最新 心肌细胞动作电位

（二）豚鼠心室肌细胞动作电位
将豚鼠用木锤重击枕部，击昏后开胸迅速取出搏动的 心脏，立即放入充氧的台氏液中，维持温度于 20℃ 左右。
沿大动脉剪开心室，从室间隔取下带有乳头肌的肌条，
将标本固定于灌流槽内，标本槽内用蠕动泵推动台氏液 灌流，台氏液充以 95 ％ O2 和 5% C02 的混合气体， pH 值 保持在7.2～7.4，温度保持在37℃。 其它操作与记录蟾蜍心室肌细胞动作电位相似。
Korsgren等(1964)
使用吸引电极从病人右心室心内膜记 录到 MAP ，但由于吸引电极可造成心肌组 织不可逆性的损伤，没有被临床广泛接受。
Franze和Miller等(1980)
首次应用改进的特制导管接触电极，记录了人和狗
右心室心内膜的MAP。
这种记录电极记录MAP具有方便、安全、记录时间
动作电
位 0 期去极
速率可用 0 期从去极 10 ％ 至 去 极 90 ％ 所
需的时间
来表示。
注意事项
① 实验过程中尽量减少震动和碰撞实验装置，以
免微电极穿透心肌细胞或脱落；
② 安装微电极和引导动作电位时，要特别注意避
免折断微电极尖端，如尖端折断应更换微电极；
③ 插入微电极的部位应选用心肌收缩时波动幅度 较小的区域。
长等优点，对心肌局部无明显损伤。
从此，过去只能在离体或在体动物上进行的心脏电
生理研究已能够在人体上进行直接观察和验证。
(一) MAP形成原理
尚不明确
一般认为是心肌细胞群综合活动的反映。
(二) 记录电极
1．心内膜电极 2. 心外膜电极
1．心内膜电极
一根常规尼龙心导管内含有
两条直径为 0.3 ～ 0.5 mm 的银质
心肌细胞动作电位
Action Potential of Cardiac Muscle Cell
ห้องสมุดไป่ตู้
心肌细胞动作电位是心肌细胞兴奋的标志， 记录心肌细胞动作电位对研究心肌细胞电生理
特征和活动规律以及各种内外环境变化及药物
对心脏活动的影响具有重要意义。
细胞内记录——准确记录到单个心肌细胞动作电位 细胞外记录——是多个心肌细胞电活动的复合反映
据记录分析系统相连，选择适当的参数。
5. 引导电位：在解剖显微镜下， 调节微电极操纵器使微电极缓缓插入 心肌细胞，一旦微电极的尖端插入心 肌细胞内，可见基线水平突然下降， 稳定于－80～－90 mV水平，即静息 电位。 给予心肌细胞一次阈上刺激，即 可观察到心肌细胞动作电位，持续时 间约为500-600 ms，分为0、1、2、 3 和 4 期。记录到理想的动作电位后，
二、 心肌细胞外单相动作电位记录
Hoffman 等 (1959) 及 Chureny 等 (1964) 在同一动物心 脏上用细胞外记录方法（吸引电极）记录心肌单相动作电
位（monophasic action potential,MAP）的同时，用玻璃
微电极记录心肌细胞跨膜动作电位(transmembrane action potential，TAP)。 证明心肌MAP和TAP具有相同的形态和时程，MAP能 比较准确地反映心肌去极化和复极化过程。
入铂金丝或银－氯化银丝以引导细胞内电位。
固定玻璃微电极的优缺点
优点：使用方便，易插入心肌细胞， 定位较准确。 缺点：心肌收缩时电极尖端易产生位 移，不易获得稳定重复的动作电位。
(2)浮置微电极：
在已充灌3 M KCl溶液的玻璃微电极距尖端1 cm处，
用小细锉刀轻轻锉一下，仔细将其折一下，将一直径约30
(三) MAP记录
1．心内膜MAP记录：
插电极导管之前，将消毒好的电极置入生理盐水中浸泡l小时， 使之短路以平衡半细胞电位(half-cell potentials)，减少记录过 程中图形直流电漂移。 记录人体MAP应遵循无菌操作，在X线下监视由股静脉或股动脉 将电极导管插入右心室或左心室。导管尖端紧贴心内膜，可记录到
测量动作电位的各个参数以及动作电
位不应期等。 上图：心室肌动作电位
下图：窦房结动作电位
心肌细胞跨膜电位的测量指标：
静息电位(RP)或最大舒张电位(MDP)、动作电位振幅(APA)、动作电位 0 期最大上升速率 (Vmax) 、动作电位时程 (APD10 、 APD50 、 APD90 、
APD100)、动作电位传导时限(CT)、有效不应期(ERP) 。
液中，剪开心室腔，把心室肌平整铺开，并用三根小钢
针将心室肌固定在标本槽的硅胶橡皮小板上，标本槽内 的任氏液液面要略高于标本。 3. 刺激标本：将一对刺激电极轻轻接触标本，选用 单脉冲刺激，波宽1 ms，刺激强度固定在略大于阈刺激， 以每给一次刺激引起心室肌发生一次收缩为宜。
4.连接仪器：将微电极经微电极放大器与示波器或生理数
一、细胞内记录
将一根微电极插入细胞内，另一根电极放在 细胞外，记录单个心肌细胞膜内外间的电位差变化， 心肌细胞在安静时可记录到静息电位，兴奋时可观察 到动作电位。
（一）蟾蜍心室肌细胞动作电位
1. 制备微电极：
固定玻璃微电极
浮置微电极
(1)固定玻璃微电极
微电极尖端外径小于 1 µm，电极内充满3 M KCl溶液，阻值550MΩ 使用时将微电极固定在微电极推进器上，微电极玻管内插
或乏极化银 — 氯化银电极，导管 尖端镶进裸露的引导电极，导管 尖端为直径1 mm的光滑球面，直 接与心内膜接触。 参考电极位于距尖端5 mm的 凹陷部位，直径为0.5 mm，只与 血液接触而不和心内膜接触。
2. 心外膜电极
尖端为一对银-氯化银电极， 位于顶端的探查电极表面凸出 呈光滑球形，直径l mm，嵌入 一层环氧水泥之中，直接与心 脏外膜接触。 参考电极距尖端 5 mm ， 探头内有弹簧装置，在参考电 极和探查电极之间及参考电极 与心外膜之间都配有一柔软柱 形浸有0．9％生理盐水的泡沫 海绵。
µm长约20 cm的细银丝插入微电极，使电极尖牢固附着在
银丝上。
这种电极在插入心肌细胞后可以随心肌的收缩而移动，
不易脱离心肌纤维，易于记录到稳定重复的动作电位，对
记录在体跳动的心肌细胞动作电位尤其适用。
2. 制备标本：用探针破坏蟾蜍脑和脊髓后，仰卧位 固定在蛙板上，打开胸腔和心包膜，取出心脏放入任氏
10～50 mV的MAP，通常数分钟后MAP的幅度及基线才能稳定下来，