ELISA法检测乙肝表面抗原结果影响因素探究

ELISA法检测乙肝表面抗原结果影响因素探究

摘要目的探讨酶联免疫吸附法（ELISA法）检测慢性乙型肝炎（乙肝）表面抗原中的有关影响因素。方法231份乙肝表面抗原样本，采用ELISA法检测，针对影响检测结果的各方面因素进行分析。结果第一组样本在0.5 h检测阳性率为12.50%（11/88）， 1 h后检测阳性率为7.95%（7/88），2 h后检测阳性率为1.14%（1/88）。第二组4支试管检测阳性率：不抗凝管为2.86%（2/70），枸橼酸钠管为0（0/70）、肝素钠抗凝管为7.14%（5/70）、EDTA-K2管为0（0/70）。第三组样本检测阳性率与血细胞水平浓度由低到高依次为9.59%（7/73）、54.79%（40/73）、100.00%（73/73）。结论采用ELISA法检测乙肝表面抗原过程中，其检测结果受多方面因素影响，为保证检测的准确率，需要进行重复性试验并换用不同方式进行测定，以保障检测准确性。

关键词酶联免疫吸附法；乙肝表面抗原；影响因素

采用ELISA法对乙肝表面抗原结果进行检测为临床最常用检测方式，该检测方式具备操作简单、灵敏度高且存在有较高特异性等方面特点，可有效提升临床对乙肝病症诊断效率。而结合实际情况可知，在采用该法检测过程中存在有一定假阳性率[1]，很容易对被采集者造成精神压力。为有效保证该检测技术准确性，使得该检测方案临床价值进一步彰显。本次本院就针对ELISA法检测乙肝表面抗原过程中有关影响因素加以分析，报告如下。

1 材料与方法

1. 1 材料来源收集本站2016年1～12月乙肝表面抗原样本231份，本组血液样本男131例，女100例，年龄28～48岁，平均年龄（31.01±1.74）岁。

1. 2 方法采用ELISA法检测，所用试剂均符合临床检测标准，所用设备为RT-2000i酶标仪。在检测过程中，各方面操作均严格按照规定进行，并结合检测情况将样本划分为3组。第一组：在本组待检测样本中随机选取88份作为不抗凝血液样本，将每份样本均分为3支试管，分别静止0.5、1、2 h后，于常规离心机中进行离心处理，转速设定为3500 r/min，

离心时间为15 min左右，待血清后对乙肝表面抗原进行检测。第二组：于本组待检测样本中随机抽取70份，均分于4支试管中（不抗凝管、枸橼酸钠管、肝素钠抗凝管以及EDTA-K2管）其中不抗凝管，静置2 h后进行离心检测，其他试管3 h

后去血浆检测。第三组：以余下73份样本（含血细胞），按照3个浓度（0.25×1012/L、0.125×1012/L、0.065×1012/L）梯度实施稀释操作后再进行检测。观察三组样本的检测阳性率。

2 结果

第一组样本在0.5 h检测阳性率为12.50%（11/88）， 1 h后检测阳性率为7.95%（7/88），2 h后检测阳性率为1.14%（1/88）。第二组4支试管检测阳性率：不抗凝管为2.86%（2/70），枸橼酸钠管为0（0/70）、肝素钠抗凝管为7.14%（5/70）、EDTA-K2管为0（0/70）。第三组样本检测阳性率与血细胞水平浓度由低到高依次为9.59%（7/73）、54.79%（40/73）、100.00%（73/73）。

3 讨论

乙肝为临床较为常见病症类型，主要因乙型肝炎病毒感染而导致，存在较高的传染性及危害性。临床多采用ELISA法对血液样本进行检测，基于该检测方式具备操作简单、灵敏度高等方面特点，在很大程度上提升了临床对乙肝的检出效率。而结合实际可知，该检测方式在运用中容易受多方面因素影响。

3. 1 不抗凝血液样本结合本次观察可知，在不同自凝时间进行检测，在检测结果上存在一定差异。在实际检测工作中，出于多方面原因，血液尚未开始凝固时便开始进行检测，很容易导致假阳性结果。主要因血清中存在有少量纤维蛋白原，易在反应孔壁中黏附，甚至在孔中出现凝集，使得酶结合物在孔中被吸附所致。同时，纤维蛋白原的反应微环境发生改变同样会使得检验的灵敏度降低，造成假阴性[2，3]。

3. 2 加抗凝剂标本主要因在使用抗凝剂的过程中，其在发挥抗凝作用的同时，会与血液中有关物质形成结合物，起到对检测系统中过氧化物酶显色反应抑制或者促进的效果，影响到检测结果。

3. 3 保障检测结果准确性有关对策结合上述因素分析，为有效保障该检测系统在运用中的准确性，需要对以下几方面内容加以重视：①做好检测前质量控制工作。在检测前需考虑采集者是否存在黄疸、高脂血症等，同时更需要考虑到采集方式是否会导致溶血情况发生等。②检测中质量控制。在正式对待检测样本进行检测过程中，检验医师需要做好检测前样本检测工作，确保样本质量符合检测要求。同时，各方面检测操作均需要严格按照操作流程进行。同时，为避免不同处理方式对检测结果造成影响。针对疑似样本，还需要通过其他方式进一步进行检测。必要时对脱氧核糖核酸（HBV-DNA）水平进行测定[4-7]。

结合本次分析可知，在采用ELISA法检测乙肝表面抗原过程中，在多方面因素的共同作用下，将直接影响到检测准确性，很容易导致假阳性结果的发生[8-10]。在使得被采集者形成巨大心理压力的同时，更容易诱发医疗纠纷，不利于医疗工作的顺利进行。

总之，为使得该检测方式的临床综合价值进一步得到彰显，实现对乙肝的有效筛查，还需要对检测过程中各方面细节问题加以重视，严格按照操作流程实施检测，以保障检测的准确性。

参考文献

[1] 何瑞平. ELISA法检测乙肝表面抗原结果影响因素分析. 世界最新医学信息文摘，2016，16（A3）：141，156.

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[9] 吴丽娟. 溶血标本对ELISA检测乙肝表面抗原的影響. 赤峰学院学报（自然版），2012（6）：62.

[10] 王叶芳，密辉，王霞. ELISA法检测乙肝表面抗原影响因素的探讨. 淮海医药，2000，18（4）：79.