第七章 植物快速繁殖和脱毒
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二.无病毒苗的获得
材料的培养和灭菌 茎尖剥离(详见实验) 茎尖培养
三. 提高脱毒效果
高温处理又称温热疗法 低温处理 化学处理
(一)高温处理
又称温热疗法,某些病毒受热以后不稳定,失去 活性。根据这个原理,把植物放在高于正常温 度的环境下,组织内部的病毒受热后部分或全 部钝化,但寄主植物的组织很少或不会受到伤 害。具体方法有:第一,温汤浸渍处理,适用 于切下的材料,在50度左右的温水中浸渍数分 钟至数小时,方法简便易行但材料易受伤。第 二,热风处理,将生长的盆栽植物移入室内或 生长箱内,处理温度因植物种类、生理状况而 异。一般为35~40度,短则几十分钟,长达数 月。
第四节 其它途径脱毒
一.愈伤组织脱毒 二.珠心胚培养脱毒 三.茎尖微体嫁接技术 四.培育抗病毒栽培种
第五节 脱毒苗的鉴定
一.直接测定法:直接观察植株茎叶有 无某种病毒引起的可见症状。 二.指示植物法:利用病毒在其它植物 上出现症状特征作为鉴别种类的标准。 三.酶联免疫吸附法 四.电子显微镜检查法 五.免疫吸附电镜法
第二节 继代培养
当初代培养的试管苗在瓶内长满到瓶塞, 或培养基养分利用完时就要转瓶,进行 继代培养,以便迅速获得试管苗。在试 管苗继代培养过程中,产生两种现象, 即驯化现象和衰退现象。
文心兰试管苗继代增殖
一.驯化现象
植物组织经过长期继代培养,发生一些 变化。开始继代培养要加入生长调节物 质,其后加入少量或不加入生长调节物 质就可以生长,这种现象称为“驯化” (acclimation)。
六. 抗血清鉴定法:植物病毒是由核酸和 蛋白质组成的核蛋白复合体,因而也是来自百度文库一种抗原,注射到动物体内即产生抗体, 抗体存在于血清之中,称为抗血清。由 于不同病毒产生的抗血清都有特异性, 用特定病毒的抗血清来鉴定该种病毒, 具有高度的专一性和特异性,几分钟至 几小时即可完成,方便简易,为常用方 法之一。
第一节 植物快速繁殖的途径和方法
人们可根据不同植物,采用不同类型和 方式进行快速繁殖。 各种器官的分化途径受下列因素影响:1) 培养材料的种类、外植体的部位和生理 状态;2)培养基的种类和植物激素的配 比和浓度;3)培养环境,如温度、湿度、 光照时间和强度、通气状况等。
植物快速繁殖的类型和事例
器官型 器官发生型 胚状体发生型 原球茎型 球茎芽型 块茎型 鳞茎型 孢子型 根茎型 微枝扦插型 甘蔗、香蕉、香石竹 烟草、油菜 甘蓝、胡萝卜 兰花 观叶海棠 花叶芋 百合、郁金香、贝母 地钱、狼尾蕨 肾蕨、裂叶蕨 葡萄、杨树
二.衰退现象
除了驯化以外,长期继代培养得材料也 会逐渐衰退(recession),丧失形态发 生能力,具体表现生长不良,再生能力 下降等。主要与下列因素有关:1)植物 1 材料;2)培养基和培养条件;3)继代 培养次数;4)季节。
第三节 快速繁殖中茎尖培养脱毒
一.植物病毒在植物体内的分布
病毒侵染植株的叶片后,经过一段时间,即向 附近的细胞增殖转移。转移速度很慢,每小时 只有几微米。当叶片内病毒浓度增大到一定量 时,就转移到韧皮部,随后通过维管束转移到 其它部分。由于病毒转移速度慢,加上茎尖分 生组织无维管束,病毒只能通过胞间连丝传递, 赶不上细胞分裂和生长的速度,所以生长点的 病毒数量极少,几乎检测不出。茎尖培养时, 切取的茎尖越小,带病毒的可能性就越小。— —茎尖脱毒的基本原理 必须指出的是,所谓无病毒,只是相对的,不 是绝对的。
(二)低温处理
亦称冷疗法。例如菊花在摄氏5度条件下 分别处理4个月或7.5个月,无菊花矮化 病毒苗分别是67%和73%。无菊花褪绿 斑驳病毒苗占22%和49%,未经处理的 22% 49% 茎尖则无脱毒效果。
(三)化学处理
又称化学疗法。一些化学药品如嘌呤和 嘧啶类似物、氨基酸、抗生素处理,可 在某种程度上抑制植物体内或离体叶片 内病毒的合成,但仍不能使病毒失活。
第七章 植物快速繁殖和脱毒
植物快速繁殖就是应用组织培养技术, 快速繁殖名优特新品种,使其在较短的 时间内繁衍较多的植株;快速繁衍珍稀 濒危植物,使物种得以保存。 植物病毒是通过无性繁殖传递的,病毒 在母体内逐代积累,危害越来越严重。 目前在生产上尚无特效药物可彻底除去 病毒,而快繁则可以达到脱毒的目的。