7第七章 治疗性疫苗

疗性疫苗可以改变病毒慢性感染（持续性感染）的病
程。结果还提示可进一步修饰gD2抗原，或改变佐剂以
提高疗效。wenku.baidu.com
2．人类免疫缺陷病毒（HIV）的治疗性疫苗
HIV感染导致的慢性进行性免疫缺陷，最终发生致
死的严重后果。 HIV的包膜抗原成分gp160曾经克隆
表达后，先用于正常人体，证明无毒性，以后 1991年
1.裸核酸作为治疗性疫苗（DNA疫苗）的优点
（1）诱生表位-靶向免疫应答 （2）扩大免疫原性的幅度
（3）诱生CTL
（4）便于加入免疫调控因子
2.DNA疫苗用于肿瘤治疗
用基因工程的方法修饰肿瘤细胞或免疫细胞，使其 分泌某些细胞因子从而可诱生炎症反应或免疫应答， 达到清除肿瘤的效果。 由于肿瘤中很少具有特异性抗原，因此只能用转染 细胞因子的基因进行研究。 在肿瘤DNA免疫治疗中的另一个问题是，多次注入转 染的基因细胞后，是否会引起对细胞因子的免疫应 答而失效或造成不良后果。
3.临床应用的重要性
治疗性疫苗和预防性疫苗的很重要区别是
前者需要临床医生的积极参与（禁忌症与适应
症）。由于治疗性疫苗的对象是患者，因此常 伴有免疫低或其他病理变化，在使用疫苗时需 较预防性疫苗更为慎重。选择对象时应有严格 标准，对每种疫苗的疗效也应用不同的评价标
准。在免疫应答出现时还可能伴有免疫损伤而
由于微生物的急性感染较容易通过药物控制，持 续性感染已成为棘手的重要问题。人们已逐渐认 识到，为控制持续性微生物感染，必须考虑如何 提高机体的免疫力 。
2.基因重组技术的发展与应用
目前基因重组与表达技术已日趋成熟，不少微 生物基因的表达产物已获得，并可对其生物学 特性进行研究，提供了用于发展治疗性疫苗的 组分。 各种抗原成分的组合、拼接或用微生物抗原基 因与不同细胞因子基因组成表达嵌合性蛋白， 或使表达蛋白与药物交联的治疗性疫苗为开发 治疗性疫苗提供了广阔的前景。
1987年Stanberry 等在豚鼠的生殖道模型中发现
，用HSV作预防性免疫，不仅可预防HSV感染，还可减
少75%的病毒发作的次数与缩短病期。用克隆表达的
HSV糖蛋白gD2也同样有效。实验中，疫苗明显地诱生
了对HSVⅡ的中和抗体，并且使对gD2的抗体效价增高
了4倍。由于抗体的效价并不与HSV的复发呈相关性， 认为疫苗的效果可能与细胞免疫或细胞因子有关。治
治疗性疫苗与预防性疫苗的根本不同点：
1）对象不同：前者是已被感染或患病的机体，后 者是健康的人群； 2）目的不同：前者用于治疗患者或防止疾病恶化， 后者是用于预防；
3）应用不同：前者须考虑患者的禁忌症和适应症， 后者对未被感染的人群。
研究注意以下特点：
1.免疫原的选择与优化
治疗性疫苗所用免疫原的选择需在深入研究 治疗对象的免疫应答基础上选定。根据病原学的 特点，一般选用的微生物抗原应为能引起中和性 抗体及可诱生杀伤性T细胞（CTL）免疫应答的抗 原；但还必须考虑患者的免疫应答，即患者已产 生和未产生的免疫应答。为了更有效地刺激患者 的免疫应答，有学者开展了嵌合免疫原或联合免 疫原型的疫苗。
出现不良反应，需要医生协同进行判断。
第二节
治疗性疫苗的种类
（category of curing vaccine）
1.根据治疗性疫苗针对疾病种类的不同可分为：
①细菌型治疗性疫苗；
②病毒型治疗性疫苗；
③肿瘤治疗性疫苗； ④自身免疫病治疗性疫苗。 2.根据治疗性疫苗的作用机制可分为： ①特异性治疗性疫苗；
4.DNA疫苗用于治疗结核病
对于DNA免疫预防结核病的研究，在小鼠中显示了很好的 效果。Tascon于1996年用编码分枝杆菌65kDa热休克蛋白（
hsp65）的质粒DNA免疫小鼠，动物不仅可诱生特异的体液与细
胞免疫，还可抵抗用结核杆菌的攻击。DNA免疫所获得的免疫 保护作用可与用卡介苗免疫的效果相同。用hsp65蛋白免疫鼠 则无此作用。 用编码分枝杆菌另一种蛋白（36kDa富含脯氨酸）的DNA免疫 也对小鼠具有保护作用。当以 hsp65DDNA 和 IL-12DNA 联合免疫 则反而效果下降，说明互相有拮抗作用。当先用化疗，再用 DNA免疫，则可清除结核菌，诱生特异的体液和细胞免疫。
治疗 25 名生殖道疣的 II 期临床研究结果。应用重组表 达的HPV蛋白与Aldrogel（氢氧化铝类）共免疫，25名 患者在治疗后8周完全清除了生殖道疣。
（四）裸核酸型治疗性疫苗 （naked nucleic acid）
1993年经Merck公司在流感病毒预防性疫苗的研制中证实，裸 DNA确有免疫原性后，已成为全球疫苗研究的最热点。作为治疗性 疫苗，裸DNA已被用于治疗肿瘤、自身免疫病、传染病等。
用于治疗30名处于HIV感染第1、2期的患者。
最近，除gp160 外，其他的HIV的包膜抗原，如gp120
， p24 病毒样颗粒、重组的金丝雀痘病毒 gp160 等疫苗
均仍在研究中。
第 12届世界艾滋病大会，Valentine 等已报道，用多
种药物先治疗，再用灭活、但去除了gp120的疫苗免疫
如卡介苗主要用于非特异地提高机体的细胞免疫，但作
用较弱而被用作一种协同治疗，联合用于肿瘤病人。除卡
介苗外，短小棒状杆菌（革兰氏阳性杆菌）以及其他的一 些细菌均曾被用作非特异的治疗性疫苗。
（二）细菌型治疗性疫苗（bacteria curing
vaccine）
细菌性感染因有抗生素等治疗，可以控制，故治疗
布氏杆菌素治疗布鲁菌感染、用灭活的自身菌苗 治疗金黄色葡萄球菌皮肤反复感染等。
病毒方面，则已开展了对人类免疫缺陷病毒 （HIV），单纯疱疹病毒（HSV），乙肝病毒 （HBV）感染等的治疗性疫苗的研制。 此外还研制了针对自身免疫病和肿瘤的治疗性 疫苗。 广义治疗性疫苗：是指在已感染病原生物或患 某些疾病的机体中，通过诱生机体的特异性或 非特异性免疫应答，以达到治疗或防止疾病恶 化的生物制品。
3.免疫学理论的发展
由于对HIV免疫的研究，大大推动了抗感染免 疫的理论发展。对不同感染过程中体液与细胞免 疫应答的详细分析、抗原提呈、细胞内信号传递
途径的进一步了解、微生物对免疫细胞感染所造
成的后果、以及裸DNA免疫的机制等均对发展治
疗性疫苗起了推动作用。
二.治疗性疫苗的特点（specialty of curing vaccine）
此后，巴斯德研究所开展了多中心双盲对照的大规模临床研 究；Coullin等于1999年已报道在治疗者中，27名患者中的7 名出现了对HBsAg的特异性淋巴细胞增殖反应及释放更高的TH1 类的细胞因子。 我国在这一研究中缺少双盲对照，及所用检测试剂的标准化 与可比性间尚有不足之处。 Chisari等以HBsAg为治疗性疫苗的病毒表位也做了许多工作。
第八章 治疗性疫苗 ( Chapter VIII Cure Vaccine)
第一节 概述(Section I Outline) 多数学者认为治疗性疫苗应为发生疾病后为治疗 疾病所采用的疫苗，但对一些感染后免疫用的疫 苗也可视为广义的治疗性疫苗。

治疗性疫苗的研制和应用已覆盖了多种疾病。
细菌方面，已有用麻风菌素治疗麻风菌感染、用
，并且降低了复发率。其机制为病人的特异性细胞免疫得以提高 ，并不再对麻风杆菌处于耐受状态。
伦敦大学医学院的Stanford，从乌干达的土壤中分离了一株分
支杆菌（Mycobacterium 的患者仅有78%治愈。 近来，已经开始研究针对幽门螺杆菌感染的治疗性疫苗。由于 幽门螺杆菌引起的感染为慢性，加上长期用药后总会发生耐药性 ，开展这一治疗性疫苗的研究有一定价值。 vaccae），并用灭活的该菌苗联合药 物治疗结核患者，联合疗法使87%的患者治愈，而单用药物治疗
②非特异性治疗性疫苗。
3.根据所用免疫原的种类可分为：
①核酸型治疗疫苗；
②重组蛋白型治疗疫苗；
③天然蛋白型治疗疫苗；
④免疫复合物型治疗疫苗；
⑤嵌合型治疗疫苗。
（一）非特异性治疗性疫苗（nonspecific curing vaccine）
这类疫苗的特点为属非特异地诱生机体的细胞免疫应答
，其作用较弱，一般均作为联合治疗的一部分。
，可诱生强而显著的对 p24 的细胞增殖应答（ Hoff ， 1999）。这些发现又一次激发了对HIV治疗性疫苗的研 制热情。
3.人类乳头状瘤病毒治疗性疫苗
人类乳头状瘤病毒（ HPV ）可引起皮肤疣，生殖
道疣等，其中的某些类型是潜在的致宫颈癌的病毒。
1999年已报道美国学者用HPV的L2E7融合基因表达蛋白
一.治疗性疫苗发展的基础 （foundation
of curing vaccine development）
治疗性疫苗虽已经历了近100年的历史， 但近来重新引起了人们的重视，其主要 原因是由于具备了更好的基础。
1.微生物的持续性感染日益受到重视
细菌及病毒均可引起持续性感染，例如结核病， 麻风病，反复发作的葡萄球菌感染，HBV，HIV， HSVII，以及丙型肝炎病毒（HCV）感染等。
2.动物模型的建立
为考核治疗性疫苗的疗效，需要建立模拟人体 感染的动物模型。
一种是在灵长类动物，如黑猩猩，猿猴中寻找相
似的持续感染，如猴免疫缺陷病（SIV），或是在
非灵长类动物中寻找类似感染，如类似人乙肝病毒
的土拨鼠或鸭乙肝动物模型；或模拟人HSVⅡ，在
雌性豚鼠中建立生殖道疱疹病毒感染等。
另一种建立有病毒基因整合的转基因动物，如用 HBV基因建立的转基因小鼠。
3.DNA疫苗用于治疗自身免疫病
为研究DNA免疫是否可用于治疗自身免疫病，学者 们用鼠的实验性自身免疫性脑炎（EAE），一种T 细胞介导的自身免疫病模型进行了研究。 实验证明，用针对致病V基因产物的单克隆抗体， 或用致病性TCRV区的抗原决定簇合成肽免疫，均 有治疗自身免疫性脑炎（EAE）的作用。 这一结果显示DNA免疫在自身免疫病中可使TH1类 免疫应答向TH2类免疫应答转化，从而对具有对多 发性硬化症，青年型糖尿病，类风湿性关节炎等 自身免疫性疾病有潜在的治疗作用。
（三）病毒型治疗性疫苗
（virus curing vaccine）
在病毒型疫苗中研究的最多的是：生殖道单纯疱疹 的治疗性疫苗，慢性乙肝治疗性疫苗，HIV感染的治 疗性疫苗。 目前这些疫苗已有临床研究的资料。此外，也有学 者在研究HCV，人类乳头状瘤病毒疫苗，并认为有可 能用于治疗患者。
1．单纯疱疹治疗性疫苗
第三节 乙型肝炎复合物型治疗性疫苗 （ Curing vaccine of Compound HBV ） 一.乙型肝炎治疗性疫苗的研究进展 （research advance）
80年代初国外已有报道用乙肝预防性疫苗治疗HBsAg 阳性儿童，无症状携带者及慢性肝炎患者的临床研究， 均被证明无效。 从90年代初，法国学者又开始了用预防性疫苗治疗乙 肝患者的研究。1994年Pol等用重组GenHavacB疫苗 （CHO细胞表达）的HBsAg+PreS2,20μg/次，每月一 次，共三次，治疗慢性乙肝患者，以后进一步用疫苗 治疗加用干扰素，结果32名患者31%血清HBVDNA转阴， 4名降低（13%）。
性疫苗仅限于少数几种慢性感染，如结核病、麻风病
及布鲁氏病等。
20世纪初，为治疗金黄色葡萄球菌引起的反复发作
的疖及痈，Wright采用自患者分离的加热灭活的葡萄
球菌为治疗性疫苗，获得成功，奠定了细菌型治疗性
疫苗的基础。
1986年Convit曾报道联合使用灭活的麻风菌苗与卡介苗治疗
300名麻风病人，结果可使60%的严重麻风病人病灶中清除麻风菌
5.DNA疫苗用于治疗艾滋病
用编码HIV的gp160的DNA疫苗肌肉注射免疫，在动物中
可诱生抗体。在猴免疫缺陷病毒感染的模型中，HIV DNA 免疫也显示有一定疗效。 Calarota等（1998）用编码HIV调控因子的基因组建的 DNA疫苗治疗了9名无症状的HIV感染者，结果8名患者产生 了特异的CTL，并且未发生副反应。 MacGregor等（1998）对15例无症状的HIV感染者，用编 码env和rev的DNA疫苗进行了注射。有些患者出现了gp120 的抗体或对gp160的CTL。 临床研究显示DNA免疫的安全性和潜在的肝免疫原性。