单细胞藻类的培养液汇总

第六节单细胞藻类的培养液

藻类的生长繁殖需要吸收各种营养元素，单细胞藻类的培养液必须具备这些营养元素,而且在营养成分和数量上都应该符合藻类的需要，

各种藻类对营养的需要有很多共同点，所以一些培养液配方，能应用于多种藻类的培养。然而，藻类的不同种类，对营养的要求是有差别的，各有其特殊性，不同种类的培养液配方，当然也应该不同。只有较好地符合培养种类需要的配方，才可能获得较理想的效果。一个培养液配方的提出，首先必须了解这种藻类对营养的要求，要达到这一点，进行一系列的试验是必要的。还必须在使用中验证配方的效果，并在实践过程中不断总结经验，加以改进，使配方达到更理想的水平。

本节内容分培养液成分、培养液配方和培养液的配制三部分。

一、培养液成分

单细胞藻类培养液的成分有下列七类。

(一)大量元素

1．氮(N) 单胞藻培养液常用的氮源有硝酸钾(KNO3)、硝酸钠(NaNO3)、尿素(NH2CONH2)、硝酸铵(NH4NO3)、硝酸钙[Ca(NO)3)2]、氯化铵(NH4C1)、硫酸铵[(NH4)2SO4]、发酵人尿……等。其中以硝酸钠和硝酸钾最常用。但不同的藻类对硝酸态氮和铵态氮的吸收利用情况是不同的，必须根据不同的藻类选择合适的氮源。

2．磷(P) 单胞藻培养液常用的磷源有磷酸二氢钾(KH2PO4)、磷酸二氢钠、(NaH2PO4)、磷酸氢二钾(K2HPO4)、磷酸氢二钠(Na2HPO4)4种。海水单胞藻培养液应用磷酸二氢钾，如用磷酸氢二钾所配培养液会产生大量沉淀。

3．铁(Fe) 单胞藻培养液常用的铁源有三氯化铁(FeCl3)、硫酸铁(FeSO4)、硫酸高铁[Fe2(SO4)3]、氧化铁(FeO)、柠檬酸铁(FeC6H5O7)、柠檬酸铁铵[Fe(NH4)3(C6H5O7)]等。其中最常用的是三氯化铁和柠檬酸铁。无机铁在水中容易形成一种胶体复合物，无可逆反应，不能为生物利用。铁也容易产生沉淀。所以尽管铁在数量上所需很少，但要满足藻类需要却很困难。要保持溶液中可利用态铁的数量，通常采用3种方法，这些方法都取得一定的成功，但都不够十分完善。

(1)在培养液内加入土壤抽出液：由于自然有机质(一般称为腐殖酸)的作用阻止了铁的沉淀和溶胶化(Pringsheim，1963)。

(2)在培养液内加入某种有机酸或其盐类以形成可溶性铁化合物：已证明较有效的有柠檬酸盐和酒石酸盐：迈尔(Myers，1947)证实应用硫酸铁和柠檬酸钠能使小球藻生长十分良好。

(3)应用络合剂：最常用的为乙二胺四乙酸(EDTA)，络合剂能防止铁和微量营养元素沉淀，并按照质量作用定律释放出足够数量的离子供藻细胞利用。

由于无机铁容易形成胶体复合物和沉淀，而有机铁，如柠檬酸铁、酒石酸铁等则是可溶性的，易为藻类细胞利用，在培养液配方中可使用有机态铁代替无机态铁。

因藻类对铁元素需要量不大，也有部分科学工作者，把铁列为微量元素。

4．钾(K) 单胞藻培养液中钾的来源常用的有氯化钾(KCl)、硝酸钾(KNO3)、磷酸二氢

钾(KH2PO4)、磷酸氢二钾(K2HPO4)等。一般培养液中由于氮、磷元素的加入，也附带加入了钾营养元素。除此以外，可再加入氯化钾。

5．镁(Mg) 培养液中镁的来源，常用的是硫酸镁(MgSO4)和氯化镁(MgCl2)两种。可以单独使用其中一种，也可两种同时使用。镁元素在天然海水中的含量很大(1 200mg/L以上)，一般是足够的。

①湛水101号培养液（湛江水产学院）：

NaNO30.03g维生素B1200µg

Co(NH2)2 0.03g 维生素B12 200mµg

KH2PO40.005g 人尿 1.5ml

FeC6H5O7(1%溶液) 0.2ml 海水 1 000ml

培养绿藻类、金藻类、硅藻类……使用。在培养硅藻时应加入0.02g/L硅酸钠。

②ASP2培养液[Provasoli,L.;McLaughlin,J.J.A.;Droop,M.R.1957]:

NaCl 1.8g NnCl20.12mg

MgSO4·7H2O 0.5g CoCl20.3µg

KCl0.06g CuCl20.12µg

CaC1210.0mg H3BO30.6mg

NaNO3 5.0mg 维生素B120.1µg

K2HPO40.5mg 维生素溶液S3（参考

1.0ml

第70页）

Na2SiO3·10H2O 15mg

Na2EDTA 3.0mg 三[羟甲基]氨基甲烷0.1mg

FeCl30.08mg 纯水100ml

ZnCl315µg pH7.6~7.8

培养绿藻类、金藻类、蓝藻类、隐藻类、涡鞭藻类使用。

（2）绿藻培养液配方：

①海洋三号扁藻培养液（海洋研究所，1960）：

NaNO30.1g2Na3C6H5O7·11H2O 0.02g

KH2PO40.01g

Fe(SO4)3(1%溶液) 10滴海水 1 000ml

②亚心形扁藻培养液（湛江水产学院）：

NaNO30.05g维生素B12200mµg

KH2PO40.005g 人尿2ml

FeC6H5O7(1%溶液) 0.2ml

维生素B1200µg海水 1 000ml 培养成亚心形扁藻及其他绿藻使用，多用于小型培养和中继培养，如能加入海泥抽出液20ml，效果更好。

③亚心形扁藻培养液（厦门水产学院）：

20ml

（NH4）2SO4200mg 海泥抽出液V

（参考第60页）

过磷酸钙

30mg

[Ca(H2PO4)2·H2O+2(CaSO4·H2O)]

FeC6H5O7(1%溶液) 0.5ml 海水 1 000ml