SD大鼠血液学指标
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SD大鼠血液学指标、血生化指标及脏体比正常值范围探讨
探讨SD大鼠30d喂养试验中的血液学指标、血生化指标及脏体比的正常值范围。方法收集10个批次雌雄各100只SD大鼠的血液学指标、血生化指标及脏体比进行统计分析。结果肝重、肾重、脾重及脾体比有明显的性别差异,除嗜碱性细胞、血糖和谷草转氨酶无明显的性别差异外,其余的血液学指标和血生化指标均存在性别差异。结论各项指标的正常值范围大致在文献报道范围内,且存在性别差异。
国家标准方法和技术规范[1,2]把大鼠30d喂养试验作为第二阶段毒性试验的常规方法,血液学、血生化及脏体比是其常用观察指标,这些观察指标的正常参考值范围近几年均有报道,由于这些指标受多种因素的作用而影响结果的判定。为此,从2009年开始收集10个批次雌雄各100只SD大鼠的血液学指标、血生化指标及脏体比进行统计分析,为制定正常参考值范围提供科学依据。
1材料与方法
1.1材料动物主要由四川省中医药科学院实验动物中心和成都达硕生物科技有限公司提供,SPF级初断乳SD大鼠,体重60-100g,适应喂养3d后开始试验。用XT-2000i型全自动血细胞分析仪检测血液学指标,用美国贝克曼库尔特有限公司生产的CX4型全自动生化分析仪和广州标佳科技有限公司生产的试剂盒测定血生化指标。
1.2方法10个批次的30d喂养试验,每个批次20只大鼠,雌雄各半。用四川省医学科学院实验动物研究所提供的辐照饲料喂养各批次动物,同批动物用同批号饲料喂养。所有试验
动物均在室温20℃~25℃,相对湿度在40%~70%的条件下喂养30d,试验期间让动物自由进食和饮水。试验结束时禁食16h后称重,股动脉放血处死动物取血测定血液学指标和血生化指标,取肝、肾、脾称重并计算脏体比(脏体比=脏器重*100/禁食后体重)。
1.3统计方法用SPSS11.0forWindowS进行统计分析。
2 结果
2.1 SD大鼠脏器湿重和脏体比SD大鼠的肝、肾、脾绝对重量和脏体比见表1、表2。肝重、肾重、脾重和脾体比在性别上差异有统计学意义(t=-18.452,P<0.01;t=-18.479, P<0.01;t=-14.374, P<0.01;t=-
3.779, P<0.01),肝体比和肾体比性别差异无统计学意义(t=-0.365, P>0.05;t=-1.122,P>0.05)。
2.2 SD大鼠血液学指标测定结果SD大鼠血液学指标测定结果见表3,雄鼠与雌鼠比较,除嗜碱性细胞在性别上无显著性差异外(t=0.158,P >0.05),其余指标均存在性别差异显著性(t=4.402, P<0.01;t=
3.564, P<0.01;t=-
4.092, P<0.01;t=3.300, P<0.01;t=-3.223, P<0.01;t=-2.385, P<0.01;t=2.838, P<0.01)。
注:表示与雌性比较* P<0.05,** P<0.01
2.3 SD大鼠血生化指标测定结果SD大鼠血生化指标测定结果见表4,除谷草转氨酶和血糖测定结果性别差异无统计学意义外(t=1.660,P>0.05;t=0.884,P>0.05),其余指标性别差异均有统计学意义(t=7.208, P<0.01;t=6.975, P<0.01;t=5.671, P<0.01;t=
3.114, P<0.01;t=2.196, P<0.05;t=-3.372, P<0.01;t=-
4.923, P<0.01)。
3 讨论
肝体比和肾体比在性别上无显著性差异与陈建国[3]的报道一致,而脾体比存在性别差异显著性与孙于兰[4]的报道不一致,血液学指标和血生化指标除嗜碱性细胞、谷草转氨酶和血糖测定结果性别差异无显著性外,其余指标均有性别差异显著性,这与赵安莎[5]的报道不
一致。这些观察指标由于受到饲养环境、饲料质量、动物来源、品系、性别、年龄、体重、饮水情况、禁食时间、测定方法和测定条件等多种因素的影响,导致测定结果差异较大。由试验结果可见,本实验的正常值范围较参考文献窄,标准差较小,是否是因为这个原因而导致较多指标在统计学上有性别差异?这种差别是因为抽样量不够引起的还是本来就存在的?这些都值得进一步探讨。此外,文献都没有描述30d喂养试验对照组动物是自由饮水、灌水还是灌油,对大鼠不同的处理也有可能导致最后血液学和生化指标的差异。综上所述,在制定正常参考值范围时必须全面综合考虑各种可能的影响因素,才能得到较为可靠的结果。
4 参考文献:
[1]GB15193.13-2003 食品安全性毒理学评价程序和方法[S].
[2]中华人民共和国卫生部.保健食品检验与评价技术规范[z] 2003.
[3]陈建国.龚幼菊.SD大鼠血象、脏体比正常值及相关性分析的探讨[J].卫生毒理学杂志,1999,13(4):262-265.
[4] 孙于兰.赵安莎. SD大鼠30d喂养试验食物利用率及脏器系数正常值探讨[J].现代预防医学2003.30(1):36-42.
[5]赵安莎.孙于兰.SD大鼠30d喂养试验血液学指标和血清生化指标参考值探讨[J].中国比较医学杂志,2003,13(1):13-15.