试管动物技术

3.（2012山东卷）毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ） 基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转 KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。
（３）在过成③中，用_________处理以获取更多的卵 （母）细胞。成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行 _________处理。 （４）从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程 技术是_________。在胚胎移植前，通过_______技术 可获得较多胚胎。
1.（10海南卷）请回答胚胎工程和基因工程方面 的问题： （4）利用基因工程可以获得转基因牛，从而改良 奶牛的某些性状。基因工程的四个基本操作步骤 是＿＿＿＿＿＿＿、基因表达载体的构建、＿＿ ＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿＿。若要获得的转基 因牛分泌的乳汁中含有人干扰素，则所构建的基 因表达载体必须包括：某种牛乳腺分泌蛋白基因 及其启动子、＿＿＿＿、＿＿＿＿、＿＿＿＿和 复制原点等。将该基因表达载体导入受体细胞所 采用的方法是＿＿＿＿＿（显微注射法、农杆菌 转化法），为获得能大量产生人干扰素的转基因 牛，该基因表达载体应导入的受体细胞是＿＿＿ ＿＿（受精卵、乳腺细胞）。
试管动物
试管动物技术的三个基本操作环节：
第一步：体外受精 （1）卵母细胞的采集与培养 （2）精子的采集与获能 （3）受精 第二步：胚胎的早期培养 第三步：胚胎移植
一、体外受精技术
1.卵母细胞的采集与培养
方法1：给供体注射促性腺激素，使一头母 畜的卵巢一次排出比自然情况下多几倍到十几 倍的卵子（超数排卵），之后从输卵管中冲取 卵子，直接与获能的精子在体外受精。
2.(2015年山东）治疗性克隆对解决供体器官缺 乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义。
（1）过程①采用的是细胞工程中的 技 术，过程②采用的是胚胎工程中的 技术。 （2）体细胞进行体外培养时，所需气体主要有 O2和CO2，其中CO2的作用是维持培养液的 。
（3）如果克隆过程中需进行基因改造，在构建基因 表达载体（重组载体）时必须用 和 两种工 具酶。基因表达载体上除目的基因外，还需有 基因 ，以便选出成功导入基因表达载体的细胞。 （4）胚胎干细胞可以来自于囊胚中的 。在一 定条件下，胚胎干细胞可以分化形成不同的组织器官 。若将图中获得的组织器官移植给个体 （填 “A”或“B”），则不会发生免疫排斥反应。
3、体外受精
在获能溶液或
专用的受精溶液
中完成受精过程
二、胚胎的早期培养ห้องสมุดไป่ตู้
二、胚胎的早期培养
1、发育培养液成分 :
水、无机盐、有机盐、维生素、激素、 氨基酸、核苷酸以及动物血清等.
2、胚胎培养发育到适宜阶段时，可将其取 出向受体移植或冷冻保存。
（1）不同动物胚胎移植的时间不同 牛、羊：桑椹胚或囊胚小鼠、家兔：卵裂 期或囊胚试管婴儿：8个或16个细胞阶段 （2）胚胎冷冻保存就是将动物的早期胚胎,采 用特殊的保护剂和降温措施进行冷冻,使其 在-196℃的液氮中代谢停止或减弱到足够小 的程度,但又不失去升温后恢复代谢的能力, 从而能长期保存胚胎的一种生物技术。
3.（2012山东卷）毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ）基 因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因 的高绒质绒山羊的简单流程如图。
（１）过程①中最常用的运载工具是______，所需要 的酶是限制酶和_________。 （２）在过程②中，用_______处理将皮肤组织块分散 成单个成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维细胞置 于5%CO2的气体环境中，CO2的作用是___________。
方法2：从屠宰场得 到的废弃牛卵巢中采 集卵母细胞，在体外 培养成熟
活体卵巢中采集卵母细胞
操作员先将带有超声波探头和吸卵针的采卵器通过 生殖道插入子宫，同时将探头贴在卵巢上。根据B超 屏幕所显示的卵泡位置，利用采卵针穿刺卵泡并同 时抽吸卵母细胞。
2、精子的采集和获能
（1）采集的方法: 假阴道法、手握法、 电刺激法 （2）获能处理: 培养法：(人工配制的获能液中培养）用于啮 齿动物、家兔和猪 化学法：（一定浓度的肝素或钙离子载体 A23187 溶液中，化学药物诱导）用于牛、羊等 大型哺乳动物
世界上第一位试管婴儿于1978年7 月25日在英国的奥尔德姆市医院诞 生，她的名字叫路易丝.布朗。如 今自己也已经当上了妈妈。图为她 抱着自己的两个双胞胎孩子，这对 双胞胎也是试管婴儿。
1988年3月10 日我国首例试 管婴儿诞生
试管动物
克隆动物 转基因动物
1.（10海南卷）请回答胚胎工程和基因工程方面 的问题： （1）应用胚胎工程技术可以培育出“试管牛”。 试管牛的培育需经过体外受精、＿＿＿＿、＿＿ ＿＿＿以及在母体中发育和产出等过程。 （2）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵 母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理， 使其＿＿。另外，培养的卵母细胞需要发育至减 数第二次分裂的中期，该时期在显微镜下可观察 到次级卵母细胞和＿＿＿＿＿。 （3）通常奶牛每次排出一枚卵母细胞，采用激素 处理可使其一次排出多枚卵母细胞，常使用的激 素是＿＿＿＿＿＿＿＿＿。