可见紫外分光光度法培训课件
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熟悉 物质对光的选择性吸收，吸收光谱的意义；标准曲线法和 标准对照法；提高测量灵敏度和准确度的方法。
了解
光的加和性；分光光度计的基本构造；紫外分光光度法的 一般概念。
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第一节
物质的吸收光谱
本文• 档基所础提化供学的（信息第仅9版供参）考之用，不能第作一为节科学物依质据的，吸请勿收模光仿谱；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
Байду номын сангаас
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三(邻二氮菲)合铁(II)离子的吸收光谱图
(absorptionspectrum)
max=510nm 不同浓度的溶液，max不变，浓度与
峰值成正比。
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- lgT ═ bc
T ═ 10-bc
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E1% 1cm
10
M
a 0.1E11c%m
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二、Lambert—Beer定律
透光率T与溶液浓度c (或液层厚度b)之间的关系也可 以以指数函数关系来表示：
第一节 物质的吸收光谱 第二节 分光光度法基本原理 第三节 提高测量灵敏度和准确度的方法 第四节 可见分光光度法 第五节 紫外分光光度法简介
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重点难点
掌握
分光光度法的基本原理，Lambert—Beer定律以及透光率、 吸光度、摩尔吸光系数等基本概念及相互关系。
物质颜色
黄绿 黄 橙黄 橙 红 紫红 紫 深蓝 绿蓝 蓝绿
物质颜色与吸收光颜色的关系
吸收光颜色
紫 深蓝
蓝 绿蓝 蓝绿
绿 黄绿 橙黄
橙 红
吸收波长范围 / nm
400～425 425～450 450～480 480～490 490～500 500～530 530～560 560～600 600～640 640～760
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一、物质对光的选择性吸收
光照射某物质，物质能够吸收光，使原有的基态转为激
发态，只有当分子的能量(h)与被照射物质粒子的基态和激 发态能量之差(E )相等时才能被吸收。
M(基态)+ h M*(激发态)
物质对光的吸收具有选择性，若溶液选择性地吸收了某 种颜色的光，则溶液呈吸收光的互补光。
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透射光的强度It与入射光强度I0之比称为透光率(transmittance) ，用T 表示 T = It I0
透光率的负对数称为吸光度(absorbance) ，用符号A表示。 A愈大，溶液对光的吸收愈多。
A = -lgT = lg I 0 It
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二、Lambert—Beer定律
1. Lambert- Beer定律：
A =bc
溶液厚度b，单位cm；浓度c，单位molL-1；
摩尔吸光系数 (molar absorptivity )
单位:Lmol -1cm-1
2. 若用质量浓度 代替 c A ═ ab
质量吸光系数 (apercentange absorptivity) 单位:Lg -1cm-1
二、物质的吸收光谱
1. 将不同波长的单色光依次通过有色溶液，测量溶液的吸光度A(absorbance)。 2. 以波长为横坐标，吸光度A为纵坐标作图，得吸收曲线，或称吸收光谱。 3. 吸收光谱中，吸光度最大处的波长为最大吸收波长，用max表示。 4. 一般，max是定性鉴别物质的基础 。 5. 不同浓度的溶液，max不变，浓度与峰值成正比，这是进行定量分析的依据。
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第十四章
可见-紫外分光光度法
Visible -Ultraviolet Spectrophotometry
作者 : 尚京川
单位 : 重庆医科大学
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I0 ═ Ia + It + Ir
2. 被测溶液和参比溶液的吸收池同样材料和厚 度，反射光强度影响相互抵消，上式简化为
I0 ═ Ia + It
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一、透光率和吸光度
3. a和可通过下式相互换算 ═ aMB
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二、Lambert—Beer定律
当溶液组成标度为10 gL-1时，吸光系数可用
比吸光系数E11c%m 表示，E11c%m与 和 a 的关系分别为：
第二节
分光光度法基本原理
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一、透光率 (transmittance)和吸光度(absorbance)
1. 入射光强度I0，吸收光强度Ia，透过光强度It，
反射光强度为Ir
了解
光的加和性；分光光度计的基本构造；紫外分光光度法的 一般概念。
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第一节
物质的吸收光谱
本文• 档基所础提化供学的（信息第仅9版供参）考之用，不能第作一为节科学物依质据的，吸请勿收模光仿谱；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
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三(邻二氮菲)合铁(II)离子的吸收光谱图
(absorptionspectrum)
max=510nm 不同浓度的溶液，max不变，浓度与
峰值成正比。
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- lgT ═ bc
T ═ 10-bc
本文• 档基所础提化供学的（信息第仅9版供参）考之用，第不能二作节为科分学光依光据度，请法勿基模本仿原；理如有不当之处，请联系网站或本人删除。
E1% 1cm
10
M
a 0.1E11c%m
本文• 档基所础提化供学的（信息第仅9版供参）考之用，第不二能作节为分科学光依光据度，法请基勿模本仿原；理如有不当之处，请联系网站或本人删除。
二、Lambert—Beer定律
透光率T与溶液浓度c (或液层厚度b)之间的关系也可 以以指数函数关系来表示：
第一节 物质的吸收光谱 第二节 分光光度法基本原理 第三节 提高测量灵敏度和准确度的方法 第四节 可见分光光度法 第五节 紫外分光光度法简介
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
重点难点
掌握
分光光度法的基本原理，Lambert—Beer定律以及透光率、 吸光度、摩尔吸光系数等基本概念及相互关系。
物质颜色
黄绿 黄 橙黄 橙 红 紫红 紫 深蓝 绿蓝 蓝绿
物质颜色与吸收光颜色的关系
吸收光颜色
紫 深蓝
蓝 绿蓝 蓝绿
绿 黄绿 橙黄
橙 红
吸收波长范围 / nm
400～425 425～450 450～480 480～490 490～500 500～530 530～560 560～600 600～640 640～760
本文• 档基所础提化供学的（信息第仅9版供参）考之用，第不一能作节为科物学质依的据吸，收请勿光模谱仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。 • 互补色光示意图
本文• 档基所础提化供学的（信息第仅9版供参）考之用，第不一能作节为科物学质依的据吸，收请勿光模谱仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
一、物质对光的选择性吸收
光照射某物质，物质能够吸收光，使原有的基态转为激
发态，只有当分子的能量(h)与被照射物质粒子的基态和激 发态能量之差(E )相等时才能被吸收。
M(基态)+ h M*(激发态)
物质对光的吸收具有选择性，若溶液选择性地吸收了某 种颜色的光，则溶液呈吸收光的互补光。
本文• 档基所础提化供学的（信息第仅9版供参）考之用，不能第作一为节科学物依质据的，请吸勿收模光仿谱；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
透射光的强度It与入射光强度I0之比称为透光率(transmittance) ，用T 表示 T = It I0
透光率的负对数称为吸光度(absorbance) ，用符号A表示。 A愈大，溶液对光的吸收愈多。
A = -lgT = lg I 0 It
本文• 档基所础提化供学的（信息第仅9版供参）考之用第，不二能节作为分科光学光依度据，法请基勿本模原仿理；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
二、Lambert—Beer定律
1. Lambert- Beer定律：
A =bc
溶液厚度b，单位cm；浓度c，单位molL-1；
摩尔吸光系数 (molar absorptivity )
单位:Lmol -1cm-1
2. 若用质量浓度 代替 c A ═ ab
质量吸光系数 (apercentange absorptivity) 单位:Lg -1cm-1
二、物质的吸收光谱
1. 将不同波长的单色光依次通过有色溶液，测量溶液的吸光度A(absorbance)。 2. 以波长为横坐标，吸光度A为纵坐标作图，得吸收曲线，或称吸收光谱。 3. 吸收光谱中，吸光度最大处的波长为最大吸收波长，用max表示。 4. 一般，max是定性鉴别物质的基础 。 5. 不同浓度的溶液，max不变，浓度与峰值成正比，这是进行定量分析的依据。
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
第十四章
可见-紫外分光光度法
Visible -Ultraviolet Spectrophotometry
作者 : 尚京川
单位 : 重庆医科大学
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
I0 ═ Ia + It + Ir
2. 被测溶液和参比溶液的吸收池同样材料和厚 度，反射光强度影响相互抵消，上式简化为
I0 ═ Ia + It
本文• 档基所础提化供学的（信息第仅9版供参）考之用，第不能二作节为科分学光依光据度，法请勿基模本仿原；理如有不当之处，请联系网站或本人删除。
一、透光率和吸光度
3. a和可通过下式相互换算 ═ aMB
本文• 档基所础提化供学的（信息第仅9版供参）考之用，第不二能节作为分科光学光依据度，法请基勿本模原仿；理如有不当之处，请联系网站或本人删除。
二、Lambert—Beer定律
当溶液组成标度为10 gL-1时，吸光系数可用
比吸光系数E11c%m 表示，E11c%m与 和 a 的关系分别为：
第二节
分光光度法基本原理
本文• 档基所础提化供学的（信息第仅9版供参）考之用，第不二能节作为分科学光依光据度，法请基勿模本仿原；理如有不当之处，请联系网站或本人删除。
一、透光率 (transmittance)和吸光度(absorbance)
1. 入射光强度I0，吸收光强度Ia，透过光强度It，
反射光强度为Ir