盐酸金刚烷胺胶囊含量测定方法

基－１，４－苯醌Ｙ＝３３９５．８Ｘ＋２９２．５９（ｒ＝０．９９９７）。

２，６－二异丙基－１，４－苯醌１．１８５ｎｇ～４７．４ｎｇ与峰面积的线性关系良好。

精密称取３，３′，５，５′－四异丙基联苯酚杂质对照品适量，分别制成０．０５１９、０．１０３８、０．５１９０、０．７７８５、１．０３８０、１．５５７０、２．０７６０μｇ·ｍＬ－１的３，３′，５，５′－四异丙基联苯酚溶液，各取２０μｌ进样分析。

以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标进行线性回归，得回归方程为：３，３′，５，５′－四异丙基联苯酚ｙ＝２９１２．８ｘ－２４２７．３（ｒ＝０．９９８６）。

３，３′，５，５′－四异丙基联苯酚１．０３８ｎｇ～４１．５２ｎｇ与峰面积的线性关系良好。

⑤溶液的稳定性：取供试品溶液，分别于制备后０、６、１０、１２ｈ时进样，主峰面积ＲＳＤ％＝０．３９％，杂质含量测定结果基本一致，表明供试品溶液在１２小时内稳定。

３　讨论
原测定标准中有关物质只检查了单个杂质和总杂质的含量，检测波长为２７５ｎｍ，未控制已知杂质２，６－二异丙基－１，４－苯醌和３，３′，５，５′－四异丙基联苯酚。

本方法在原标准基础上对流动相和检测波长进行优化，选择流动相为磷酸二氢钠一水合物２．７６ｇ溶解于９００ｍｌ水中，用８５％磷酸调节ｐＨ值至３．０，用水稀释至１０００ｍｌ）－乙腈（３５∶６５），采集ＤＡＤ光谱，发现丙泊酚在２７２ｎｍ、杂质２，６－二异丙基－１，４－苯醌在２５４ｎｍ，杂质３，３’，５，５’－四异丙基联苯酚在２６５ｎｍ波长处有最大吸收，而主要杂质大部分都在２７５ｎｍ附近有最大吸收，因此将杂质２，６－二异丙基－１，４－苯醌的检测波长选择为２５４ｎｍ，杂质３，３’，５，５’－四异丙基联苯酚与其他杂质的检测波长选择为２７５ｎｍ。

２，６－二异丙基－１，４－苯醌和３，３’，５，５’－四异丙基联苯酚均为丙泊酚的降解产物，通过外标法来测定两个已知杂质的含量。

该方法可使主峰与杂质２，６－二异丙基－１，４－苯醌峰分离度符合要求，样品中的杂质能被有效检出。

参考文献
［１］王长连，许雄伟，林财珠，等．不同年龄组全麻手术病人丙泊酚药动学研究［Ｊ］．中国药学杂志，２００７，４２（３）：２０９－２１２．
［２］中国人民共和国国家药典委员会．中国药典［Ｍ］．二部．北京：中国医药科技出版社，２０１０．
盐酸金刚烷胺胶囊含量测定方法研究
熊建功＊　杨学辉＊　胡秀娟＊
摘　要：目的：建立盐酸金刚烷胺胶囊的含量测定方法。

方法：ＨＰＬＣ－ＥＬＳＤ法测定盐酸金刚烷胺胶囊含量的方法，色谱柱为Ｃ１８（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ），流动相为乙腈－０．０６％的三氟乙酸（２０∶８０），柱温为３０℃，进样量为１０μｌ，流速为１．０ｍｌ·ｍｉｎ－１。

检测器为ＥＬＳＤ，漂移管温度为６５℃，雾化气体为空气，载气流量为２．８Ｌ·ｍｉｎ－１。

结果：盐酸金刚烷胺在（３９．６２－２３７．７２μｇ·ｍｌ－１）范围内进样量与峰面积的对数有良好的线性关系（ｒ＝０．９９９３）；平均回收率为１００．２％（ＲＳＤ＝１．２％）。

结论：ＨＰＬＣ－ＥＬＳＤ法样品处理简便，准确度高，专属性强，适合盐酸金刚烷胺胶囊的质量控制。

关键词：盐酸金刚烷胺胶囊；高效液相色谱－蒸发光检测器；含量测定
中图分类号：Ｒ９２７．２ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１００６－０９７９（２０１２）１９－００８９－０２Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ａｍａｎｔａｄｉｎｅ　Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ　Ｃａｐｓｕｌｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ。

Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｃ１８ｃｏｌｕｍｎ　ｗａｓｕｓｅｄ，Ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅｓ－－０．０６％ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ（ＴＦＡ）ｓｏｌｕｔｉｏｎ（２０：８０）ａｓ　ｔｈｅ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ　ａｎｄ　１．０ｍｌ·ｍｉｎ－１　ａｓ　ｔｈｅ　ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ．Ｔｈｅｃｏｌｕｍｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｗａｓ　３０℃，ＥＬＳＤ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ａｓ　ｄｅｔｅｃｔｏｒ　ｔｈｅ　ｄｒｉｆｔ　ｔｕｂｅ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｗａｓ　６５℃，ｎｅｂｕｌｉｚｅｒ　ｇａｓ　ｗａｓ　ａｉｒ　ａｎｄｔｈｅ　ｆｌｏｗ　ｉｓ２．８Ｌ·ｍｉｎ－１．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｌｏｇａｒｉｔｈｍ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　Ａｍａｎｔａｄｉｎｅ　Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ　ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ　ｈａｄ　ｇｏｏｄ　ｌｉｎｅａｒ　ｒｅｌａｔｉｏｎ－ｓｈｉｐ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅｌｏｇａｒｉｔｈｍ　ｏｆ　ｔｈｅｉｒ　ｐｅａｋ　ａｒｅａ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｃｏｐｅ　ｏｆ　３９．６２－２３７．７２μｇ（ｒ＝０．９９９３）；Ｔｈｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｗａｓ　１００．２％（ＲＳＤ＝１．２％）。

ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＴｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｄｅｆｉｎｉｔｅ　ｓｉｍｐｌｅ，ｓｔａｂｌｅ　ａｎｄ　ａｃｃｕｒａｔｅ。

Ｉｔ　ｉｓ　ｓｕｉｔａｂｌｅ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｆ　Ａｍａｎｔａｄｉｎｅ　Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ　Ｃａｐｓｕｌｅｓ．Ｋｅｙ　ｗｏｒｄ：Ａｍａｎｔａｄｉｎｅ　ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ　ｃａｐｓｕｌｅ；ＨＰＬＣ－ＥＬＳＤ；Ｃｏｎｔｅｎｔ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
盐酸金刚烷胺是人工合成的饱和三环癸烷的氨基衍生物，临床用于治疗帕金森病、帕金森综合症、药物诱发的锥体外系疾病，也用于预防和治疗Ａ２型流感，最新报道用于治疗可卡因成瘾、氯氮平所致的流涎［１］等疾病收到明显疗效。

其化学结构为三环癸烷－１－胺盐酸盐，分子结构中无共轭双键，因而在紫外区无吸收。

含量测定方法２０１０年版《中国药典》规定为电位滴定法，该方法样品前处理取样量大，操作繁琐。

有方法采用酸性染料比色法［２］、电位滴定法［３］测定盐酸金刚烷胺胶囊含量，本文采用ＨＰＬＣ－ＥＬＳＤ法测定盐酸金刚烷胺胶囊的含量，该方法快速、简便、准确，专属性强、重现性好。

１　仪器与试药
１．１　仪器：Ａｇｉｌｅｎｔ　１２００高效液相色谱系统；Ａｌｌｔｅｃｈ　３３００ＥＬＳＤ检测器；Ａｇｉｌｅｎｔ　１２００色谱工作站。

１．２　试药与样品：盐酸金刚烷胺对照品（购自中国食品药品检定研究院，批号：１００４２６－２０１００２）；盐酸金刚烷胺胶囊为市售，Ｙ１厂，批号０９１１０１；Ｙ２厂，批号０９１０１０１；Ｙ３厂，批号０８１０１７；Ｙ４厂，批号１００２０１；Ｙ５厂，批号１００３０１；Ｙ６厂，批号０１２１８１；Ｙ７厂，批号０９０５０１；Ｙ８厂，批号１００５２０）；水为纯化水，乙腈为色谱纯，三氟乙酸及其他试剂均为分析纯。

２　色谱条件及系统适应性试验
以十八烷基硅烷健合硅胶为填充剂；以乙腈－０．０６％的三氟乙酸溶液（２０∶８０）为流动相；流速：１．０ｍｌ·ｍｉｎ－１；柱温：３０℃；进样量：１０μｌ；Ａｌｌｔｅｃｈ　３３００ＥＬＳＤ检测器，ＥＬＳＤ参数：漂移管温度：６５℃；雾化气体：空气；载气流量：２．８Ｌ·ｍｉｎ－１，对照品及样品色谱图见图１、图２，在该色谱条件下，理论塔板数按金刚烷胺峰计算应不低于４０００。

图１　对照品ＨＰＬＣ－ＥＬＳＤ色谱图
图２　样品ＨＰＬＣ－ＥＬＳＤ色谱图
３　试验方法
＊宁夏医科大学总院心脑血管病医院药剂科（７５０００２）２０１２年７月１８日收稿３．１　对照品溶液的制备：精密称取盐酸金刚烷胺对照品适量，加水制成每１ｍｌ含０．２ｍｇ的溶液，即得。

３．２　供试品溶液的制备：取本品２０粒，分别精密称定，倾出内
（下转第１１１页）
９
８
　２０１２年第１９期
３　讨论
３．１　糖尿病教育对患者良好遵医行为的养成有促进作用，遵医行为与疾病的转归之间有着重要的意义。

本次调查表明，糖尿病患者在干预前不遵医行为达３０％～６０％。

对照组患者出院后在按时服药、饮食、运动、血糖监测和定期复查的遵医率半年内保持在５０％；干预组对糖尿病患者进行特殊教育后，遵医行为逐渐上升到９５％（从表１、２、３中显示），干预组在６个月时服药、饮食、运动、血糖监测和定期复查的遵医率高于对照组，而对照组６个月监测指标的遵医率不随时间增加且有下降趋势（Ｐ＞０．０５）。

目前研究认为，糖尿病的控制除了与合理治疗有关外，与患者有的健康知识、信念、遵医行为和良好的生活方式有关。

只有通过正确合理的健康教育可使糖尿病患者的认知、态度、行为发生变化，得到科学、合理、综合的治疗和管理，提高了患者自身健康的维护能力，才能达到治疗效果预期目标。

表１、２、３中也可看出，健康教育干预的知识了解情况、遵医效果与干预的时间成正比，所以健教育需要系统、持续和有针对性地进行。

３．２　特殊的健康教育对控制和稳定血糖有积极作用。

糖尿病教育改变了患者以往只有病重或没药时就医及重治疗轻监测的传统治疗模式。

传统的一般健康教育方法是重要的，它能教会患者关于糖尿病的知识，但单纯的传授知识并没有改变治疗的顺从性。

干预组健康教育方法是以多次讲座的形式，系统介绍糖尿病健康教育知识，同时增加了个性化的教育和个性化服务，针对每个患者进行评价，对那些顺从性差的患者重点进行护理干预，每月电话随访一次，个别监督指导，以改变他们对疾病的态度，增强患者自我管理能力及解决问题的能力，提高患者的自我管理潜能。

表４显示，干预组患者经特殊教育后血糖、餐后２ｈ血糖、糖化血红蛋白值及相关的总胆固醇、甘油三酯均明显低于教育前和对照组。

这表明干预组的健康教育方法能使患者自我管理能力提高，自我监控和遵医行为的意识增强，血糖控制相对平稳。

说明医护人员对患者获得健康知识起着十分关键的作用，而患者在出院后继续接受护士的社区护理干预，以强化其糖尿病知识和家庭支持系统，为调动患者遵医积极性，实现知识－态度－行为的转变打下基础。

本次调查结果发现，干预组有部分患者逐渐减量甚至撤除了所用降血糖药物，单用饮食治疗和运动治疗就可能使血糖控制在较理想的水平。

这种控制较好的效果会随时间的延长而显示出健康教育的效益，国外研究资料也已充分显示了该结果。

综上所述，糖尿病教育本身也是一种治疗［４］，患者的日常生活方式、对疾病的认识和态度、糖尿病的治疗过程，还有那种持之以恒等对糖尿病的控制都有很大的影响。

社区健康教育在慢性病的防治和教育方面一直具有贴近病人、贴近生活的优势，同时也提示社区医疗服务应加强对慢性病病人的健康教育。

作为医护工作者应该责无旁贷地推行糖尿病健康教育。

（上接第８９页）
容物，研细，精密称取约１００ｍｇ，置５０ｍｌ量瓶中，加水适量使盐酸金刚烷胺溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液１ｍｌ置１０ｍｌ量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。

４　方法学考察
４．１　线性范围：称取盐酸金刚烷胺对照品１９．８１ｍｇ置５０ｍｌ量瓶中，加水溶解并稀释至刻度作为对照品储备液，取上述溶液１．０、２．０、３．０、４．０、５．０、６．０ｍｌ至１０ｍｌ量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，制成对照品溶液。

按色谱条件进样测定，记录色谱图，以对照品浓度Ｘ（μｇ·ｍｌ－１）的常用对数（ｌｇＸ）为横坐标，色谱峰面积Ｙ的常用对数（ｌｇＹ）为纵坐标绘制标准曲线，经回归分析在（３９．６２－２３７．７２μｇ·ｍｌ－１）范围内有良好的线性关系；回归方程为：ｌｇＹ＝１．２７２９ｇＸ＋２．８０９，ｒ＝０．９９９３。

４．２　精密度试验：精密吸取同一对照品溶液１０μｌ，重复进样６次，记录色谱图，平均峰面积的对数为３．２２２９，ＲＳＤ为０．８％。

４．３　稳定性试验：精密称取盐酸金刚烷胺胶囊装量差异项下内容物细粉，按“３．２”的方法制备，分别于０、４、８、１２、１６、２０、２４ｈ测定，测得平均峰面积的对数为３．２７６１，ＲＳＤ为１．２％。

４．４　重复性试验：精密称取同一批盐酸金刚烷胺胶囊装量差异项下内容物细粉，按“３．２”的方法制备，记录色谱图，结果ＲＳＤ为１．５％。

４．５　检测限和定量限：精密量取盐酸金刚烷胺对照品溶液定量稀释，以信噪比Ｓ／Ｎ为３：１测定检测限为７．２３μｇ·ｍｌ－１。

以信噪比Ｓ／Ｎ为１０∶１测定定量限为２４．１５μｇ·ｍｌ－１。

４．６　加样回收率试验：精密称取已知含量（９７．６％）的盐酸金刚烷胺胶囊（批号：１００２０１）装量差异项下内容物细粉分别置９个５０ｍｌ量瓶中，加水适量使盐酸金刚烷胺溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液５ｍｌ，置１００ｍｌ量瓶中，加入１．０８１１ｍｇ·ｍｌ－１的对照品溶液４．０ｍｌ、５．０ｍｌ、６．０ｍｌ各３份，加水稀释至刻度，摇匀，即得加样回收样品液，按上述色谱条件测定，平均回收率为１００．２％，ＲＳＤ为１．２％。

见表１。

表１　回收率测定结果（ｎ＝９）
样品含量（μｇ）加入
（μｇ）
测得量
（μｇ）
回收率
（％）
平均值
（％）
ＲＳＤ
（％）
１．２４６２　０．８６４９　２．１１７１　１００．６９　１００．２　１．２１．４９４７　０．８６４９　２．３５２２　９９．１４
１．３０４８　０．８６４９　２．１５８１　９８．６６
１．１０７１　１．０８１１　２．２０１１　１０１．１９
１．２６２５　１．０８１１　２．３３６２　９９．３２
１．１９８８　１．０８１１　２．２７１７　９９．２４
１．０７０９　１．２９７３　２．４０４８　１０２．８２
１．２３４３　１．２９７３　２．５３３１　１００．１２
１．２６４９　１．２９７３　２．５７０３　１００．６２５　结果
取８批样品，分别用本法和《中国药典》２０１０年版方法测定，结果见表２。

表２　盐酸金刚烷胺胶囊含量测定结果比较（ｎ＝３）样品批号本法（标示量％）药典方法（标示量％）Ｙ１　０９１１０１　９９．１　９８．７
Ｙ２　０９１０１０１　９８．２　９７．５
Ｙ３　０８１０１７　９８．５　９７．７
Ｙ４　１００２０１　９７．６　９８．０
Ｙ５　１００３０１　９６．９　９７．５
Ｙ６　０１２１８１　９７．６　９６．８
Ｙ７　０９０５０１　９９．４　９８．３
Ｙ８　１００５２００　９８．３　９７．８
６　讨论
《中国药典》２０１０年版［４］中采用容量法测定含量。

实验中发现该方法取样量大，溶解比较困难。

新建立的ＨＰＬＣ－ＥＬＳＤ法取样量少、操作简便、专属性强，灵敏度高。

盐酸金刚烷胺为三环癸烷－１－胺盐酸盐，分子结构中无共扼双键，因而在紫外区无吸收，用紫外检测器测定时，存在基线漂移不稳、不宜检测等缺点。

而ＥＬＳＤ检测器是一种质量型通用检测器，其原理是应用溶质颗粒在检测器中散射从激光光源发出的光，经过光电倍增管收集来输出检测信号［５］。

用ＨＰＬＣ－ＥＬＳＤ法测定基线平稳，试验中对雾化载气流速和漂移管温度进行了优化，采用本文方法测定盐酸金刚烷胺胶囊的含量比药典方法简便准确，灵敏度高，适用于盐酸金刚烷胺胶囊的含量测定。

流动相考察，试验中分别考察了甲醇－水（４５∶５５）与（２０∶８０）、乙腈－水（４０∶６０）与（２０∶８０）、醋酸盐缓冲液等流动相系统，分离效果均不是很理想，出峰时间在２．５ｍｉｎ左右，主峰与试剂峰不能达到很好的分离，经试验最终确定乙腈－０．０６％三氟乙酸溶液（２０∶８０）为流动相，出峰在６．２ｍｉｎ左右，分离效果良好。

参考文献
［１］刘红．金刚烷胺的临床新用途［Ｊ］．天津药学，１９９６，８（３）：３２．［２］何军红，赵勇，谷祖芬．盐酸金刚烷胺胶囊含量测定方法的比较［Ｊ］，山东医药，２００２，２１（１）：１５．
［３］楼永军，李煜，李会林，等．盐酸金刚烷胺胶囊的质量标准研究［Ｊ］．中国医药工业杂志，２０１１，４２（６）：４４４－４４６．
［４］中华人民共和国药典委员会．中华人民共和国药典（二部）［Ｍ］．北京：化学工业出版社，２０１０：７３７．
［５］王巧娥，丁明玉．蒸发光散射检测技术研究进展［Ｊ］．分析测试学报，２００６，２５（６）：１２６．
１
１
１
　２０１２年第１９期。