疫细胞化学染色在白血病免疫分型和肿瘤细胞骨髓转移
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8.取出玻片用PBS缓冲液洗5分钟×3 。在每 个圆圈内滴加DAB显色液，置于湿盒内室 温下5-15分钟。
9.取出玻片用PBS缓冲液冲洗，再用苏木精复 染3分钟，流水冲洗晾干。
10.在显微镜油镜下观察所要标记的细胞。
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12
六、实验结果
细胞膜、细胞浆或细胞核上出现棕 黄色或棕黄色颗粒则为阳性，说明此细 胞含有针对所标记的单克隆抗体的抗原， 如果不显棕黄色或棕黄色颗粒则为阴性。
胞中,用于神经内分泌肿瘤的辅助诊断。
11.S-100 Protein 用于室管膜瘤、神经母细胞瘤、神经鞘
瘤等的诊断与鉴别诊断。
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图片资料
李晓燕，女，29岁 住院号：159299 肺科—3床 2004年9月15日骨髓片
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崔单雨，女，9岁 住院号：144061 小儿科—15床 2004年4月5日骨髓片
3. Cytokeratin (low MW) 细胞角蛋白（低分量）：简称 CK低分子。细胞角蛋白35βH11为低分子量的细胞角蛋 白，主要用于腺癌的诊断。
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4. CD45（LCA）白细胞共同抗原：CD45（LCA）是造血 细胞的特异性标记，主要分布在T、B细胞、单核细胞、 粒细胞和前体细胞表面，一般不存在于非造血组织中， 是区别淋巴瘤、白血病和非造血组织肿瘤的一个良好标 记物。
3.PBS冲洗，5分钟×3。
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10
4.滴加非免疫动物血清50μl，室温孵育10
分钟。
5.根据形态学初检选择需要标记的第一抗 体滴在圆圈内并做好记号，然后将玻片 置于湿盒内室温下1.5小时或4℃ 过夜。
6. PBS冲洗，5分钟×3
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11
7.每个圆圈内滴加二抗与辣根过氧化物酶聚合 物，置于湿盒内室温下0.5小时。
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表3 3例FAB难分型的白血病，2例 髓系表达并且CD14阳性确诊为M5b，一 例既有T系表 达又有髓系表达，确诊为 M+ALL（急性淋巴细胞性白血病髓系表 达）。
表3 3例FAB不能定型的CD抗原阳性表达情况%
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表4 10例肿瘤细胞BM转移，其中 5例癌细胞 BM转移，4例CK低分子阳性，确诊为腺癌。1例 CK 高 分 子 阳 性 确 诊 为 鳞 癌 。 4 例 似 诊 为 淋 巴 瘤 BM浸润？恶性组织细胞病（恶组）待排，2例T 系表达，2例B系表达，确诊为淋巴瘤BM浸润。 1例形态上难以确定是癌还是瘤的，因CK低分子 阳性，确诊为腺癌细胞。
免疫细胞化学染色在白血病免疫 分型和肿瘤细胞骨髓转移 鉴定中的应用
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1
前言
白血病和肿瘤细胞骨髓转移的诊断主要靠骨髓 细胞病理学诊断。骨髓细胞病理学诊断的方法 主要有细胞形态学、细胞化学染色、免疫细胞 化学染色、 细胞遗传学以及分子生物学。根据 文献报道，根据细胞形态对白血病进行分型的 准确性是64%～77%。细胞形态学和细胞化学 结合可使准确性达86% [2] ，但对于AML-M0 、 M7 、M5a 、MAL 鉴定有一定的困难。而免疫 细胞化学染色在一定程度上可以解决此类问题。
有三种类型：双表型、双克隆型和双 系列型。髓系和
B或T淋巴系积分均＞2。
3.①伴有髓系抗原表达的ALL（My+ALL）
T或B淋巴系积分＞2同时粒-单系抗原表达，但积分≤2。
②伴有淋巴系抗原表达的AML（Ly+AML)
髓系积分＞2同时淋巴系抗原表达，但积分≤2。
4.单表型
表达淋巴系（T或B）者髓系积分为0，表达髓系者淋巴
CD68 CD118 血型糖蛋白A 巨核细胞 ：PPO CD41 CD42 CD61 HLA-DR 非系列特异性 ： TdT HLA-DR CD34
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(二)白血病免疫学积分系统（EGIL，1998）
分值
2
1
0.5
B系
CD79α CyCD22 Cy IgM CD19 CD20 CD10
CD24
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8
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9
五、实验步骤
1.选择厚薄均匀的骨髓涂片5～6张，根据需 要用免疫组化圈笔在涂片上画直径1.5cm 左右的圆圈数个。然后将玻片置于95%酒 精溶液中固定5～10分钟或4℃丙酮10分钟。
2.取出玻片用流水冲洗，再用PBS缓冲液冲 洗 ， 滴 加 3%H2O250μl ， 阻 断 内 源 性 过 氧 化物酶，室温孵育10分钟。
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6
三实验方法种类
（一）仪器法： 流式细胞仪、自动免疫染色仪
（二）手工法（玻片法） 1 根据二抗标记物不同：碱性磷酸酶法、 辣根过氧化物酶法、荧光法、抗生物素 -生物素法等。 2 根据实验原理：二步法、三步法等。
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7
四、免疫组化二步法染色原理
将一抗滴加在玻片上，如果被标记的细胞 含有特异性抗原，则一抗抗体被结合，在洗涤 过程中不被洗掉，再加入二抗酶聚合物与一抗 结合。加入底物后，在酶的催化下细胞显棕黄 色。如果细胞不含特异性抗原，就不能与一抗 结合，一抗就被洗掉，整个反应就不能进行， 细胞不显棕黄色。
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3
一、免疫细胞化学染色定义
免疫细胞化学或称免疫组织化学是指用免 疫学原理，通过特异的抗原、抗体反应标记上 可见的显示物系统来检查细胞及组织上原位抗 原或抗体成份的方法。此法可以识别定位各种 细胞组织成份。如蛋白质、多肽、核酸、部分 类酯、多糖、肿瘤的标记物等。在光学显微镜、 荧光显微镜下观察其特定定位。
系积分为0 [5] 。
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(三)急性髓细胞白血病微分化型(M0)特点及免疫 表型
特点:M0为形态学不能分型;常规细胞化学 染色阴 性;无Auer小体。
免疫表型：髓系分化抗原CD13、CD33、CD14、 CD15、CD11b中至少有一种阳性。不表达B系 特异性抗原（CD10、CD19、CD22、CD24） 和T系特异性抗原（CD2、CD3、CD5）。可 表达无系列特异性未成熟标志CD34、TdT、
5. Vimentin 波形蛋白：波形蛋白主要分布于间叶细胞及其 起源的肿瘤组织。上皮细胞及其肿瘤一般不含此蛋白， 主要用于间叶来源的恶性肿瘤等诊断。
6. CD3：T细胞分化抗原，对早期T细胞有较高的特异性， 对B细胞不表达，主要用于T细胞淋巴瘤。
7. CD7：在绝大多数成熟与不成熟T细胞和T细胞白血病中 表达。
T系
CD3 TCR-αβ TCR-γδ
CD2 CD5 CD8 CD10
CD7 CDla
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髓系
MPO
CD117 CD13 CD33 CD65 CD14 CD15 CD64
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(二 )根据白血病免疫学积分系统，将AL分为四型
1.急性未分化型白血病（AUL）
髓系和T或B系抗原积分均≤2。
2.急性混合细胞白血病
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31
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32
邵乐，男，6岁 住院号：160462 小儿科—19床 2004年9月21日骨髓片
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33
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34
韩茂芬，女，57岁 住院号：165004 感染科—27床 2004年10月6日骨髓片
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35
CD7
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36
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14
八、常用单克隆抗体及谱系特异性
（一）白血病免疫分型常用单克隆抗体 T林巴细胞：CD2 CD3 CD5 CD7 CD8 CDlα TCR-αβ
TCR-γδ B林巴细胞：CD10 CD19 CD20 CD24 CD22 CD79α
CyIgM 髓 系 细 胞：MPO CD13 CD14 CD15 CD64 CD65
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25
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26
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27
杨飞祥，男，2岁 住院号：158737 小儿科—13床 2004年9月4日骨髓片
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28
神经母细胞瘤？
肾神上经腺母母细细百度文库胞瘤瘤？?
CD45
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29
史夕琴，女，30岁 住院号：161136 血液科—8床 2004年10月6日骨髓片
HLA-DR 。
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18
（四）鉴定骨髓转移性肿瘤细胞常用的单 克隆抗体
1. Cytokertin (Pan) 细胞角蛋白（广谱）：广谱细胞角蛋 白CK（AE1/AE3）主要标记角化上皮、复层鳞状上皮、 复层上皮、增生的角化细胞和单层上皮，用于鳞癌、 各种腺癌、移行细胞癌、小细胞癌等。
2. Cytokeratin (High MW) 细胞角蛋白（高分子量）：简 称CK高分子。细胞角蛋白34βE12为高分子量的细胞角 蛋白，主要用于鳞癌的诊断。
44
病例测定结果
表1 FAB分型25例AML中，形态学和免疫组化 均符合髓系白血病16例（占64%）；4例（16%）既有 髓系又有T系抗原表达；5例（20%）既有髓系又有B 系抗原表达，与文献[3]报道较一致。表1显示，髓系抗 原CD13和CD33，在AML中表达较高（分别为80%和 76）。
表1 25例AML CD抗原阳性表达情况
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2
骨髓转移性癌（BMT）原发于非造血组织的恶性肿 瘤转移至骨髓的总称，骨髓不仅是造血组织恶性肿瘤 的好发部位，同时又是其它恶性肿瘤常转移的部位。 肿瘤经血行或淋巴管转移到骨髓，有的能找到原发灶， 而有的找不到原发灶，这就需要在骨髓内直接鉴定肿 瘤细胞。转移到骨髓内的癌细胞同血液系统的恶性肿 瘤细胞及转移癌细胞之间，在形态上有一定的区别， 而对于分化较差的癌细胞其形态较难辨认，易同急性 淋巴细胞性白血病、淋巴瘤细胞以及其它的肿瘤细胞 如神经母细胞瘤、肾上腺母细胞瘤等相混淆不易鉴别。 转移到骨髓中的肿瘤细胞无组织结构特点，加之肿瘤 细胞化学染色缺乏一定的特异性，使转移性肿瘤细胞 的鉴定具有一定的困难，也需要用免疫细胞化学染色 来解决。
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4
二、免疫细胞化学染色理论基础
（一）白血病免疫分型 各种血细胞来源于多能干细胞，经过分化
发育而成为成熟的血细胞。这些血细胞在分化发 育过程中，在其表面出现不同阶段的特异性分化 抗原，利用各种特异性单克隆抗体和酶联免疫方 法测定这些抗原，从而精确测定细胞类型及不同 的分化阶段。白血病细胞具有与其对应的分化抗 原,因此利用分化抗原可对白血病进行免疫学分 型。
表4 10例肿瘤细胞BM转移CD和CK阳性表达情况
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48
病例讨论
FAB对急性白血病分型，可将大部分白血病分型， 仍有小部分很难定型，尤其是POX染色阴性M0、 M5a 、 L2及MAL。由于白血病细胞形态多变性及 形态学的主观性，加上有些化学染色由于试剂质量 ﹑方法等因素也缺乏一定特异性，所以有小部分急 性白血病根据形态及化学染色很难定型，特别是
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5
（二）肿瘤细胞鉴定
肿瘤是由正常细胞恶变所致，故细 胞膜表面、细胞质内和细胞核内可能存 在着与正常相比在质或量上明显异常的 物质，这些物质可以成为抗原，因而可 以用特异性抗体通过免疫细胞化学染色 检测。由于来源于不同组织的肿瘤细胞 因为其所含的蛋白质和酶的不同，利用 针对这些蛋白质和酶的各种特异性单克 隆抗体对肿瘤细胞种类鉴别。
8. CD19：表达于前B细胞和成熟的B细胞膜表面，主要用于 标记正常B细胞及肿瘤性B细胞。
9. CD20：主要分布在B细胞、前B细胞后期和浆细胞之前的 B细胞，一般不与T细胞呈交叉反应，在恶性淋巴瘤尤其 是T或B细胞淋巴瘤的分类上，CD20是最常用的B细胞标 记。
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10.神经元特异性烯醇化酶(NSE) 主要分布于神经元和一些神经内分泌细
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13
七、注意事项
1.标本应新鲜，彻底干燥后方能检测。通常 放置24小时后检测,但标本采集后应在3-4天 内测定完毕。若标本采集后不能及时测定， 勿预先固定和冰箱内保存。
2.滴加单克隆一抗时，格外小心避免混淆。 3.滴加二抗、显色剂时无需分开。 4.整个检测过程中自固定后标本均应保持湿
润，不能干燥，直至复染后方能使其干燥。
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45
表2 11例ALL患者8种CD抗原表达显 示 ， 淋 系 抗 原 （ CD3 ， CD7 ， CD19 ， CD20 ） 在 ALL 呈 高 表 达 ， 而 髓 系 抗 原 （CD13 CD14 CD33）表达率低，其中有2 例既表达淋系又表达髓系抗原。
表2 11例ALL CD抗原阳性表达情况
37
攀胜甫，男，42岁 住院号：166298 消化科—4床 2004年11月27日骨髓片
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杨雨甜，女，1岁3个月 住院号：167108 小儿科—13床 2004年11月29日骨髓片
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9.取出玻片用PBS缓冲液冲洗，再用苏木精复 染3分钟，流水冲洗晾干。
10.在显微镜油镜下观察所要标记的细胞。
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六、实验结果
细胞膜、细胞浆或细胞核上出现棕 黄色或棕黄色颗粒则为阳性，说明此细 胞含有针对所标记的单克隆抗体的抗原， 如果不显棕黄色或棕黄色颗粒则为阴性。
胞中,用于神经内分泌肿瘤的辅助诊断。
11.S-100 Protein 用于室管膜瘤、神经母细胞瘤、神经鞘
瘤等的诊断与鉴别诊断。
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图片资料
李晓燕，女，29岁 住院号：159299 肺科—3床 2004年9月15日骨髓片
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崔单雨，女，9岁 住院号：144061 小儿科—15床 2004年4月5日骨髓片
3. Cytokeratin (low MW) 细胞角蛋白（低分量）：简称 CK低分子。细胞角蛋白35βH11为低分子量的细胞角蛋 白，主要用于腺癌的诊断。
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4. CD45（LCA）白细胞共同抗原：CD45（LCA）是造血 细胞的特异性标记，主要分布在T、B细胞、单核细胞、 粒细胞和前体细胞表面，一般不存在于非造血组织中， 是区别淋巴瘤、白血病和非造血组织肿瘤的一个良好标 记物。
3.PBS冲洗，5分钟×3。
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4.滴加非免疫动物血清50μl，室温孵育10
分钟。
5.根据形态学初检选择需要标记的第一抗 体滴在圆圈内并做好记号，然后将玻片 置于湿盒内室温下1.5小时或4℃ 过夜。
6. PBS冲洗，5分钟×3
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7.每个圆圈内滴加二抗与辣根过氧化物酶聚合 物，置于湿盒内室温下0.5小时。
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表3 3例FAB难分型的白血病，2例 髓系表达并且CD14阳性确诊为M5b，一 例既有T系表 达又有髓系表达，确诊为 M+ALL（急性淋巴细胞性白血病髓系表 达）。
表3 3例FAB不能定型的CD抗原阳性表达情况%
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表4 10例肿瘤细胞BM转移，其中 5例癌细胞 BM转移，4例CK低分子阳性，确诊为腺癌。1例 CK 高 分 子 阳 性 确 诊 为 鳞 癌 。 4 例 似 诊 为 淋 巴 瘤 BM浸润？恶性组织细胞病（恶组）待排，2例T 系表达，2例B系表达，确诊为淋巴瘤BM浸润。 1例形态上难以确定是癌还是瘤的，因CK低分子 阳性，确诊为腺癌细胞。
免疫细胞化学染色在白血病免疫 分型和肿瘤细胞骨髓转移 鉴定中的应用
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1
前言
白血病和肿瘤细胞骨髓转移的诊断主要靠骨髓 细胞病理学诊断。骨髓细胞病理学诊断的方法 主要有细胞形态学、细胞化学染色、免疫细胞 化学染色、 细胞遗传学以及分子生物学。根据 文献报道，根据细胞形态对白血病进行分型的 准确性是64%～77%。细胞形态学和细胞化学 结合可使准确性达86% [2] ，但对于AML-M0 、 M7 、M5a 、MAL 鉴定有一定的困难。而免疫 细胞化学染色在一定程度上可以解决此类问题。
有三种类型：双表型、双克隆型和双 系列型。髓系和
B或T淋巴系积分均＞2。
3.①伴有髓系抗原表达的ALL（My+ALL）
T或B淋巴系积分＞2同时粒-单系抗原表达，但积分≤2。
②伴有淋巴系抗原表达的AML（Ly+AML)
髓系积分＞2同时淋巴系抗原表达，但积分≤2。
4.单表型
表达淋巴系（T或B）者髓系积分为0，表达髓系者淋巴
CD68 CD118 血型糖蛋白A 巨核细胞 ：PPO CD41 CD42 CD61 HLA-DR 非系列特异性 ： TdT HLA-DR CD34
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(二)白血病免疫学积分系统（EGIL，1998）
分值
2
1
0.5
B系
CD79α CyCD22 Cy IgM CD19 CD20 CD10
CD24
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五、实验步骤
1.选择厚薄均匀的骨髓涂片5～6张，根据需 要用免疫组化圈笔在涂片上画直径1.5cm 左右的圆圈数个。然后将玻片置于95%酒 精溶液中固定5～10分钟或4℃丙酮10分钟。
2.取出玻片用流水冲洗，再用PBS缓冲液冲 洗 ， 滴 加 3%H2O250μl ， 阻 断 内 源 性 过 氧 化物酶，室温孵育10分钟。
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三实验方法种类
（一）仪器法： 流式细胞仪、自动免疫染色仪
（二）手工法（玻片法） 1 根据二抗标记物不同：碱性磷酸酶法、 辣根过氧化物酶法、荧光法、抗生物素 -生物素法等。 2 根据实验原理：二步法、三步法等。
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四、免疫组化二步法染色原理
将一抗滴加在玻片上，如果被标记的细胞 含有特异性抗原，则一抗抗体被结合，在洗涤 过程中不被洗掉，再加入二抗酶聚合物与一抗 结合。加入底物后，在酶的催化下细胞显棕黄 色。如果细胞不含特异性抗原，就不能与一抗 结合，一抗就被洗掉，整个反应就不能进行， 细胞不显棕黄色。
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一、免疫细胞化学染色定义
免疫细胞化学或称免疫组织化学是指用免 疫学原理，通过特异的抗原、抗体反应标记上 可见的显示物系统来检查细胞及组织上原位抗 原或抗体成份的方法。此法可以识别定位各种 细胞组织成份。如蛋白质、多肽、核酸、部分 类酯、多糖、肿瘤的标记物等。在光学显微镜、 荧光显微镜下观察其特定定位。
系积分为0 [5] 。
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(三)急性髓细胞白血病微分化型(M0)特点及免疫 表型
特点:M0为形态学不能分型;常规细胞化学 染色阴 性;无Auer小体。
免疫表型：髓系分化抗原CD13、CD33、CD14、 CD15、CD11b中至少有一种阳性。不表达B系 特异性抗原（CD10、CD19、CD22、CD24） 和T系特异性抗原（CD2、CD3、CD5）。可 表达无系列特异性未成熟标志CD34、TdT、
5. Vimentin 波形蛋白：波形蛋白主要分布于间叶细胞及其 起源的肿瘤组织。上皮细胞及其肿瘤一般不含此蛋白， 主要用于间叶来源的恶性肿瘤等诊断。
6. CD3：T细胞分化抗原，对早期T细胞有较高的特异性， 对B细胞不表达，主要用于T细胞淋巴瘤。
7. CD7：在绝大多数成熟与不成熟T细胞和T细胞白血病中 表达。
T系
CD3 TCR-αβ TCR-γδ
CD2 CD5 CD8 CD10
CD7 CDla
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髓系
MPO
CD117 CD13 CD33 CD65 CD14 CD15 CD64
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(二 )根据白血病免疫学积分系统，将AL分为四型
1.急性未分化型白血病（AUL）
髓系和T或B系抗原积分均≤2。
2.急性混合细胞白血病
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邵乐，男，6岁 住院号：160462 小儿科—19床 2004年9月21日骨髓片
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韩茂芬，女，57岁 住院号：165004 感染科—27床 2004年10月6日骨髓片
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CD7
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八、常用单克隆抗体及谱系特异性
（一）白血病免疫分型常用单克隆抗体 T林巴细胞：CD2 CD3 CD5 CD7 CD8 CDlα TCR-αβ
TCR-γδ B林巴细胞：CD10 CD19 CD20 CD24 CD22 CD79α
CyIgM 髓 系 细 胞：MPO CD13 CD14 CD15 CD64 CD65
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杨飞祥，男，2岁 住院号：158737 小儿科—13床 2004年9月4日骨髓片
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神经母细胞瘤？
肾神上经腺母母细细百度文库胞瘤瘤？?
CD45
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史夕琴，女，30岁 住院号：161136 血液科—8床 2004年10月6日骨髓片
HLA-DR 。
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（四）鉴定骨髓转移性肿瘤细胞常用的单 克隆抗体
1. Cytokertin (Pan) 细胞角蛋白（广谱）：广谱细胞角蛋 白CK（AE1/AE3）主要标记角化上皮、复层鳞状上皮、 复层上皮、增生的角化细胞和单层上皮，用于鳞癌、 各种腺癌、移行细胞癌、小细胞癌等。
2. Cytokeratin (High MW) 细胞角蛋白（高分子量）：简 称CK高分子。细胞角蛋白34βE12为高分子量的细胞角 蛋白，主要用于鳞癌的诊断。
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病例测定结果
表1 FAB分型25例AML中，形态学和免疫组化 均符合髓系白血病16例（占64%）；4例（16%）既有 髓系又有T系抗原表达；5例（20%）既有髓系又有B 系抗原表达，与文献[3]报道较一致。表1显示，髓系抗 原CD13和CD33，在AML中表达较高（分别为80%和 76）。
表1 25例AML CD抗原阳性表达情况
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骨髓转移性癌（BMT）原发于非造血组织的恶性肿 瘤转移至骨髓的总称，骨髓不仅是造血组织恶性肿瘤 的好发部位，同时又是其它恶性肿瘤常转移的部位。 肿瘤经血行或淋巴管转移到骨髓，有的能找到原发灶， 而有的找不到原发灶，这就需要在骨髓内直接鉴定肿 瘤细胞。转移到骨髓内的癌细胞同血液系统的恶性肿 瘤细胞及转移癌细胞之间，在形态上有一定的区别， 而对于分化较差的癌细胞其形态较难辨认，易同急性 淋巴细胞性白血病、淋巴瘤细胞以及其它的肿瘤细胞 如神经母细胞瘤、肾上腺母细胞瘤等相混淆不易鉴别。 转移到骨髓中的肿瘤细胞无组织结构特点，加之肿瘤 细胞化学染色缺乏一定的特异性，使转移性肿瘤细胞 的鉴定具有一定的困难，也需要用免疫细胞化学染色 来解决。
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二、免疫细胞化学染色理论基础
（一）白血病免疫分型 各种血细胞来源于多能干细胞，经过分化
发育而成为成熟的血细胞。这些血细胞在分化发 育过程中，在其表面出现不同阶段的特异性分化 抗原，利用各种特异性单克隆抗体和酶联免疫方 法测定这些抗原，从而精确测定细胞类型及不同 的分化阶段。白血病细胞具有与其对应的分化抗 原,因此利用分化抗原可对白血病进行免疫学分 型。
表4 10例肿瘤细胞BM转移CD和CK阳性表达情况
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病例讨论
FAB对急性白血病分型，可将大部分白血病分型， 仍有小部分很难定型，尤其是POX染色阴性M0、 M5a 、 L2及MAL。由于白血病细胞形态多变性及 形态学的主观性，加上有些化学染色由于试剂质量 ﹑方法等因素也缺乏一定特异性，所以有小部分急 性白血病根据形态及化学染色很难定型，特别是
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（二）肿瘤细胞鉴定
肿瘤是由正常细胞恶变所致，故细 胞膜表面、细胞质内和细胞核内可能存 在着与正常相比在质或量上明显异常的 物质，这些物质可以成为抗原，因而可 以用特异性抗体通过免疫细胞化学染色 检测。由于来源于不同组织的肿瘤细胞 因为其所含的蛋白质和酶的不同，利用 针对这些蛋白质和酶的各种特异性单克 隆抗体对肿瘤细胞种类鉴别。
8. CD19：表达于前B细胞和成熟的B细胞膜表面，主要用于 标记正常B细胞及肿瘤性B细胞。
9. CD20：主要分布在B细胞、前B细胞后期和浆细胞之前的 B细胞，一般不与T细胞呈交叉反应，在恶性淋巴瘤尤其 是T或B细胞淋巴瘤的分类上，CD20是最常用的B细胞标 记。
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10.神经元特异性烯醇化酶(NSE) 主要分布于神经元和一些神经内分泌细
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七、注意事项
1.标本应新鲜，彻底干燥后方能检测。通常 放置24小时后检测,但标本采集后应在3-4天 内测定完毕。若标本采集后不能及时测定， 勿预先固定和冰箱内保存。
2.滴加单克隆一抗时，格外小心避免混淆。 3.滴加二抗、显色剂时无需分开。 4.整个检测过程中自固定后标本均应保持湿
润，不能干燥，直至复染后方能使其干燥。
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表2 11例ALL患者8种CD抗原表达显 示 ， 淋 系 抗 原 （ CD3 ， CD7 ， CD19 ， CD20 ） 在 ALL 呈 高 表 达 ， 而 髓 系 抗 原 （CD13 CD14 CD33）表达率低，其中有2 例既表达淋系又表达髓系抗原。
表2 11例ALL CD抗原阳性表达情况
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攀胜甫，男，42岁 住院号：166298 消化科—4床 2004年11月27日骨髓片
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杨雨甜，女，1岁3个月 住院号：167108 小儿科—13床 2004年11月29日骨髓片
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