酶类药物含制备工艺[优质材料]
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有机溶剂法 某些结合酶如微粒体和线粒体膜的酶，由于和脂类牢固结合， 用 水溶液很难提取，为此必须除去结合的脂类，且不能使酶变性，最常 用的有机溶剂是丁醇。
表面活性剂法 表面活性剂能与蛋白质结合而分散在溶液中，故可以提取结合酶。
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（3）酶制剂的工业提取法
发酵液的预处理及过滤： 在发酵液中加入絮凝剂（聚丙烯酰胺、右旋糖酐和聚谷氨酸） 酶液的脱色（活性炭、脱色树脂） 盐析 有机溶剂法 喷雾干燥直接制备粉末酶制剂
木瓜凝乳蛋白酶用于治疗椎间盘突出症；
胰蛋白酶还用于治疗毒蛇咬伤。
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3．心血管疾病治疗
弹性蛋白酶能降低血脂，用于防治动脉粥样硬化； 激肽释放酶有扩张血管、降低血压作用； 某些酶制剂对溶解血栓有独特效果。如尿激酶、
链激酶、蚓激酶、纤溶酶及蛇毒溶栓酶。 凝血酶可用于止血。
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5、其他酶类生化产品
细胞色素c是参与生物氧化的一种非常有效的电子传递体， 是组织缺氧治疗的急救和辅助用药；
超氧化物歧化酶(SOD)用于治疗类风湿性关节炎、放射病， 在抗衰老、抗辐射、消炎等方面也有显著疗效。
PEG-腺苷脱氢酶用于治疗严重的联合免疫缺陷症；
DNA酶和RNA酶可降低痰液黏度，用于治疗慢性气管炎；
20世纪60年代中期以前，一般动植物来源的酶已陆续投入生产，随后， 又向着生产各种微生物来源的酶和辅酶的方向发展。现已有二千余种 酶被鉴定出来，已经应用的有1211多种其中有二百余种得到结晶。
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二、酶类药物的分类
1. 消化酶类
胰酶、胰脂酶、胃蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶等，
用于治疗消化不良、食欲不振、急慢性肠胃炎、
渐转向微生物。
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2、微生物酶制剂高产菌株的选育
自然界分离筛选. 物理、化学方法处理、诱变. 基因重组与细胞融合技术.
3、微生物酶制剂生产发酵技术
菌株产酶的最适培养条件（培养基、 温度、PH、通气量）
一系列工艺条件（灭菌方式、发酵 罐型号）
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4、酶类药物的提取与纯化
4.抗肿瘤酶类生化产品
用于治疗某些肿瘤，如门冬酰胺酶、谷氨酰胺酶、蛋氨酸酶等。 L-门冬酰胺酶是一种抗白血病药物，它是利用门冬酰胺酶选择性地
争夺某些类型瘤组织的营养成分，干扰或破坏肿瘤组织代谢，而正 常细胞能自身合成门冬酰胺故不受影响。 谷氨酰胺酶能治疗多种白血病、腹水瘤、实体瘤等。 神经氨酸苷酶是一种良好的肿瘤免疫治疗剂。 尿激酶可用于加强抗癌药物如丝裂霉素(mitomycin)的药效， 米曲溶栓酶也能治疗白血病和肿瘤等
（1）材料的预处理 动物材料的预处理： 机械法 冻融 丙酮粉
微生物材料的预处理: 干燥法：干燥后菌体产生自溶。
空气干燥法：适合于酵母，热稳定性好的酶。 真空干燥法：适合细菌 冷冻干燥：适合于较敏感的酶。 机械法
酶法处理
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（2） 酶的提取
水溶解法：常用稀盐溶液或缓冲液提取，一般在低温下操作，酸 性蛋白酶用碱性溶液提取，碱性蛋白酶用酸性溶液提取，盐溶度 以等渗为好，0.15mol/L NaCl的离子强度是最适合酶的提取。
依 消化功能受阻等。
照
其 功源自文库
2.
消炎（抗炎）
效 胰蛋白酶、糜蛋白酶等用于消炎、消肿、清疮、
和
排脓和促进伤口愈合；
临 床 应 用
胶原蛋白酶用于治疗褥疮和溃疡；
溶菌酶可作为一种具有杀菌作用的天然抗感染 物质。有抗菌、抗病毒、止血、消肿止痛及加
分
快组织恢复功能等作用。临床用于慢性鼻炎、
类
急慢性咽喉炎、水痘、带状疱疹和扁平疣等
2、药用酶—是用于预防、治疗、诊断疾病的一类酶制剂。
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3、酶类药物的发展历程
4千多年前的夏禹时代就盛行酿酒；周朝已开始制醋、酱、豆豉（在霉 菌蛋白酶作用下产生的风味食品）和饴糖（主要含麦芽糖）.
1833年，Payen从麦芽的抽提物中沉淀出一种对热不稳定的物质，它 可促进淀粉水解成可溶性糖，人们开始意识到生物细胞中可能存在着 一种类似催化剂的物质.
透明质酸酶用于药物扩散剂；
青霉素酶可治疗青霉素过敏。
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6．辅酶类生化产品
辅酶或辅基在酶促反应中起着递氢、递电子或基团转移作 用，对酶的催化作用的化学反应方式起着关键性决定作用。 多种酶的辅酶或辅基成分具有医疗价值。
如烟酰胺腺、腺嘌呤二核苷酸(NAD)、烟酰胺腺嘌呤核苷酸 磷酸(NADP)、黄素单核苷酸(FMN)、泛醌、辅酶A等已广 泛用于肝病和冠心病的治疗。 辅酶A常与ATP、细胞色素c、胰岛素等组成复方制剂以增强 疗效。
第六节 酶类药物
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1
主要内容 ：
一、概述 二、酶类药物的分类 三、酶类药物的制备 几种重要酶类药物的制备工艺
知识目标：
掌握酶类药物分类、应用和生产方法 掌握SOD的生产工艺 了解酶类药物的发展趋势
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一、概述
1 、 酶(enzyme)的特点
酶具有高度专一性和催化效率. 酶催化反应的反应条件温和. 酶的催化活性在生物体内受到多种因素的调节. 酶对底物的结构具有严格的选择性.
1893年 francs用木瓜蛋白酶治疗白喉和结核性溃疡病，疗效较好.
1896年，W·Kuhne首先把这类物质称为“enzyme”，中文译为 “酶”.
1897年Buchner成功地用不含细胞的酵母液实现发酵，说明具有发酵 作用的物质存在于细胞内，并不依赖活细胞.
1926年Sumner首次提取出脲酶，并进行结晶。
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三、酶类药物的制备
1、原料选择
（1）不同酶的用料选择(含量低）
（2）注意不同生长发育情况及营养状况 （3）原料来源丰富 （4）从简化提纯步骤着手（鸽肝中提取乙酰化酶，需将动物饥饿，
减少肝糖原）
（5）如用动物组织作原料，应在此动物宰杀后立即取材。
随着酶应用日益广泛和需求量的增加，工业生产的重点已逐
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（4）酶的纯化
凡用于蛋白质的纯化手段均适用于酶的纯化. 注意两个问题：1.建立快速的测定酶活力的方法
2.建立活力回收表
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☆杂质去除 PH和加热沉淀法 蛋白质表面变性法 选择性变形法 核酸沉淀剂法 酶与底物结合
表面活性剂法 表面活性剂能与蛋白质结合而分散在溶液中，故可以提取结合酶。
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（3）酶制剂的工业提取法
发酵液的预处理及过滤： 在发酵液中加入絮凝剂（聚丙烯酰胺、右旋糖酐和聚谷氨酸） 酶液的脱色（活性炭、脱色树脂） 盐析 有机溶剂法 喷雾干燥直接制备粉末酶制剂
木瓜凝乳蛋白酶用于治疗椎间盘突出症；
胰蛋白酶还用于治疗毒蛇咬伤。
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3．心血管疾病治疗
弹性蛋白酶能降低血脂，用于防治动脉粥样硬化； 激肽释放酶有扩张血管、降低血压作用； 某些酶制剂对溶解血栓有独特效果。如尿激酶、
链激酶、蚓激酶、纤溶酶及蛇毒溶栓酶。 凝血酶可用于止血。
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5、其他酶类生化产品
细胞色素c是参与生物氧化的一种非常有效的电子传递体， 是组织缺氧治疗的急救和辅助用药；
超氧化物歧化酶(SOD)用于治疗类风湿性关节炎、放射病， 在抗衰老、抗辐射、消炎等方面也有显著疗效。
PEG-腺苷脱氢酶用于治疗严重的联合免疫缺陷症；
DNA酶和RNA酶可降低痰液黏度，用于治疗慢性气管炎；
20世纪60年代中期以前，一般动植物来源的酶已陆续投入生产，随后， 又向着生产各种微生物来源的酶和辅酶的方向发展。现已有二千余种 酶被鉴定出来，已经应用的有1211多种其中有二百余种得到结晶。
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二、酶类药物的分类
1. 消化酶类
胰酶、胰脂酶、胃蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶等，
用于治疗消化不良、食欲不振、急慢性肠胃炎、
渐转向微生物。
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2、微生物酶制剂高产菌株的选育
自然界分离筛选. 物理、化学方法处理、诱变. 基因重组与细胞融合技术.
3、微生物酶制剂生产发酵技术
菌株产酶的最适培养条件（培养基、 温度、PH、通气量）
一系列工艺条件（灭菌方式、发酵 罐型号）
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4、酶类药物的提取与纯化
4.抗肿瘤酶类生化产品
用于治疗某些肿瘤，如门冬酰胺酶、谷氨酰胺酶、蛋氨酸酶等。 L-门冬酰胺酶是一种抗白血病药物，它是利用门冬酰胺酶选择性地
争夺某些类型瘤组织的营养成分，干扰或破坏肿瘤组织代谢，而正 常细胞能自身合成门冬酰胺故不受影响。 谷氨酰胺酶能治疗多种白血病、腹水瘤、实体瘤等。 神经氨酸苷酶是一种良好的肿瘤免疫治疗剂。 尿激酶可用于加强抗癌药物如丝裂霉素(mitomycin)的药效， 米曲溶栓酶也能治疗白血病和肿瘤等
（1）材料的预处理 动物材料的预处理： 机械法 冻融 丙酮粉
微生物材料的预处理: 干燥法：干燥后菌体产生自溶。
空气干燥法：适合于酵母，热稳定性好的酶。 真空干燥法：适合细菌 冷冻干燥：适合于较敏感的酶。 机械法
酶法处理
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（2） 酶的提取
水溶解法：常用稀盐溶液或缓冲液提取，一般在低温下操作，酸 性蛋白酶用碱性溶液提取，碱性蛋白酶用酸性溶液提取，盐溶度 以等渗为好，0.15mol/L NaCl的离子强度是最适合酶的提取。
依 消化功能受阻等。
照
其 功源自文库
2.
消炎（抗炎）
效 胰蛋白酶、糜蛋白酶等用于消炎、消肿、清疮、
和
排脓和促进伤口愈合；
临 床 应 用
胶原蛋白酶用于治疗褥疮和溃疡；
溶菌酶可作为一种具有杀菌作用的天然抗感染 物质。有抗菌、抗病毒、止血、消肿止痛及加
分
快组织恢复功能等作用。临床用于慢性鼻炎、
类
急慢性咽喉炎、水痘、带状疱疹和扁平疣等
2、药用酶—是用于预防、治疗、诊断疾病的一类酶制剂。
专业资料
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3、酶类药物的发展历程
4千多年前的夏禹时代就盛行酿酒；周朝已开始制醋、酱、豆豉（在霉 菌蛋白酶作用下产生的风味食品）和饴糖（主要含麦芽糖）.
1833年，Payen从麦芽的抽提物中沉淀出一种对热不稳定的物质，它 可促进淀粉水解成可溶性糖，人们开始意识到生物细胞中可能存在着 一种类似催化剂的物质.
透明质酸酶用于药物扩散剂；
青霉素酶可治疗青霉素过敏。
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6．辅酶类生化产品
辅酶或辅基在酶促反应中起着递氢、递电子或基团转移作 用，对酶的催化作用的化学反应方式起着关键性决定作用。 多种酶的辅酶或辅基成分具有医疗价值。
如烟酰胺腺、腺嘌呤二核苷酸(NAD)、烟酰胺腺嘌呤核苷酸 磷酸(NADP)、黄素单核苷酸(FMN)、泛醌、辅酶A等已广 泛用于肝病和冠心病的治疗。 辅酶A常与ATP、细胞色素c、胰岛素等组成复方制剂以增强 疗效。
第六节 酶类药物
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主要内容 ：
一、概述 二、酶类药物的分类 三、酶类药物的制备 几种重要酶类药物的制备工艺
知识目标：
掌握酶类药物分类、应用和生产方法 掌握SOD的生产工艺 了解酶类药物的发展趋势
专业资料
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一、概述
1 、 酶(enzyme)的特点
酶具有高度专一性和催化效率. 酶催化反应的反应条件温和. 酶的催化活性在生物体内受到多种因素的调节. 酶对底物的结构具有严格的选择性.
1893年 francs用木瓜蛋白酶治疗白喉和结核性溃疡病，疗效较好.
1896年，W·Kuhne首先把这类物质称为“enzyme”，中文译为 “酶”.
1897年Buchner成功地用不含细胞的酵母液实现发酵，说明具有发酵 作用的物质存在于细胞内，并不依赖活细胞.
1926年Sumner首次提取出脲酶，并进行结晶。
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三、酶类药物的制备
1、原料选择
（1）不同酶的用料选择(含量低）
（2）注意不同生长发育情况及营养状况 （3）原料来源丰富 （4）从简化提纯步骤着手（鸽肝中提取乙酰化酶，需将动物饥饿，
减少肝糖原）
（5）如用动物组织作原料，应在此动物宰杀后立即取材。
随着酶应用日益广泛和需求量的增加，工业生产的重点已逐
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（4）酶的纯化
凡用于蛋白质的纯化手段均适用于酶的纯化. 注意两个问题：1.建立快速的测定酶活力的方法
2.建立活力回收表
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☆杂质去除 PH和加热沉淀法 蛋白质表面变性法 选择性变形法 核酸沉淀剂法 酶与底物结合