五味子

北五味子饮片炮制工艺及质量标准规范化研究
200802105 薛刚
中药饮片(尤其是有毒中药饮片)的质量直接关系到中药处方及其制剂的临床疗效和安全性。

《中华人民共和国药品管理法》第十条第二款已明确规定：“中药饮片必须按照国家药品标准炮制,国家药品标准没有规定的,必须按照省、自治区、直辖市人民政府药品监督管理部门制定的炮制规范炮制。

” 2005年版《中华人民共和国药典》附录中对药材炮制通则的描述是“药材炮制系指将药材经净制、切制、炮炙处理,制成一定规格的饮片,以适应医疗要求调配、制剂的需要,保证用药安全和有效”
本文查阅大量资料，对北五味子饮片的炮制工艺做了系统性的研究，探讨北五味子饮片炮制工艺及质量标准规范化的研究意义，制定研究内容和方案，制定技术路线，为制定北五味子的最佳炮制方法及中药饮片炮制研究规范化提供借鉴。

一、北五味子炮制工艺研究的意义
木兰科植物五味子的成熟果实，习称“北五味子”。

能收敛固涩、益气生津、补肾宁心。

用于久咳虚喘、津亏口渴、遗精、自汗、盗汗、久泻、神经衰弱、肝炎等证。

近年来, 通过大量临床实验, 发现本品在诸多方面都有较好的疗效, 临床应用更加广泛。

固其制定规范化的质量标准是非常有必要的。

“十五”攻关期间，国家先后投资1 500余万元对100余种中药的常用饮片进行其炮制工艺规范化及质量标准研究。

在这样的大形势下，研究五味子饮片的炮制工艺和质量标准规范化，是提高中药饮片质量，确保中药疗效的需要。

规范化质量保准和炮制工艺的制定，还可以改变目前小而全的企业生产模式，使饮片企业应根据当地原料药材的生产状况选择生产的品种，根据市场需求决定生产量。

这是实现中药现代化需要。

二、课题相关领域的国内外技术现状和发展趋势
在当今科技飞速发展的过程中 ,中药炮制的诸多局限已暴露出来 ,炮制标准亟待完善 ,认证规范需要加强中药炮制的规范标准是《中国药典》中收载的饮片炮制标准及炮制通则、《全国中药材炮制规范》和地方炮制规范三级标
准。

由于《中国药典》仅收录了部分药材的炮制方法 ,并且《全国中药材炮制规范》颁布的年代久远 ,有些炮制方法尚欠缺科学依据 ,存在很多的缺陷 ,已经不能满足当今中药材加工生产的要求。

再者 ,由于我国地区众多、民族多样 ,各个地区和民族都有自己独特的中药制药理论体系及民族用药习惯 ,加之地理环境的差异对药材的药理药性、成分含量的影响也比较大 ,使得不同省份在炮制方法上也存在着差异 ,形成了各自的地方炮制规范 (即省、市、自治区炮制规范 )。

这一做法虽有利于保护地方炮制特色 ,但是标准众多 ,没有一个统一的、权威的质量标准来遵守 ,使得药材在流通管理中存在诸多问题[1]。

在生产过程中,绝大部分中药饮片炮制是以地方规范为依据,加上各地规范对原药、名称、设备、工艺制法的描述常常存在差异,使得各地中药饮片质量标准尺度不一,难以实现饮片质量的统一控制。

因此,现行的质量标准中有关中药的有效性、毒性及质量控制等方面亟待完善[2]。

为保证中药饮片的质量和疗效，必须规范中药饮片的炮制工艺，制定其科学的饮片质量标准。

近年来研究表明, 五味子含活性成分木脂素 5%～ 22% , 主要为五味子素、γ-五味子素、去氧五味子素、新五味子素、五味子醇、戈米辛等。

日本学者从五味子中分离出戈米辛A 及脱氧五味子素, 通过大鼠药理实验证明其对免疫性肾炎呈现抑制作用[3]。

五味子素有对中枢神经系统作用，镇静、催眠、保护神经细胞、改善记忆力，对心血管系统，免疫系统，肝脏，抗氧化及衰老抗肿瘤作用。

另外其对抗菌，降糖等作用的研究也挺深入[4]。

,五味子具有广泛的药理作用 ,涉及机体的多个系统 ,相信随着对五味子化学成分和药理作用的深入研究 ,五味子的药用范围将会更广。

三、研究目标
以饮片准入及产业化为目标，坚持传统炮制方法与现代科学方法相结合的原则，实现五味子饮片炮制工艺规范化，质量标准科学化。

四、研究内容、研究方案
1.中药饮片炮制历史沿革研究
根据历代医药文献中有关炮制的内容及记录形式，可以将古代中药炮制学科发展史分为 4 个主要时期：（1）炮制技术的形成时期（先秦－汉代）；（2）炮制学科的初成时期（魏晋－唐代）；（3）炮制学科的完善时期（宋－元代）；（4）炮
制学科的发展时期（明－清代）。

五味子炮制方法最早见于南北朝《雷公炮炙论》,记载有“凡用,以铜刀劈作两片,用蜜浸蒸 ,从巳至申却以浆水浸一宿焙干用”。

这是五味子最初的炮制方法,现今蜜制法已经很少使用。

其后 ,宋《太平圣惠方》、《本草蒙筌》等几十种文献中都记载了五味子各种不同的炮制方法。

综合历代五味子的炮制方法,主要有净制、切制、蜜制、炒制、酒制、醋制、盐制等。

有不加辅料的,也有加辅料的 ,所用辅料有蜂蜜、黄酒、米醋、药汁、盐水等[5]。

研究中药饮片炮制方法的历史沿革变化轨迹及前人炮制的原始意图，总结前人的炮制经验和临床体会，为开展中药饮片炮制规范化研究提供有益的借鉴。

2.现代研究文献的评价分析
国内外对五味子的化学成分、炮制对其化学成分的影响、炮制工艺、药理作用、临床疗效等方面的报道众多，取得了较大的成果。

认真综合评价分析了中药及其饮片的化学、药理、毒理、临床应用、炮制及临床应用等相关领域的现代研究文献，了解五味子炮制的国内外技术现状及其发展趋势。

为制定切实可行的研究方案，确定研究考察指标及研究起点，奠定坚实的基础。

3.辅料标准与检测方法研究
本文所采用的五味子是木兰科植物的五味子Schisandra chinensis(Turcz.) Bsill.的干燥成熟果实。

习称“北五味子”。

秋季果实成熟是采摘，晒干或蒸后晒干，出去果梗及杂质。

购置辅料醋，确定其质量标准。

检测方法，取净五味子，加入醋，拌匀，置适宜的容器内，加热蒸透至黑色，取出干燥，用时捣碎。

表面乌黑色，油润，稍有光泽。

果肉柔软，有粘性。

种子表面棕红色，有光泽。

4.中药饮片炮制工艺规范化研究
以《中国药典》和《全国中药炮制规范》为主要参考，结合炮制历史沿革和现代文献研究，对所研究品种相同炮制方法的不同工艺进行横向比较，筛选优化出最佳工艺；在此基础上，以成分、药效等为指标，采用正交设计等方法，确定具体工艺参数；饮片厂中试验证，确定产业化炮制方法。

5.主要药效学实验用中试样品作主要药效学实验
6.中药饮片质量标准研究
（1）饮片名称：北五味子
（2）饮片来源：木兰科植物的五味子Schisandra chinensis(Turcz.) Bsill.的干燥成熟果实。

（3）炮制方法：取净五味子，加入醋，拌匀，置适宜的容器内，加热蒸透至黑色，取出干燥
（4）饮片性状：表面乌黑色，油润，稍有光泽。

果肉柔软，有粘性。

种子表面棕红色，有光泽。

（5）鉴别含显微鉴别、薄层等鉴别特征。

显微鉴别：于显微镜下观察横切面各层细胞，做描述。

北五味子横切面：外果皮为1列方形或长方形表皮细胞，壁稍厚，外被角质层，散有油细胞；中果皮薄壁细胞10余列，含淀粉粒，散有小形外韧型维管束；内果皮为1列小方形薄壁细胞。

种皮最外层为1列径向延长的石细胞，壁厚，纹孔及孔沟细密；其下为数列类圆形、三角形或多角形石细胞，纹孔较大；石细胞层下为数列薄壁细胞，种脊部位有维管束；油细胞层为1列长方形油细胞，含棕黄色挥发油；再下为3～5列小形细胞；种皮内表皮为1 列小细胞，壁稍厚，胚乳细胞含脂肪油滴及糊粉粒。

粉末暗紫色。

种皮表皮石细胞表面观呈多角形或长多角形，直径18～ 50 μｍ，壁厚，孔沟极细密，胞腔内含深棕色物。

种皮内层石细胞呈多角形、类圆形或不规则形，直径约至83μｍ，壁稍厚，纹孔较大。

果皮表皮细胞表面观类多角形，垂周壁略呈连珠状增厚，表面有角质线纹；表皮中散有油细胞。

中果皮细胞皱缩，含暗棕色物，并含淀粉粒。

薄层鉴别：取本品粉末 1g，加三氯甲烷20ml，加热回流0.5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷 1ml使溶解，作为供试品溶液。

另取五味子对照药材 1g，同法制成对照药材溶液。

再取五味子甲素对照品，加三氯甲烷制成每 1ml 含 1mg的溶液，作为对照品溶液。

照薄层色谱法(根据《中华人们共和国药典》2005版一部附录Ⅵ B)试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶
GF254薄层板上，以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15:5:1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。

供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

（6）检查杂质检查
根据《中华人们共和国药典》2005版一部附录IXA杂质检查法，称取100g的净五味子，摊开，将霉烂、变质、虫蛀及其他杂质拣出，将各类杂质分别称重，计算其在供试品中的百分含量，杂质不得超过1%。

（7）浸出物测定可选择水溶性浸出物或醇溶性浸出物作为饮片质量控制指标。

（8）含量测定含主要药效成分、有效部位或指标成分的含测方法及含量下限。

根据《中华人们共和国药典》2005版一部附录附录ⅥD高效液相色谱法测定。

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以四氢呋喃-水（40：60）为流动相；检测波长为254nm。

理论板数按五味子酯甲峰计算应不低于3000。

对照品溶液的制备精密称取五味子酯甲对照品适量，加甲醇制成每 1ml含20μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取本品粉末(过三号筛)约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品含五味子酯甲(C30H32O9)不得少于0.12％。

（9）性味归经、功能主治、用法用量、注意事项参考现行《药典》、部颁中药材标准
五味子：酸、甘，温。

归肺、心、肾经。

主治收敛固涩，益气生津，补肾宁心。

用于久咳虚喘，梦遗滑精，遗尿尿频，久泻不止，自汗，盗汗，津伤口渴，短气脉虚，内热消渴，心悸失眠。

（10）包装和储存条件含包装材料、包装规格和储存条件等说明。

置阴凉干燥处，防霉。

（11）保质期至少对三批样品进行一定包装条件及室温下12个月的稳定性考察，根据稳定性考察情况，确定保质期。

7. 编写中药饮片质量标准起草说明
五、技术路线
参考文献：
[1] 肖庆中.中药炮制的思考[J].中国民族民间医药,2009,18:61.
[2] 徐继建,邓伟忠,张宗华.规范炮制在中药饮片质量控制中的现状及对策初探[J].中国中医药信息杂志,2009,16(10):3.
[3] 杨晓玲,李爱民.五味子研究概况[J].时珍国医国药,1999,10(4):300-301.
[4] 魏景文.五味子药理研究新进展[J].天津药学,2009,21(5):55-56.
[5] 刘进群.五味子炮制历史沿革的研究[J].浙江中医杂志,2009,44(3):228.。