金银花提取物抑菌活性的研究

金银花提取物抑菌活性的研究

摘要目的：初步研究金银花提取物对大肠杆菌、白菜黑斑病菌、杜鹃灰霉菌、南瓜白粉病菌、番茄灰霉病菌等5种病菌的体外抑菌活性。

方法：分别用甲醇和丙酮对金银花进行提取，以抑菌圈法测定提取物对植物源病菌的抑菌作用。

结果：金银花的甲醇和丙酮提取物对供试的大肠杆菌、白菜黑斑病菌、杜鹃灰霉菌、南瓜白粉病菌、番茄灰霉病菌等均有一定的抑制作用。

结论：金银花提取物含有对供试菌体抑制作用的成分。其中，金银花的提取物对大肠杆菌、杜鹃灰霉菌、番茄灰霉病菌的抑菌效果很好，对白菜黑斑病菌的抑菌效果比较差。

关键词金银花；提取物；抑菌活性

目录

摘要 (1)

1前言 (3)

1.1物种资源 (3)

1.2金银花的有效成分 (3)

1.3金银花的药理作用 (4)

1.4研究现状 (5)

1.5病菌研究 (6)

1.5.1大肠杆菌 (6)

1.5.2白菜黑斑菌 (6)

1.5.3杜鹃灰霉菌 (7)

1.5.4南瓜白粉菌 (7)

1.5.5番茄灰霉菌 (8)

1.6研究目的与意义 (8)

2材料与方法 (9)

2.1试验材料 (9)

2.1.1药品与试剂 (9)

2.1.2菌种 (9)

2.2主要仪器 (9)

2.3实验方法 (10)

2.3.1试验流程 (10)

2.3.2金银花提取物的制备 (10)

2.3.3培养基的制作 (10)

2.3.3.1 PAD培养基 (10)

2.3.3.2 LB培养基 (10)

2.3.4菌种培养与纯化 (11)

2.3.5金银花提取物抑菌实验 (11)

3结果与分析 (12)

3.1金银花提取物的抑菌效果 (12)

4讨论 (13)

参考文献 (15)

金银花提取物抑菌活性的研究

1前言

利用野生植物治疗疾病是人们在长期与疾病斗争中积累起来的宝贵经验。

资源状况的记录在我国已经形成一整套的科学体系，各种著作有很详细的记载。近年来随着合成与半合成抗菌素的增多和广泛使用，细菌耐药性问题日趋严重，已成为21世纪全球关注的热点。

中草药作为我国的优势国药，因其成分复杂，对人体毒副作用小，易于代谢，且不易产生耐药性，品种多，来源广泛且具有广阔应用前景。随着新疾病不断出现及人们对生态保护日益关注，而中草药是纯天然的无公害制品，且通过人工培育、基因改良等方法可获得含有大量理想活性物质的产品，因此在国外也已备受关注且得到越来越多的使用。

据报道，许多中草药都具有抗细菌和抗真菌作用。例如中草药中的金银花就具有一定的抑菌能力，具有清热解毒、抑制表皮细菌感染等功能；

相对于其他中草药材而言，金银花这种中草药来源广泛、价格低廉，具有进行大批量开发的可行性，故选用此种中草药进行了体外抑菌实验，以期获得更好的医疗功效，为临床研究及应用提供一定的参考。

1.1 物种资源

金银花，又名银花、双花、忍冬花、鹭鸶花、二宝花，为忍冬科多年生常绿缠绕性木质藤本植物忍冬的花蕾和初开的花，呈棒状，上粗下细，略弯曲，长2~3cm，上部直径约3mm。下部直径约1.5mm。表面黄白色或绿白色，贮久色渐深，密被短柔毛。偶见叶状苞片。花萼绿色，先端5裂。裂片有毛，长约2mm。开放者花冠筒状，先端二唇；雄蕊5个，附于筒壁，黄色；雌蕊1个，子房无毛。气清香，味淡、微苦。《中国植物志》记载忍冬科植物在我国有98种，广泛与全国各省区，而已西南部种类最多，本属植物的花蕾作为金银花中药材商品的约有18种。然而，河南、山东市传统的金银花地道产地和栽培地，其中忍冬干燥花蕾以山东、河南产量最大。据对我国16个省市和自治区的158个市、县的202个金银花商品样品的研究，共鉴定以忍冬分布最广，产量最高。如此广泛分布的物种资源使其具有廉价性，这样为我们对金银花的开发利用提供了可靠的来源保障。

1.2金银花的有效成分

金银花化学成分复杂，已鉴别出的就有60多种。其中最重要的药理成分

挥发油，近年国内外学者通过气质联用已分离出芳樟醇、双花醇、棕榈

醇、二氢香苇醇、二十四碳酸甲酯、十八碳二烯酸乙酯、棕榈酸乙酯、

1,1联二环乙烷等数十种挥发油，其中鲜花以芳樟醇为主，含量高达14%

以上，其余为低沸点的不饱萜烯类；干花则以棕榈酸为主，占26%以上，芳樟醇含量不到0.4%，在被干燥加工过程所损失。本品含有大量的黄酮

类化合物，如木犀草素、忍冬苷、葡萄糖苷、·乳糖苷、全丝桃苷等。绿

原酸类有机化合物和三萜皂类亦为其主要的有效成分，前者包括绿原酸和异绿原酸，后者至少有十余个结构复杂的三萜皂苷成分。另外尙含有铁锰铜锌钛锶等15种无机盐，氣花蕾中有肌醇、B-谷醇等。由此可见，金银花的药用价值野应该是多方面的，不同的化学成分可指引我们进一步研究出其更多的用途。

1.3金银花的药理作用

据文献报道，金银花提取物具有多种作用，包括：抑菌作用、抗病毒作用、保肝止血作用、抗氧化作用、免疫调节等作用。

其中，金银花含环己六醇、黄酮类、肌醇、皂甙及鞣质等，具有广谱抗菌作用。宋海英等体外实验显示，金银花对金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、甲型链球菌和乙型链球菌均有明显的抑菌作用，尤其对金黄色葡萄球菌抑菌效果更明显，同时对链球菌、大肠杆菌和痢疾杆菌等多种致病菌也有抑制作用。

雷志军等实验证明，灰毡毛忍冬和正品金银花对金葡萄感染小鼠均有保护作用，并且灰毡毛忍冬对金葡萄菌感染的小鼠有明显的保护作用。赵良忠等研究证明，金银花提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌、青霉、黄曲霉和黑曲霉的抑菌浓度分别为30%、60%、50%、80%、80%和60%（相当于绿原酸含量为7.926、15.852、13.210、21.136、21.136和15.852mg/100ml）。

孙延波等口腔病原性微生物体外抑菌试验表明，金银花提取液对引起龋病的变形链球菌和放线黏杆菌及引起牙周病的产黑色素类杆菌、牙龈炎杆菌及伴放线嗜血菌均显示较强的抑菌活性，其中浓度在 6.25mg/ml 以下者占所有菌株的73.9%，浓度12.5mg/ml时抑菌率为87%，其中变形链球菌、放线黏杆菌和产黑色素类杆菌对金银花相对比较敏感。

用金银花提取液对不同血清型变形链球菌进行抑菌试验，结果显示最低抑菌浓度在25mg/ml-1以下者占所有试菌株的87.5%，在50mg.ml-1以下占95.8%，而且最低杀菌浓度一般明显高于最低抑菌浓度，因此该研究亦证明金银花提取液主要是抑菌作用。

金银花水煎剂（含生药量10mg.ml-1）在细胞外对柯萨奇病毒及埃柯病毒有很明显的抑制作用。复方金银花提取液在体外抑制HSV—1的作用亦较好，效果优于无环鸟苷和盐酸吗啉胍。另外，金银花还有一定的抗猴免疫缺陷病毒(SIV)的作用，浓度为1:320时，抑制率为23.88%。对抗艾滋病病毒（HIV）亦显示中等活性，药物活性值EC50为3.69μg。ml-1，IC50329μg.ml-1。

1.4研究现状

抑菌试验是指用于测定抗菌药物体外抑制细菌生长效力的试验。其主要方法有进行定性测定的扩散法和进行定量测定的稀释法。国内外学者运用不同的抑菌试验方法，对不同类型的植物以及化学试剂做了大量抑菌实验，证明许多中药都具有抗菌作用，能阻止病原微生物的生长，属于理想的天然抑菌防腐材料。蒲公英。花椒、肉桂、金银花、甘草、藿香等是常见的中药材，对金色葡萄球菌、大肠杆菌、绿色链球菌、白色念珠菌等常见细菌、真菌都有很好的抑菌作用。随着新疾病不断出现及