抗生素效价的测定
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最好为一次取样称量，动作迅速，不得反复称取， 取样后立即将称量瓶瓶盖盖好，以免吸水。
•
标准品的称量最好用1/100,000克的分析天平，
样品称量不得低于1/10,000克的分析天平。天平
中的干燥加入剂应保持经常注意更换。
• 称量结束后，超声波处理后的磷酸缓冲液， 定容至刻度，过滤并稀释。
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12
• 双碟的制备：
•
•
取内径90mm、高16—17mm的平底双碟；
•
注入加热融化的培养基20ml，使在碟底内均
匀摊布，放置水平台上使凝固，作为底层。
•
另取培养基适量加热融化后，放冷至48－
50℃（芽孢可至60℃），加入规定的试验菌悬液
适量（能得清晰的抑菌圈为度。）
• 二剂量法标准品溶液的高浓度所致的抑菌圈直径 在 18－24 mm。
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4
微生物发的分类
• 稀释法 • 浊度法 • 双碟法
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• 2、浊度法系利用抗生素在液体培养基中对 试验菌生长的抑制作用，通过测定培养后 细菌浊度值的大小，比较标准品与供试品 对试验菌生长抑制的程度，以测定供试品 效价的种方法。
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3、管碟法：是利用抗生 素在含敏感试验菌的 琼脂培养基中的球面 扩散渗透作用，从而 形成一定的抑菌圈。
抗生素效价微生物检定法
赵永成 生工1001 4104100139
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1
1.概述
一、抗生素的概念及抗生素的生物检定
抗生素是由微生物所产生的极微量便 具有选择性地杀死或抑制其他病原微生物 生长的一类天然有机化合物。
抗生素的生物检定是以抗生素对微生 物的抗菌效力作为效价的衡量标准。
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2
一、抗生素的效价和单位
通过琼脂培养基，可观 察并测量出抑菌圈的 大小。
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8
管碟法测定抗生素效价 原理和方法
一 原理 在一定的抗生素浓
度范围内，对数剂量(浓 度)与抑菌圈的表面积或 直径成正比，可以得出 一条曲线。
抗生素浓度换算成对 数，则抑菌圈直径与抗 生素对数成直线关系
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9
管碟法的材料
一，仪器 菌种 培养基 培养皿 牛角杯 陶瓦圆盖 二，试剂 无菌生理盐水 ph6.0的磷酸缓冲液 青霉素标准品储备液 青霉素标准品使用液
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13
（二）抑菌圈的形成
• 在平板底部四边，分别 对角注明“SH”、“SL” 和“UH”、“UL”标记
th
sl
• 将不锈钢小管(俗称为牛
uh
津杯)放置在含敏感试验
菌的琼脂培养基上。
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• 以无菌滴管分别在每个 牛津杯内加入相应的抗 生素溶液至满但不溢出 管外
• 且四杯内液面高度相同， 盖上平皿盖，静置30分 钟。
抗生素的含量用效价和单位表示。该 词有时不加区别统称为效价单位。
效 价 （ ｐ otency ） ， 指 检 品 的 实 际 单位数与其标示量的比值。常表示为效价 的百分数。
单位（unit,u）单位是衡量抗生素有 效成分的具体尺度。
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3
• １、重量单位 以抗生素的生物活性部分重量作单 位
• １微克（ｕｇ）＝１单位，１毫克＝１０００单 位。
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管碟法测定操作
• 1. 试验用菌液 • 金黄色葡萄球菌悬液：取金黄色葡萄球菌
的营养斜面培养物，接种于营养琼脂斜面 上，在35~37℃培养20h到22h，；临用前用 水或者灭菌生理盐水溶液将菌苔洗下，备 用
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2 供试品及标准品的配制
• 标准品与样品从冰箱取出后，使与室温平衡。供 试品应放于干燥器内至少30min方可称取。称量
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• 求出θ=D· log（IV/W）
• θ供试品和标准品的效价比 • D标准品高剂量与供试品高剂量之比，一般
为1 • I 高低剂量之比的对数，即log2或log4 • Pr = Ar×θ • Pr供试品实际单位数
• Ar供试品标示量或估计单位
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２、类似重量单位 以特定的纯粹抗生素盐类的重 量作为１单位。如纯粹金霉素盐酸盐及四环素盐 酸盐（包括无生物活性的盐酸根在内）１微克 （ｕｇ）＝１单位，１毫克＝１０００个单位。 这是根据国际使用习惯而来的。
３、质量折算单位 以特定的纯抗生素盐的质量为 单位而加以折算。青霉素0.6ug为1单位
４、特定单位 以特定的抗生素标准品的某一质量 定为一单位。
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• 将培养基置入适宜试 验菌生长的培养箱中， 琼脂培养基中的试验 菌开始生长。
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• 抑菌圈直径大小与抗生素浓度相关；
• 比较抗生素标准品与检品的抑菌圈大小， 可计算出抗生素的效价。
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计算检品的效价
• 求出W和V • W=（SH+TH）-（SL+TL） • V=（TH+TL）-（SH+SL） • TH供试品高剂量的抑菌圈 • TL供试品低剂量的抑菌圈 • SH标准品高剂量的抑菌圈 • SL标准品低剂量的抑菌圈
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标准品的称量最好用1/100,000克的分析天平，
样品称量不得低于1/10,000克的分析天平。天平
中的干燥加入剂应保持经常注意更换。
• 称量结束后，超声波处理后的磷酸缓冲液， 定容至刻度，过滤并稀释。
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• 双碟的制备：
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取内径90mm、高16—17mm的平底双碟；
•
注入加热融化的培养基20ml，使在碟底内均
匀摊布，放置水平台上使凝固，作为底层。
•
另取培养基适量加热融化后，放冷至48－
50℃（芽孢可至60℃），加入规定的试验菌悬液
适量（能得清晰的抑菌圈为度。）
• 二剂量法标准品溶液的高浓度所致的抑菌圈直径 在 18－24 mm。
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微生物发的分类
• 稀释法 • 浊度法 • 双碟法
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• 2、浊度法系利用抗生素在液体培养基中对 试验菌生长的抑制作用，通过测定培养后 细菌浊度值的大小，比较标准品与供试品 对试验菌生长抑制的程度，以测定供试品 效价的种方法。
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3、管碟法：是利用抗生 素在含敏感试验菌的 琼脂培养基中的球面 扩散渗透作用，从而 形成一定的抑菌圈。
抗生素效价微生物检定法
赵永成 生工1001 4104100139
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1.概述
一、抗生素的概念及抗生素的生物检定
抗生素是由微生物所产生的极微量便 具有选择性地杀死或抑制其他病原微生物 生长的一类天然有机化合物。
抗生素的生物检定是以抗生素对微生 物的抗菌效力作为效价的衡量标准。
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一、抗生素的效价和单位
通过琼脂培养基，可观 察并测量出抑菌圈的 大小。
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管碟法测定抗生素效价 原理和方法
一 原理 在一定的抗生素浓
度范围内，对数剂量(浓 度)与抑菌圈的表面积或 直径成正比，可以得出 一条曲线。
抗生素浓度换算成对 数，则抑菌圈直径与抗 生素对数成直线关系
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管碟法的材料
一，仪器 菌种 培养基 培养皿 牛角杯 陶瓦圆盖 二，试剂 无菌生理盐水 ph6.0的磷酸缓冲液 青霉素标准品储备液 青霉素标准品使用液
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（二）抑菌圈的形成
• 在平板底部四边，分别 对角注明“SH”、“SL” 和“UH”、“UL”标记
th
sl
• 将不锈钢小管(俗称为牛
uh
津杯)放置在含敏感试验
菌的琼脂培养基上。
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• 以无菌滴管分别在每个 牛津杯内加入相应的抗 生素溶液至满但不溢出 管外
• 且四杯内液面高度相同， 盖上平皿盖，静置30分 钟。
抗生素的含量用效价和单位表示。该 词有时不加区别统称为效价单位。
效 价 （ ｐ otency ） ， 指 检 品 的 实 际 单位数与其标示量的比值。常表示为效价 的百分数。
单位（unit,u）单位是衡量抗生素有 效成分的具体尺度。
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• １、重量单位 以抗生素的生物活性部分重量作单 位
• １微克（ｕｇ）＝１单位，１毫克＝１０００单 位。
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管碟法测定操作
• 1. 试验用菌液 • 金黄色葡萄球菌悬液：取金黄色葡萄球菌
的营养斜面培养物，接种于营养琼脂斜面 上，在35~37℃培养20h到22h，；临用前用 水或者灭菌生理盐水溶液将菌苔洗下，备 用
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2 供试品及标准品的配制
• 标准品与样品从冰箱取出后，使与室温平衡。供 试品应放于干燥器内至少30min方可称取。称量
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• 求出θ=D· log（IV/W）
• θ供试品和标准品的效价比 • D标准品高剂量与供试品高剂量之比，一般
为1 • I 高低剂量之比的对数，即log2或log4 • Pr = Ar×θ • Pr供试品实际单位数
• Ar供试品标示量或估计单位
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２、类似重量单位 以特定的纯粹抗生素盐类的重 量作为１单位。如纯粹金霉素盐酸盐及四环素盐 酸盐（包括无生物活性的盐酸根在内）１微克 （ｕｇ）＝１单位，１毫克＝１０００个单位。 这是根据国际使用习惯而来的。
３、质量折算单位 以特定的纯抗生素盐的质量为 单位而加以折算。青霉素0.6ug为1单位
４、特定单位 以特定的抗生素标准品的某一质量 定为一单位。
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15
• 将培养基置入适宜试 验菌生长的培养箱中， 琼脂培养基中的试验 菌开始生长。
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• 抑菌圈直径大小与抗生素浓度相关；
• 比较抗生素标准品与检品的抑菌圈大小， 可计算出抗生素的效价。
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计算检品的效价
• 求出W和V • W=（SH+TH）-（SL+TL） • V=（TH+TL）-（SH+SL） • TH供试品高剂量的抑菌圈 • TL供试品低剂量的抑菌圈 • SH标准品高剂量的抑菌圈 • SL标准品低剂量的抑菌圈
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