反相HPLC法测定氨酚曲马多片各组分含量

反相HPLC法测定氨酚曲马多片各组分

含量

（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）

【摘要】目的测定氨酚曲马多片两主药含量。方法色谱柱：DiamonsilC18色谱柱（Dikma公司，4.6mm×250mm，5μm）；流动相：甲醇－磷酸盐缓冲液（pH＝5.8）（40：60）；流速：1.0ml/min；检测器：UV，215nm；；进样量：20μl；柱温：20℃［２］。结果对乙酰氨基酚和盐酸曲马多分别在57.2～286μg/mL和5.74～28.70μg/mL范围内，浓度与峰面积的线形关系良好，相关系数R分别为0.99995和0.9997。方法的精密度RSD分别为和0.1%和0.2%。（n=3），平均回收率分别为99.46%和99.75%（n=3）。结论反相HPLC法可同时测定对乙酰氨基酚和盐酸曲马多含量。

【关键词】反相HPLC法氨酚曲马多片

氨酚曲马多片（及通安）主要用于中度至重度急性疼痛的短期治疗［１］。盐酸曲马多和对乙酰氨基酚合用时［2］，显示了协同的镇痛效果而且可以减少副作用的发生，在临床应用上具有明显的优势。本文建立了反相HPLC测定氨酚曲马多片中两主药含量方法。实验表明该方法准确可靠，能满足各项分析要求。

1仪器和药品

仪器Agilent1100Series高效液相色谱仪，德国安捷伦；TU-1800PC型紫外可见分光光度计，北京普析通用仪器。

药品氨酚曲马多片（盐酸曲马多37.5mg，对乙酰氨基酚325mg），西安杨森制药；盐酸曲马多，辽宁锦州九天药业；对乙酰氨基酚，安徽永安药业；茶碱（内标），天津中安药业；利多卡因（内标），山东华鲁制药]

2实验方法

2.1检测波长的选择

取处方量两主药、辅料,0.1mol/L盐酸溶解，超声5min,按同倍比例稀释,以0.45μm微孔滤膜滤过,取续滤［3］。以0.1mol/L盐酸为空白,在200nm～400nm波长范围紫外扫描，确定测定波长。

2.2HPLC测定氨酚曲马多片含量的方法

色谱柱：DiamonsilC18色谱柱（Dikma公司，4.6mm×250mm，5μm）；测器：UV，215nm；流动相：甲醇－磷酸盐缓冲液（pH＝5.8）（40：60）；流速：1.0ml/min；进样量：20μl；柱温：20℃。

2.3线性范围与标准曲线

精密称取两主药对照品适量，置100ml容量瓶，0.1mol/LHCL 定溶。精密吸取2.0，4.0，6.0，8.0ml，10.0ml,置100mL容量瓶中,加入0.1mol/LHCL定容。取20μl注入液相色谱仪，记录峰面积A，绘制标准曲线，进行线性回归［4］。

2.4精密度试验

精密称取对两主药适量,0.1mol/LHCL溶液配制含对乙酰氨基酚、盐酸曲马多浓度分别75μg/ml,150μg/ml,225μg/ml，8μg/ml,16μg/ml,28μg/ml3份溶液,测定其浓度。一天内不同时间测定3次,求日内精密度。同法连续测定3天,求日间精密度。

2.5氨酚曲马多片含量测定方法

取本品10片，精密称定，研细，称取粉末适量（相当于对乙酰氨基酚32.5mg，盐酸曲马多 3.75mg），置100ml容量瓶中，0.10.1mol/L盐酸定容。经0.45μm的微孔滤膜滤过。对照品的制备：取两主药对照品适量，按照2.3项配制系列浓度溶液，即得。精密量取上述溶液20μL注入高效液相色谱仪，按标准曲线法计算标示百分含量。

3结果与讨论

3.1检测波长的确定

紫外扫描图谱显示：对乙酰氨基酚在243nm处有最大吸收，考虑两主药相差近10倍，在215nm波长处两者吸收系数较接近，盐酸曲马多灵敏度得到提高，同时考虑近紫外末端吸收的影响，因此选择215nm作为检测波长。

3.2HPLC同时检测对乙酰氨基酚和曲马多DiamonsilC18色谱柱（Dikma公司，

4.6mm×250mm，5μm），流动相：甲醇－磷酸盐缓冲液（pH＝

5.8）（40：60）；流速：1.0ml/min；检测波长：215nm，柱温：20℃。

3.3线性范围与标准曲线

对乙酰氨基酚回归方程：C＝0.03086A－0.19713R＝0.99995N＝5(1-1)结果表明：对乙酰氨基酚在57.2～286μg/mL范围内，浓度与峰面积的线形良好。

盐酸曲马多回归方程：C＝0.03472A－0.03876R＝0.99997N＝5(1-2)

结果表明：盐酸曲马多在5.74～28.70μg/mL范围内，浓度与峰面积的线形良好。

3.4精密度试验结果

3.5回收率试验结果

3.6氨酚曲马多片含量测定结果

氨酚曲马多片（及通安）中，含盐酸曲马多37.5mg，对乙酰氨基酚325mg。两种主药剂量相差接近10倍，吸光度差别较大，紫外分光光度法较难准确进行盐酸曲马多含量测定测定［5］。本文建立了一种分离度好、准确度高、简便、快捷的方法同时对其二者含量进行测定。

参考文献

［１］ImasogieNN,SinghS,WatsonJT,HurleyD,Morley-ForsterP.Ultralow -dosetramadol/acetaminopheninelderlypatientsundergoingjoint replacementsurgery:apilotstudyPainResManag.2009Mar-Apr;14(2 ):103-8.

［2］金勋杰，李志涛.]氨酚曲马多治疗重度疼痛的疗效及安全

性研究.中华关节外科杂志20093（3）68-69

［3］张冬梅，陈秋芳.氨酚曲马多口腔崩解片中有关物质的HPLC 测定.中国医药工业杂志2007.38（1）36-38

［4］王玉，陈西敬.高效液相色谱法测定对乙酰氨基酚的血药浓度及其生物利用度.中国临床药学杂志.2002,11(2):97-99［5］S.H.Gan,R.Ismail,WA.WanAdnan,Z.Wan.Methoddevelopmentandvali dationofahigh-performanceliquidchromatographicmethodfortram adolinhumanplasmausingliquid-liquidextraction.JournalofChro magraphyB.2002,772(1):123-129