牛脾中RNA提取的工艺
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• (3)用氯仿-异戊醇继续处理RNA 制品, 可进一步除去其中少量的蛋白质。最后 用乙醇使RNA 从水溶液中沉淀出来。本 法得到的RNA 不仅纯度高,而且多呈自 然状态,可供继续研究之用。
生产的主要流程
破碎ห้องสมุดไป่ตู้胞
十二烷基
→ → → 磺酸钠、等
体积水饱和酚 静置分层, 取上层水相
0.15mol/L 缓冲液 RNA-蛋白 酚处理
临床上主要用于治疗免疫功能低下的疾病 及呼吸道疾病、肺心病、慢性气管炎、银 屑病、荨麻疹,并可作为治疗恶性肿瘤的 辅助用药。
生产主要原理
以牛脾为原料,提取活性RNA,利用苯酚法 提取,可以选用紫外扫描、凝胶电泳及HPLC 对所得的制品进行鉴定及含量测定。
而本生产选用紫外吸收法来进行RNA纯度的 检测。
牛脾中RNA提取的工业化生产
——生物0801班 刘清泉 邓谭琦 危亚熵 张太亮 王琨
应用前景
脾脏是机体重要的免疫器官,富含淋巴细 胞、浆细胞和巨噬细胞。其RNA无种属特 异性,可在不同种属间交叉转移免疫功能。
利用脾脏提取的RNA可作为非特异免疫信 息刺激并增强受体的免疫防御能力,并可 促使癌细胞逆转。
复合物解离。
DNA-蛋白 复合物变性
→ → 低温处理 氯仿-异戊 乙醇 醇继续处理
沉淀
→
成品 RNA
生产所需主要设备
锤式粉碎机 搅拌器 贮藏罐 反应器 温度控制仪 冷冻干燥器 紫外分光光度计
谢谢!
检测采用公式计算:
高效液相色谱法比较:
生产过程
(1)将细胞置于含有十二烷基磺酸钠 (Sodium dodecyl sulfate,SDS)的中 ,加等 体积水饱和酚,静置一段时间,使形成上层水 相和下层酚相。核酸溶于水相,被苯酚变性的 蛋白质或者溶于酚相,或者在两相界面处形成 凝胶层。
• (2)采用的0.15mol/L 缓冲液系统可使 大部分RNA-蛋白复合物解离,而DNA蛋白复合物只有极少部分解离;用酚处 理时DNA-蛋白复合物变性,在低温条 件下从水相中除去,这样得到的RNA 制 品中混杂的DNA-蛋白复合物极少。
生产的主要流程
破碎ห้องสมุดไป่ตู้胞
十二烷基
→ → → 磺酸钠、等
体积水饱和酚 静置分层, 取上层水相
0.15mol/L 缓冲液 RNA-蛋白 酚处理
临床上主要用于治疗免疫功能低下的疾病 及呼吸道疾病、肺心病、慢性气管炎、银 屑病、荨麻疹,并可作为治疗恶性肿瘤的 辅助用药。
生产主要原理
以牛脾为原料,提取活性RNA,利用苯酚法 提取,可以选用紫外扫描、凝胶电泳及HPLC 对所得的制品进行鉴定及含量测定。
而本生产选用紫外吸收法来进行RNA纯度的 检测。
牛脾中RNA提取的工业化生产
——生物0801班 刘清泉 邓谭琦 危亚熵 张太亮 王琨
应用前景
脾脏是机体重要的免疫器官,富含淋巴细 胞、浆细胞和巨噬细胞。其RNA无种属特 异性,可在不同种属间交叉转移免疫功能。
利用脾脏提取的RNA可作为非特异免疫信 息刺激并增强受体的免疫防御能力,并可 促使癌细胞逆转。
复合物解离。
DNA-蛋白 复合物变性
→ → 低温处理 氯仿-异戊 乙醇 醇继续处理
沉淀
→
成品 RNA
生产所需主要设备
锤式粉碎机 搅拌器 贮藏罐 反应器 温度控制仪 冷冻干燥器 紫外分光光度计
谢谢!
检测采用公式计算:
高效液相色谱法比较:
生产过程
(1)将细胞置于含有十二烷基磺酸钠 (Sodium dodecyl sulfate,SDS)的中 ,加等 体积水饱和酚,静置一段时间,使形成上层水 相和下层酚相。核酸溶于水相,被苯酚变性的 蛋白质或者溶于酚相,或者在两相界面处形成 凝胶层。
• (2)采用的0.15mol/L 缓冲液系统可使 大部分RNA-蛋白复合物解离,而DNA蛋白复合物只有极少部分解离;用酚处 理时DNA-蛋白复合物变性,在低温条 件下从水相中除去,这样得到的RNA 制 品中混杂的DNA-蛋白复合物极少。