诊断学——临床常见病原体检测

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菌落特征、生化反应结果和血清学实验进行鉴定 分离培养是微生物学检验中确诊的关键步骤,标本的正确采集尤为重要!
• 血清学试验
标本送检
• 一般要求标本采集后2小时内送达实验室。 • 血培养标本、脑脊液标本延迟送检不应放4℃保存。 • 烈性传染病标本需专人护送。
可能贴错条形 码
这样不对,扭 着我腰都酸啦!
标本的实验室质量评估标准
1、标本信息要全。 2、仔细核对标本采集日期和送检日期。延误的标本,一般情况
下不接收。通常用于细菌学检验的标本的存放不要超过24h。 而病毒检测的标本可于4℃存放2~3天。 3、检查送检容器是否完整,有无破损或渗漏等情况,若有则不予 接收。 4、标本储存、运送方式不当,不予接收。
(三)病原体核酸的检测
• 常用试验方法有: 1、聚合酶链式反应PCR(polymerase chain reaction)。 2、核酸探针杂交技术 3、实时荧光定量PCR (Realtime PCR) 4、基因芯片等
(三)病原体核酸的检测
1.细菌
(四)病原体的分离培养和鉴定
采集合适的标本 合适的培养方法/培养基、培养条件
一、临床各类标本的采集运送和检查方法
标本采集的基本原则
➢根据病史与临床表现确定标本采集的类型与部位,尽量采 集病变明显部位标本。
➢在发病的早期或急性期采集标本,最好在抗生素使用前( 如使用过抗生素应在申请单上注明)。
➢采集标本防止污染,并置于无菌容器,加盖密封、立即送 检。
➢标本必须贴上标签,与检验申请单同时送检。 ➢所有的标本都视为感染性标本,做好安全防护。
(一)直接显微镜检查 (二)病原体特异性抗原检查 (三)病原体核酸检查 (四)病原体的分离培养和鉴定 (五)血清学试验
(一)直接显微镜检查-不染色标本
方法:压滴法、悬滴法、 湿片法。 意义:是否有生长、活动方式。部分
病原体可借此初步诊断,如梅毒螺 旋体。
(一)直接显微镜检查-染色标本
染色标本目的:了解细菌的形态、染色性或观察宿主细胞内 包涵体。
(一)血液标本的采集
菌血症、败血症或 脓毒血症
血液
采集时间
发热初期 发热前 2 小时
发热高峰期
采血量(ml) 成人:10-20 婴儿、儿童:5
需厌氧同时采集可增加阳性率
采集频率
24小时内 采血2~3次
(二)尿液标本的采集
采集量:10-20ml
中段尿
晨尿 注意清洁 外生殖器
Leabharlann Baidu
导尿
更换新的导 尿管
穿刺尿
脑膜炎奈瑟菌 肺炎链球菌 流感嗜血杆菌
不耐冷!
抗酸染色
阳性:菌体呈红色 阴性:菌体呈蓝色
主要用于分枝杆菌(结核)、奴卡菌鉴别
阳性
阴性
荧光染色
• 用形态学和免疫学相结合的方法可特异性地检测某些病原体的存在
阴道加德纳菌
沙眼衣原体
电镜检查
SARS(severe acute respiratory syndrome ) 病原体的确定。
电镜检查不常规用于临床,对某些病毒感染却有确诊的价值
(二)病原体特异性抗原检查
原理:利用抗原抗体之间的特异性反应,用已知 抗体检测患者血清及其他体液中的待测抗原。
方法:免疫荧光技术、酶联免疫技术、 化学发光 技术、乳凝集试验、对流免疫电泳
不足:标本中如果存在多种正常寄居微生 物, 可因交叉抗原存在而不能肯定诊断。
标本的实验室质量评估标准
5、明显被污染的标本不予接收。 6、标本量明显不足的标本,不予接收。 7、同一天申请做同一实验的重复送检标本(血培养除外),不予接收 8、对于烈性传染病标本的采集和运送应严格执行相关规定,要有完善
的防护措施,按规定包裹及冷藏,附有详细的采样及送检纪录,由 专人护送
检查方法
3-4 cm,轻轻转动并停留时10-15秒后取出
(八)创伤、组织和脓肿标本
创伤范围大 开放n性脓肿 封闭性脓肿 疑为厌氧菌
不同部位采集多份标本 采集脓液及病灶深部分泌物
无菌干燥注射器抽取
取脓液后立即排净注射器内空气, 针头插入无菌橡皮塞送检。
(九)血清
• 用于检测患者特异性抗原抗体 病毒肝炎性抗原抗体检测 梅毒、艾滋病病毒抗原抗体检测
采样容器:运送拭子
眼部标本:亦可在局部麻醉后取角膜刮屑。
耳标本:外耳道疖和中耳道炎用拭子采样, 鼓膜穿刺亦可用于新生儿和老年人。
(七)泌尿生殖道标本采集
(七)泌尿生殖道标本采集
男性: • 尿道口分泌物:性传播性疾病 • 前列腺液:前列腺炎 • 尿道拭子:在取材前2小时内不应排尿,用男性采样拭子插入尿道
考虑厌氧菌 感染
(四)呼吸道标本
类型:鼻咽拭子、痰 经气管采集的标本。
合格痰标本 鳞状上皮≤10/LP。
上呼吸道存在正常菌群, 在采集标本与结果分析
时应予考虑!
(五)脑脊液与其它无菌体液采集
胸水 腹水 心包液
无菌采集是培养成功 的首要因素!
脑膜炎奈瑟菌 肺炎链球菌 流感嗜血杆菌
不耐冷!
(六)眼、耳标本采集
(二)病原体特异性抗原检查
细菌的血清分型: • 检测细菌不同的抗原构造,还可分析细菌的菌群和血清型,如沙门
菌属、志贺菌属和霍乱菌属等
(三)病原体核酸的检测
意义 • 灵敏度高,是检测病原体微生物最灵敏的方法,但具有一定
的假阳性与假阴性。 • 特异性强,阳性只表明存在某种病原体的核酸,是否正被感
染应结合临床具体分析。 • 特别适用于目前尚不能分离培养或很难分离培养的微生物。 • 适用于核酸变异的病原微生物,如病毒
诊断学——临床常见病原体 检测
掌 1、临床各类标本的采集、运送和检查的方法;
握 2、临床常见病原体的种类分布及变迁情况 ;
3、耐药病原体检测的意义。

医院感染常见病原体的检查。
悉 了 1、药敏试验的原理和方法
解 2、性传播疾病病原体检查的内容
一、临床各类标本的采集运送和检查方法 二、病原体耐药性检测 三、临床常见病原体检测 四、病毒性肝炎检测 五、性传播疾病病原体检测 六、医院感染常见病原体检测
方法:革兰染色、墨汁染色、抗酸染色、荧光染色 意义:快速诊断的方法之一
• 阳性:紫色或紫红色 • 阴性:红色
革兰染色
阳 性 球 菌
阴性杆菌 真菌孢子
墨汁染色
目的:检查新型隐球菌
宽厚荚膜
脑脊液标本如不能及时送检,是否可冷藏保存?为什么?
(五)脑脊液与其它无菌体液采集
胸水 腹水 心包液
无菌采集是培养成功 的首要因素!
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