酵母菌死活细胞鉴别

四、操作步骤
1、滴加一滴0.1%吕氏碱性美蓝热染液于载玻片中央，无 滴加一滴0.1%吕氏碱性美蓝热染液于载玻片中央 吕氏碱性美蓝热染液于载玻片中央， 菌操作用接种环由酵母菌培养斜面上挑取少许菌体置于染液 混合均匀；（不要过于剧烈，以免破坏细胞） ；（不要过于剧烈 中，混合均匀；（不要过于剧烈，以免破坏细胞） 2、用镊子取一块盖玻片，将盖玻片一边与菌液接触，缓慢 用镊子取一块盖玻片，将盖玻片一边与菌液接触， 将盖玻片倾斜并覆盖在菌液上；（不要产生气泡） ；（不要产生气泡 将盖玻片倾斜并覆盖在菌液上；（不要产生气泡） 3、将制片放置3min后，用低倍镜及高倍镜观察酵母菌形 将制片放置3min后 态和出芽情况，并根据细胞颜色区分死活细胞； 态和出芽情况，并根据细胞颜色区分死活细胞； 4、染色30min后再次观察，注意死活细胞比例是否发生变 染色30min后再次观察 后再次观察， 化； 5、用0.05%吕氏碱性美蓝染液作为对照同时进行上述实验。 0.05%吕氏碱性美蓝染液作为对照同时进行上述实验 吕氏碱性美蓝染液作为对照同时进行上述实验。 建议做，用等量生理盐水稀释染液即可） （建议做，用等量生理盐水稀释染液即可）
酵母出芽
三、器材
1、菌种：酵母菌2d的培养斜面或平皿； 的培养斜面或平皿； 菌种：酵母菌2d的培养斜面或平皿 2、溶液和试剂：吕氏碱性美蓝染液； 溶液和试剂：吕氏碱性美蓝染液； 3、仪器和其他用品：酒精灯，载玻片，盖玻片， 仪器和其他用品：酒精灯，载玻片，盖玻片， 显微镜，接种环，滴管等。 显微镜，接种环，滴管等。
酵母菌细胞的形态观察、 酵母菌细胞的形态观察、 死活细胞的鉴别
一、目的和要求
1、观察酵母菌细胞的形态结构； 观察酵母菌细胞的形态结构； 2、掌握鉴别酵母菌细胞死活的染色原理和 方法； 方法；

二、基本原理
1．形态观察：酵母菌是不运动的单细胞真核微生物， 形态观察：酵母菌是不运动的单细胞真核微生物， 通常比常见细胞大几倍甚至十几倍。 通常比常见细胞大几倍甚至十几倍。大多数酵母菌以出 芽方式进行无性繁殖，有的分裂繁殖； 芽方式进行无性繁殖，有的分裂繁殖；有性繁殖是通过 接合产生子囊孢子。 接合产生子囊孢子。 2．死活鉴定：美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型 死活鉴定：美蓝是一种无毒性的染料， 呈蓝色，还原型呈无色。 呈蓝色，还原型呈无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染 色时，由于细胞的新陈代谢作用， 色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还 原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。 原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。 具有还原能力的酵母活细胞是无色的，而死细胞或 具有还原能力的酵母活细胞是无色的， 代谢作用微弱的衰老细胞则成蓝色或淡蓝色。 代谢作用微弱的衰老细胞则成蓝色或淡蓝色。