翘 F. suspensa 实验样品产自四川安岳,由四 川省中医药科学研究院邓文龙研究员提供和鉴定。 2 提取分离
连翘果实( 8. 1 kg) 粉碎后用 12 L 90% 甲醇室温 提取 3 次,每次 1 周。提取液减压回收得到总浸膏约
[稿件编号] 20110623013 [基金项目] 国家“重大新药创制”科技重大专项 ( 2009ZX09103439) ; 国家重点基础研究发展计划( 973) 项目( 2007CB512604) [通信 作 者] * 丁 立 生,Tel: ( 028 ) 85239109,E-mail: lsding @ cib. ac. cn
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2) ,0. 90 ( 3H,d,J = 6. 1Hz,CH3 ) ,0. 87,0. 86,0. 84 ( 各 3H,s,各为 CH3 ) ; 13 C-NMR ( CDCl3 ,150 MHz) δC: 15. 6,16. 6,19. 9,21. 3,22. 2,22. 4,25. 2,27. 9, 38. 2( CH3 × 9) ,19. 0,20. 6,24. 2,25. 3,27. 3,29. 1, 29. 6,33. 1,34. 7,37. 8 ( CH2 × 10 ) ,31. 9,35. 9,
第 37 卷第 1 期 2012 年 1 月
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Vol. 37,Issue 1 January,2012
连翘果实中的化学成分研究
邹琼宇1 ,邓文龙2 ,蒋舜媛2 ,张磊2 ,彭树林1 ,丁立生1*
( 1. 中国科学院 成都生物研究所,四川 成都 610041; 2. 四川省中医药科学院 中药材品质与创新中药四川省重点实验室,四川 成都 610041)
2 800 g。总浸膏分散于 12L 热水中,依次用石油醚、 乙酸 乙 酯、正 丁 醇 萃 取。其 中 乙 酸 乙 酯 萃 取 部 分 1 100 g以石油醚-丙酮梯度( 50∶ 1 ~ 1∶ 1) 洗脱,经 TLC 检测合并分为 A-H 部分。从正丁醇萃取部分 800 g 以氯仿-甲醇梯度( 50∶ 1 ~ 1∶ 1) 洗脱后,经 TLC 检测合 并分为 I-N 部分。从 E 部分经硅胶柱色谱依次分出 15( 1. 9 g) 、16( 3. 9 g) 和 1 ~ 5 的混和物( 0. 7 g) ,F 部 分通过硅胶柱和凝胶柱色谱分别得化合物 6 ~ 10 的 混和物( 1. 6 g) 和 17( 4. 3 g) 。另外通过色谱与重结 晶等方法从 B 部分分离到 11( 1. 6 g) 和 12( 26 mg) , 从 C 部分得到 13( 89 mg) 和 14( 2. 1 g) ,从 D 部分得 到 14( 1. 6 g) ,从 G 部分得到 18( 30 mg) 和 21( 66 mg) , 从 I 部位得到 19( 43 mg) 和 22( 3. 1 g) ,从 J 部位得到 23( 1. 9 g) 和 24( 33 mg) ,从 M 部分得到 20( 4. 5 g) 。 3 结构鉴定
δH
4. 48( dd,6. 6,11) 4. 42( dd,5,11) 5. 14 4. 34( dd,4. 4,6. 8) 4. 29 1. 89,2. 28 2. 02,1. 77 2. 25,2. 15 5. 51( dt 15. 2,6. 5) 5. 55( dt 15. 2,6. 5) 1. 98 1. 26 ~ 1. 36 8. 68( d,9. 0)
[关键词] 连翘; 神经酰胺; 分离鉴定
连翘 Forsythia suspensa ( Thunb. ) Vahl 为木犀 科 Oleaceae 连翘属植物,又名黄花条、连壳等,系多 年生落叶灌木。中药连翘指其干燥果实,是我国临 床常用传统中药之一,为治疗肺炎、伤寒、痢疾等多 种感染性疾病的常用药。中药连翘具有多种药理活 性,化学成分也很丰富[1]。为了更全面地阐明该药 材的活性物质基础,通过正、反相硅胶柱色谱、凝胶 柱色谱及薄层制备色谱等分离方法,并采用包括串 联质谱和一维及二维核磁共振波谱等现代波谱解析 技术从该药材中分离鉴定出 24 个化合物。其中 10 个神经酰胺类化合物为首次从连翘中分离得到,其 中有 4 个的结构为首次报道。 1 材料
174. 3 76. 7 74. 1 32. 9 26. 9 30. 2 ~ 30. 7 32. 5 23. 3 14. 7
δH 4. 50( dd,6. 5,11) 4. 37( dd,5,11) 5. 08 4. 31( dd,4. 4,6. 8) 4. 28 1. 95 1. 75,1. 70 2. 25 5. 55 5. 51 1. 97 1. 24 ~ 1. 35 8. 68( d,8. 8)
4. 60( dd 3. 7,4. 0) 1. 25 1. 23 1. 24 ~ 1. 35 1. 24 ~ 1. 35 1. 24 ~ 1. 35 1. 24 ~ 1. 35 0. 87( t,6. 4)
6 ~ 10
δC 61. 7
52. 6 76. 5 72. 6 33. 9 26. 4 33 130. 5 130. 4 32. 6 29. 4 ~ 30. 2
第 37 卷第 1 期 2012 年 1 月
Vol. 37,Issue 1 January,2012
50. 6,52. 4,80. 9 ( CH × 5) ,31. 8,37. 4,37. 8,38. 2, 41. 1,134. 0,134. 6,171. 0( C × 8) 。数据与文献[4] 报道一致,确定为 iso-bauerenyl acetate。
175. 0 72. 2 35. 4 25. 1 29. 2 29. 4 ~ 30. 2 31. 8 22. 6 14. 0
化合物 11 无色针晶,mp 222 ~ 223 ℃ 。ESIMS m / z 491[M + Na]+ ,507[M + K]+ 。1 H-NMR ( CDCl3 ,600 MHz ) δH ∶ 2. 04 ( 3H,s,-OAc ) ,4. 49 ( 1H,dd,J = 4. 4,4. 3Hz,3-αH) ,1. 05 ( 3H,s,CH3 ) , 1. 00 ( 1H,d,J = 5. 3Hz,CH3 ) ,0. 97 ( 6H,s,CH3 ×
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Vol. 37,Issue 1 January,2012
R) -2',3'-二羟基-二十六碳酰胺]-8-十八碳烯-1,3, 4-三醇( 5) 。其中 1,2,4,5 为新化合物。化合物 3 又称通草神经酰胺[2]。
图 1 化合物 1 ~ 5 的结构以及重要的 HMBC 相关和二级质 谱裂解 Fig. 1 The structures and the key HMBC correlations and MS / MS data of compounds 1-5
表 1 化合物 1 ~ 5 和 6 ~ 10 的1 H-NMR 和13 C-NMR 数据 Table 1 The 1 H-NMR and 13 C-NMR spectral data of compounds 1-5 and 6-10
No.
1
2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 ~ 15 NH 1' 2' 3' 4' 5' ( CH2 ) n CH2 CH2 CH3 CH2 CH2 CH3 CH2 CH2 CH3
化合物 1 ~ 5,白色粉末。ESI-MS m / z 692,706, 720,734,748 [M + Na]+ ; m / z 668,682,696,710, 724 [M - H ]- ,二 级 质 谱 裂 解 见 图 1。IR ( KBr) 3 580 ~ 3 290,1 658 cm - 1 。其1 H-NMR 和13 C-NMR 数据见表 1,重要的 HMBC 相关见图 1,通过与文献 [2]比较,化合物 1 ~ 5 的结构可确定为( 2S,3S,4R, 8E) -2-[( 2'R) -2',3'-二羟基-二十二碳酰胺]-8-十八 碳烯-1,3,4-三醇 ( 1 ) 、( 2S,3S,4R,8E) -2-[( 2' R) 2',3'-二羟基-二十三碳酰胺]-8-十八碳烯-1,3,4-三 醇( 2) ,( 2S,3S,4R,8E) -2-[( 2' R) -2',3'-二羟基-二 十四碳酰胺]-8-十八碳烯-1,3,4-三醇( 3) ,( 2S,3S, 4R,8E) -2-[( 2'R) -2',3'-二羟基-二十五碳酰胺]-8十八碳烯-1,3,4-三醇( 4) 和( 2S,3S,4R,8E) -2-[( 2'
化合物 12 无色板状结晶 ( 丙酮) ,mp 139 ~ 140 ℃ 。 ESI-MS m / z 491 [M + Na]+ ,507 [M + K]+ 。1 H-NMR ( CDCl3 ,600 MHz ) 与13 C-NMR ( CDCl3 ,150 MHz) 数据与文献[4]报道一致,确定为 β-amyrin acetate。
化合物 6 ~ 10,白色粉末,ESI-MS m / z 677,691, 705,719,733 [M + Na]+ ; 653,667,681,695,709 [M - H ]- 。化合物 6 ~ 10 的1 H-NMR 和13 C-NMR 数 据见表 1。与从羊耳菊中分离鉴定出的 5 个神经酰 胺同系物[3] 比 较 它 们 的 波 谱 数 据 一 致,即 化 合 物 6 ~ 10分别鉴定为( 2S,3S,4R,8E) -2-[( 2' R) -2'-羟 基-二十 二 碳 酰 胺]-8-十 八 碳 烯-1,3,4-三 醇 ( 6 ) , ( 2S,3S,4R,8E ) -2-[( 2' R ) -2'-羟 基-二 十 三 碳 酰 胺]-8-十八碳烯-1,3,4-三醇( 7) ,( 2S,3S,4R,8E) 2-[( 2'R) -2'-羟基-二十四碳酰胺]-8-十八碳烯-1,3, 4-三醇( 8 ) ,( 2S,3S,4R,8E) -2-[( 2' R) -2'-羟基-二 十五碳酰 胺]-8-十 八 碳 烯-1,3,4-三 醇 ( 9 ) 和 ( 2S, 3S,4R,8E) -2-[( 2'R) -2'-羟基-二十六碳酰胺]-8-十 八碳烯-1,3,4-三醇( 10) 。
Bruker AV-600 核 磁 共 振 仪 ( TMS 为 内 标 ) , Finnigan LCQDECA质谱仪,XRC-1 型显微熔点仪,Perkin-Elmer 341 旋光仪,Perkin-Elmer FTIR 红外光谱 仪,薄 层 色 谱 ( GF254 ) 和 柱 色 谱 硅 胶 ( 160 ~ 200, 200 ~ 300 目) 均为青岛海洋化工厂产品。
[摘要] 目的:更全面地阐明中药连翘的活性物质基础。方法: 利用多种色谱方法分离连翘 Forsythia suspensa 果实的化 学成分,并通过 ESI-MS / MS 及 1D-和 2D-NMR 等波谱方法鉴定出 24 种化合物,它们的结构类型分别属于木脂素、黄酮、环己乙 醇衍生物、三萜和神经酰胺。结果和结论: 发现化合物 1 ~ 10 为首次பைடு நூலகம்中药连翘果实中分离得到的神经酰胺类化合物,其中 1,2,4,5 的结构为首次报道。
1 ~5
4. 76( d,4. 6) 4. 55 2. 05 1. 83,1. 65 1. 26 ~ 1. 36 1. 26 ~ 1. 36 1. 46 0. 88( t,6. 9)
δC 62. 3
53. 5 77. 2 73. 2 34. 3 27. 1 33. 7 131. 1 131. 2 33. 5 30. 2 ~ 30. 7
连翘 F. suspensa 实验样品产自四川安岳,由四 川省中医药科学研究院邓文龙研究员提供和鉴定。 2 提取分离
连翘果实( 8. 1 kg) 粉碎后用 12 L 90% 甲醇室温 提取 3 次,每次 1 周。提取液减压回收得到总浸膏约
[稿件编号] 20110623013 [基金项目] 国家“重大新药创制”科技重大专项 ( 2009ZX09103439) ; 国家重点基础研究发展计划( 973) 项目( 2007CB512604) [通信 作 者] * 丁 立 生,Tel: ( 028 ) 85239109,E-mail: lsding @ cib. ac. cn
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2) ,0. 90 ( 3H,d,J = 6. 1Hz,CH3 ) ,0. 87,0. 86,0. 84 ( 各 3H,s,各为 CH3 ) ; 13 C-NMR ( CDCl3 ,150 MHz) δC: 15. 6,16. 6,19. 9,21. 3,22. 2,22. 4,25. 2,27. 9, 38. 2( CH3 × 9) ,19. 0,20. 6,24. 2,25. 3,27. 3,29. 1, 29. 6,33. 1,34. 7,37. 8 ( CH2 × 10 ) ,31. 9,35. 9,