秦4 甘薯的微茎尖脱毒快繁研究

秦4 甘薯的微茎尖脱毒快繁研究

发表时间：2014-11-27T11:14:29.480Z 来源：《价值工程》2014年第6月上旬供稿作者：崔志钢

[导读] 试验结果证实本研究所用的添加有6-BA0.5mg/L 和0.1mg/LNAA 的MS 培养基，是适合秦薯4 号脱毒种苗茎段快速繁殖的。On Micro Shoot Tip Virus-free Rapid Propagation of Qinshu 4

崔志钢CUI Zhi-gang曰王琨WANG Kun曰顾昌华GU Chang-hua曰徐代华XU Dai-hua曰陈涛CHEN Tao（铜仁职业技术学院农学院，铜仁554300）（Agronomy Institute of Tongren Polytechnic College，Tongren 554300，China）摘要院本研究通过对秦薯4 号微茎尖剥离加变温处理的措施，诱导再生植株，获得脱毒原株，再通过优化培养基中植物生长调节剂的配比，建立脱毒试管苗快速繁殖繁的技术参数。结果表明：淤添加有6-BA0.5mg/L 和0.1 mg/LNAA 的MS 培养基较适用于秦薯4号脱毒单株快繁。于MS 培养基和MB 培养基对甘薯试管苗的增殖作用比B5 和N6 好。

Abstract: This research through stripping and variable temperature measures for Qinshu 4 micro shoot tip to induce regenerationplants, obtain virus-free original strains, then through optimizing composition of plant growth regulators in culture medium to establishtechnical parameters of rapid propagation of virus-free plantlets. The results show that: 淤MS medium with 6-BA 0.5mg/L and 0.1 mg/LNAA is suitable for Qinshu 4 virus-free plant rapid propagation. 于The proliferative effects of MS medium and MB medium for sweetpotato vitro plantlets is better than B5 and N6 medium.

关键词院微茎尖；快速扩繁；植物生长调节剂Key words: micro shoot tip；rapid propagation；plant growth regulator中图分类号院S531 文献标识码院A 文章编号院1006-4311（2014）16-0328-02 0

引言防治甘薯病毒病，提高甘薯产量和品质的一条最有效途径是利用茎尖分生组织培养繁育甘薯脱毒苗[1]。目前关于甘薯脱毒苗培养技术研究很多[3-8]，但现有的脱毒培养技术体系是否适合秦薯4 号甘薯的脱毒繁育，一些技术参数是否需要进一步优化，以及脱毒苗保存、快繁过程中需要注意的一些关键环节都亟待阐明；本研究拟通过微茎尖剥离加变温处理的措施，再通过优化培养基中植物生长调节剂的配比，建立秦薯4 号脱毒试管苗快繁的技术参数。

1 材料与方法1.1 材料：秦薯4 号种薯。

1.2 方法1.

2.1 茎尖分生组织剥离选健壮无病，具有秦4 典型特征的薯块于温室内催芽，至幼苗长到30cm 左右时，取顶端2cm 左右的顶芽35 个，剪去肉眼可见的叶片，用体积分数70%的乙醇做20s 表面消毒，然后以升汞浸泡6min，无菌水冲洗3耀5 次。在超净工作台上、利用体视显微镜切取带有1-2 个叶原基、长0.3耀0.9mm 的茎尖分生组织。

1.2.2 变温处理诱导脱毒单株剥离好的茎尖迅速转入添加0.2mg/L6-BA 的MS 培养基上，遮光28益预培养20h，然后转入光照培养箱或人工气候室，光照16h、温度37益和黑暗8h、温度22益交替变温处理30原50d，待生长中心长第一真叶露出时，视培养基情况转移继代或直接转入正常培养环境继续培养。

1.2.3 脱毒种苗的快速繁殖利用茎尖分生组织剥离与交替变温处理得到的秦薯4 号脱毒苗。脱毒苗在超净台上去叶，切割成1耀2cm，带1耀2 个腋芽的小段，按形态学方向分别接种于N6、B5、MB、MS 基本培养基上，各100 瓶，每瓶3 段。15d 后测量株高、单株叶片数、单株根数和根长和成苗率。

采用MS 作为基本培养基，按表2 中6-BA 和NAA 浓度添加到培养基中，每个处理100 瓶，每瓶3 株。所有培养基均加入30g/L 蔗糖，6.0g/L 琼脂，pH 值5.6耀5.8。接种后，于25益，2000耀3000lx，光照16h/d 条件下培养。15d 后测量株高、单株叶片数、单株根数和根长，并记录发根时间。

2 实验结果及分析2.1 脱毒单株的诱导幼小的生长锥（微茎尖）接种入培养基后，能够较快的适应培养环境。在接种后约7d 即开始膨大，14d 后愈伤组织便可达到麦粒大小。半个月后，一些生长松散的黄白色愈伤组织上开始隐约出现一个绿色的点状区域，随后这一区域逐渐扩大，至一个月左右，一些生长较快的愈伤组织中部的绿色生长中心开始分化出芽，至40 天左右这些芽进一步生长，真叶展开形成芽苗，此时，由于培养基中营养成分的损耗，同时没有根形成，芽苗生长很缓慢，如果将芽苗转至新鲜培养基上，再经过20d左右就可以分化得到完整的再生植株。

2.2 不同基本培养基对秦4 甘薯植株再生的影响（表1）不同基本培养基对脱毒苗的平均根数、平均根长有明显影响，本实验在所采用的4 种培养基中，MS 基本培养基上脱毒薯苗的平均生根数最高，达到6.4 条；单株平均叶片数最多，达到8.3 条，平均株高最高，达到7.1，明显高于其它3 种基本培养基。但是，平均根长以MB 基本培养基中培养的脱毒薯苗最长，达到5.6cm。