醌氧化还原酶NQO1基因多态性与低出生体重的关系
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方法, 收集母亲和新生儿资料 , 采用 PCR - RFLP 法分析母亲 NQO1基因型, 采用 L og istic回归 法分析母 亲 NQO1 ( C609T ) 基因 型与新生儿出生体重 的关系。结果: 两 组 NQO 1 C609T 基因型频率观察值与期望值之间无统计学差异 ( 2 = 159, P > 0 05; 2 = 0 12, P > 0 05), 表 明 两 组 NQO1 基 因 型 频 率 分 布 符 合 H ardy - W e inberg 遗 传 平 衡 定 律。调 整 主 要 混 杂 因 素 前 后, NQ 01 ( C609T ) 突变基因型对低出生体重影响显示出显著相关 性 ( OR = 1 922, 95% CI 1 205~ 3 066, P = 0 005; OR = 4 533, 95% C I 1 732~ 11 867, P = 0 002)。结论: 母亲 NQO 1基因 多态性与低出生体重有显著相关性。
∀Abstract# O b jective: T o exp lo re the re la tionsh ip between po lymo rph ism o f qu inone ox ido reductase NQO 1 gene and low b irth w e ight of neona tes M eth ods: C ase- con tro l study was used to co llect the data ofm others and neonates, PCR - RFLP me thod was app lied to analyze NQO I geno type o f m others, log istic regression ana lys is w as used to ana ly ze the re la tionsh ip betw een NQO I ( C609T ) genotype of m others and low b irth w eigh t of neona tes Resu lts: T here w as no sign ificant difference in frequency of NQO I C609T genotype between ob serv ed va lue and expected va lue in the tw o g roups ( 2 = 159, P > 0 05; 2 = 0 12, P > 0 05), the d istr ibu tion of NQO 1 geno type in the two g roups co rresponded w ith H ardy- W e inberg law o f gene tic equ ilibrium; after ad justing the m ain confound ing facto rs, there w as a significant co rre la tion betw een genotype of NQO I ( C609T ) muta tion and low b irth w e ight (OR = 1 922, 95% C I 1 205 ~ 3 066, P = 0 005; OR = 4 533, 95% CI 1 732~ 11 867, P = 0 002) Conclusion: T here is sign ificant correlation between po lym orphism of NQO 1 gene and low b irth w eigh t
2 结果 2 1 一般特征 调 查研 究对 象包括 108名 对照 组和 57名 病 例组孕妇和她 们的 新生儿 。病例 组和 对照 组母 亲收 缩压、 舒 张压、心率、 月经 初潮 年龄、分 娩孕 周、睡 眠时 间和 新生 儿 体重存在统计学 差异 ( P < 0 05), 而 母亲身 高、体 重比较 差 异均无统计学意义 ( P > 0 05) 。见表 1。
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中国妇幼保健 2011 年第 26卷
AAGCCCAGA CCAACTTCT - 3) , 下游引物: 5 -' G CGTTTCTTC CAT CCTTC - 3) , 反 应 体 系 12 5 :l 10 + Buffer ( M g2+ 15 mm o l/L ) 1 25 ,l dNT P ( 0 2 mm o l/L ) 0 25 ,l 上 游 引 物 ( 5 mo l/L ) 0 1 ,l 下游 引 物 ( 5 mo l/L ) 0 1 ,l 基因 组 DNA 2 0 ,l T aq DNA 聚合酶 ( 2 U / l) 0 5 ,l 灭菌双 蒸水 8 3 l。反应条件为 94 ( 5 m in, 94( 30 s, 56( 30 s, 72( 45 s, 扩增 35个 循环, 最 后 72( 延 伸 10 m in。 PCR 产 物 195 bp。 PCR 产物酶切: H infI 37( 消化 过夜, 酶 切体 系为 20 ,l 反应条件为 37( 水浴 6 h。最后进行 2% 琼脂糖凝胶电泳。 1 2 5 基 因 分型 结 果 判 定 CC 基 因 型 (野 生 型 纯 合子 ): 195 bp; CT 基因型 (突 变型杂 合子 ) : 195 bp, 119bp, 76bp; TT 基因型 (突变型纯合子 ): 119 bp, 76 bp。 1 3 统 计 学分 析 根 据 等 位基 因 的 频 率, 采 用 2 检 验 对 NQO 1基因型分布进行遗传平 衡检验。 用 SPSS 11 0 统计软 件 进行统计分析。用 L og istic回 归法分 析母亲 基因型 NQO 1与 新 生儿出生体重的关系 , 并调整 主要混杂因素。
李 静等 醌氧化还原酶 NQO 1基因多态性与低出生体重的关系 第 5期
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醌氧化还原酶 NQO1基因多态性与低出生体重的关系
李 静 吴 涤 杨艳芳 杨国安! 包头医学院第一附属医院血液科 (内蒙古 包头 ) 014010
中国图书分类号 R394 文献标识码 A 文章编号 1001 4411 ( 2011) 05 0735 03 ∃摘 要 % ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ的: 探讨醌氧化还 原酶 NQO 1 ( C609T ) 基因多态性与新生儿低出生体 重的关系。方 法: 采用病例 对照研究
∀K ey words# Q uinone ox idoreduc tase; G ene po lymo rph ism; Low birth w e ight
低出生体重是新 生儿死亡的主要因 素之一, 中 国低出生 体 重儿发生率占活 产婴儿 的 5 87% ∀1#。低出 生体 重的 发生存 在 很大的个体差异, 但对导致这些差 异的因 素了解 甚少。许多 环 境因素被证明与低出 生体重有关, 但 这些环 境因素 仅能解释 极 小的一部分差 异。各种 预防 措施 (包括 对孕 妇的社 会支 持、产 前保健、健康教育 )的应用收效甚 微 ∀2#。大 量证据表 明, 低 出生 体重的发生是由遗传 和环境因素共同作用 的结果。 NQO1 即醌 氧化还原酶, 又称 D - 硫锌酰胺脱氢酶, 亦是体内一种重要的 & 相反应酶。 NQO 1以 NAD ( P) H 为受体, 可将 NADH 或 NADPH 的电子传递给醌 类化合 物, 发生 双电 子氧 化还 原反 应, 生成 低 毒的氢醌类化合 物, 避免了 对细 胞的 损伤, 降 低具 有致 癌性 和 致畸性的醌类化合物 的危害 ∀3#。由 于醌在烟 草烟雾、汽车废 气 等室内外污染物中广 泛存在, 很可能 与孕妇 的低出 生体重发 生 有密切关系, 而 NQO1的活性 与人体 内醌类 化合物 的代谢紧 密 相关。因此, 该研究采用病例对照研究方法, 探讨母亲 NQO 1基 因多态性与低出生体 重的相关性。
包头医药卫生基金项目 ∀2004G 2322- 10# 通讯作者: 包头医学院生物与细胞生物学教研室 ! 包头医学院第一附属医院中心实验室
1 对象与方法 1 1 研究对象 采用临床流行病学调 查方法, 调查 包钢第三 医院 2003~ 2006年部分 孕妇及 其新生 儿。低出生 体重儿 的入 选标准: 孕周 > 28周 , 体重 < 2 500 g; 正 常分 娩, 剔除 意外情况引起 的早 产 儿; ! 剔 除 双 胎 或多 胎、 先天 畸 形 儿。 正常对照儿入选标准: 选 择同 一医 院出生 的孕 周 ∋ 28周、体 重 ∋ 2 500 g、出生时间相差 < 7天、单胎正常活 产婴儿。通过 调查共得到 165对母亲 - 新 生儿 的流 行病 学资 料及 母亲 的静 脉血标本。
表 1 研究对象一般特征
一般状况
母亲 身高 ( cm ) 体重 ( kg) 收缩压 ( mmH g) 舒张压 ( mmH g) 心率 (次 /m in ) 月经首龄 (岁 ) 分娩孕周 睡眠时间 ( h)
新生儿出生体重 ( g)
对照组
n
(x , s)
病例组 n ( x , s)
P值
106 160 9 , 4 0 51 159 8 , 4 9 0 118 106 56 4 , 7 7 51 54 3 , 7 6 0 112 105 118 7 , 9 3 50 128 1 , 15 3 0 001 105 79 2 , 6 6 50 83 5, 10 4 0 002 104 75 8 , 2 94 50 80 4 , 4 4 0 001 108 14 1 , 1 75 54 14 9 , 2 4 0 011 91 39 9 , 1 8 54 38 4 , 4 1 0 002 108 8 4 , 0 8 57 7 0, 1 0 0 003 108 3 373 6 , 524 5 57 2 236 5 , 274 6 0 001
∃关键词 % 醌氧化还原酶 基因多态性 低出生体重
R elationship between polym orphism of quinone oxidoreductase NQO1 gene and low birth weight
LI J ing, WU D i, YANG Yan - F ang et al D epartm ent of H em atology, theF irst Aff iliated H osp ital of Bao touM edical C ol lege, B aotou 014010, Inner M ongolia, Ch ina
1 2 调查方法 1 2 1 问卷调查 采用统一问 卷调查表, 由 经培训的 调查员 对每个孕妇进行 逐一 询问, 获 得详 细人 口统 计学 资料, 包括 一般情况、 病史、健 康状 况、职 业史、吸 烟 饮酒 史、饮 食习 惯、月经和生育史、生活居住环境情况等。
1 2 2 新生儿调查 根据产房病 例记录了解 新生儿出 生时状 况, 包括孕周、新生儿性别、出生体重等。 1 2 3 血样收集及 DNA 提取 用 EDTA 抗凝管经无菌操作取 母亲外 周 血 2 m ,l 4( 保 存, 24 h 内 按 标 准 法 提 取 基 因 组 DNA。 1 2 4 基因型检测 NQO 1 ( C6O 9T ) 扩增 上游引 物: 5) -
2 2 NQO 1基因型频率及 遗传平 衡检验 对病 例组 和对照 组 NQO 1 C609T 基因型频率进行了遗 传平衡检 验, 两组的基因 型 频率观察值和期望值 之间无统计学差异 ( 2 = 1 59, P > 0 05; 2 = 0 12, P > 0 05), 表明病例组 和对照组的 NQO 1基因 型频 率符合 H ardy- W e inberg遗传平衡定律。 2 3 NQO 1基因型分析 结果 2 检验结 果 NQO 1各 基因型 在 对照组和病例组的分 布存在差异, 有统计学意义 ( 2 = 11 60, P < 0 01) 。见表 2。
∀Abstract# O b jective: T o exp lo re the re la tionsh ip between po lymo rph ism o f qu inone ox ido reductase NQO 1 gene and low b irth w e ight of neona tes M eth ods: C ase- con tro l study was used to co llect the data ofm others and neonates, PCR - RFLP me thod was app lied to analyze NQO I geno type o f m others, log istic regression ana lys is w as used to ana ly ze the re la tionsh ip betw een NQO I ( C609T ) genotype of m others and low b irth w eigh t of neona tes Resu lts: T here w as no sign ificant difference in frequency of NQO I C609T genotype between ob serv ed va lue and expected va lue in the tw o g roups ( 2 = 159, P > 0 05; 2 = 0 12, P > 0 05), the d istr ibu tion of NQO 1 geno type in the two g roups co rresponded w ith H ardy- W e inberg law o f gene tic equ ilibrium; after ad justing the m ain confound ing facto rs, there w as a significant co rre la tion betw een genotype of NQO I ( C609T ) muta tion and low b irth w e ight (OR = 1 922, 95% C I 1 205 ~ 3 066, P = 0 005; OR = 4 533, 95% CI 1 732~ 11 867, P = 0 002) Conclusion: T here is sign ificant correlation between po lym orphism of NQO 1 gene and low b irth w eigh t
2 结果 2 1 一般特征 调 查研 究对 象包括 108名 对照 组和 57名 病 例组孕妇和她 们的 新生儿 。病例 组和 对照 组母 亲收 缩压、 舒 张压、心率、 月经 初潮 年龄、分 娩孕 周、睡 眠时 间和 新生 儿 体重存在统计学 差异 ( P < 0 05), 而 母亲身 高、体 重比较 差 异均无统计学意义 ( P > 0 05) 。见表 1。
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中国妇幼保健 2011 年第 26卷
AAGCCCAGA CCAACTTCT - 3) , 下游引物: 5 -' G CGTTTCTTC CAT CCTTC - 3) , 反 应 体 系 12 5 :l 10 + Buffer ( M g2+ 15 mm o l/L ) 1 25 ,l dNT P ( 0 2 mm o l/L ) 0 25 ,l 上 游 引 物 ( 5 mo l/L ) 0 1 ,l 下游 引 物 ( 5 mo l/L ) 0 1 ,l 基因 组 DNA 2 0 ,l T aq DNA 聚合酶 ( 2 U / l) 0 5 ,l 灭菌双 蒸水 8 3 l。反应条件为 94 ( 5 m in, 94( 30 s, 56( 30 s, 72( 45 s, 扩增 35个 循环, 最 后 72( 延 伸 10 m in。 PCR 产 物 195 bp。 PCR 产物酶切: H infI 37( 消化 过夜, 酶 切体 系为 20 ,l 反应条件为 37( 水浴 6 h。最后进行 2% 琼脂糖凝胶电泳。 1 2 5 基 因 分型 结 果 判 定 CC 基 因 型 (野 生 型 纯 合子 ): 195 bp; CT 基因型 (突 变型杂 合子 ) : 195 bp, 119bp, 76bp; TT 基因型 (突变型纯合子 ): 119 bp, 76 bp。 1 3 统 计 学分 析 根 据 等 位基 因 的 频 率, 采 用 2 检 验 对 NQO 1基因型分布进行遗传平 衡检验。 用 SPSS 11 0 统计软 件 进行统计分析。用 L og istic回 归法分 析母亲 基因型 NQO 1与 新 生儿出生体重的关系 , 并调整 主要混杂因素。
李 静等 醌氧化还原酶 NQO 1基因多态性与低出生体重的关系 第 5期
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醌氧化还原酶 NQO1基因多态性与低出生体重的关系
李 静 吴 涤 杨艳芳 杨国安! 包头医学院第一附属医院血液科 (内蒙古 包头 ) 014010
中国图书分类号 R394 文献标识码 A 文章编号 1001 4411 ( 2011) 05 0735 03 ∃摘 要 % ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ的: 探讨醌氧化还 原酶 NQO 1 ( C609T ) 基因多态性与新生儿低出生体 重的关系。方 法: 采用病例 对照研究
∀K ey words# Q uinone ox idoreduc tase; G ene po lymo rph ism; Low birth w e ight
低出生体重是新 生儿死亡的主要因 素之一, 中 国低出生 体 重儿发生率占活 产婴儿 的 5 87% ∀1#。低出 生体 重的 发生存 在 很大的个体差异, 但对导致这些差 异的因 素了解 甚少。许多 环 境因素被证明与低出 生体重有关, 但 这些环 境因素 仅能解释 极 小的一部分差 异。各种 预防 措施 (包括 对孕 妇的社 会支 持、产 前保健、健康教育 )的应用收效甚 微 ∀2#。大 量证据表 明, 低 出生 体重的发生是由遗传 和环境因素共同作用 的结果。 NQO1 即醌 氧化还原酶, 又称 D - 硫锌酰胺脱氢酶, 亦是体内一种重要的 & 相反应酶。 NQO 1以 NAD ( P) H 为受体, 可将 NADH 或 NADPH 的电子传递给醌 类化合 物, 发生 双电 子氧 化还 原反 应, 生成 低 毒的氢醌类化合 物, 避免了 对细 胞的 损伤, 降 低具 有致 癌性 和 致畸性的醌类化合物 的危害 ∀3#。由 于醌在烟 草烟雾、汽车废 气 等室内外污染物中广 泛存在, 很可能 与孕妇 的低出 生体重发 生 有密切关系, 而 NQO1的活性 与人体 内醌类 化合物 的代谢紧 密 相关。因此, 该研究采用病例对照研究方法, 探讨母亲 NQO 1基 因多态性与低出生体 重的相关性。
包头医药卫生基金项目 ∀2004G 2322- 10# 通讯作者: 包头医学院生物与细胞生物学教研室 ! 包头医学院第一附属医院中心实验室
1 对象与方法 1 1 研究对象 采用临床流行病学调 查方法, 调查 包钢第三 医院 2003~ 2006年部分 孕妇及 其新生 儿。低出生 体重儿 的入 选标准: 孕周 > 28周 , 体重 < 2 500 g; 正 常分 娩, 剔除 意外情况引起 的早 产 儿; ! 剔 除 双 胎 或多 胎、 先天 畸 形 儿。 正常对照儿入选标准: 选 择同 一医 院出生 的孕 周 ∋ 28周、体 重 ∋ 2 500 g、出生时间相差 < 7天、单胎正常活 产婴儿。通过 调查共得到 165对母亲 - 新 生儿 的流 行病 学资 料及 母亲 的静 脉血标本。
表 1 研究对象一般特征
一般状况
母亲 身高 ( cm ) 体重 ( kg) 收缩压 ( mmH g) 舒张压 ( mmH g) 心率 (次 /m in ) 月经首龄 (岁 ) 分娩孕周 睡眠时间 ( h)
新生儿出生体重 ( g)
对照组
n
(x , s)
病例组 n ( x , s)
P值
106 160 9 , 4 0 51 159 8 , 4 9 0 118 106 56 4 , 7 7 51 54 3 , 7 6 0 112 105 118 7 , 9 3 50 128 1 , 15 3 0 001 105 79 2 , 6 6 50 83 5, 10 4 0 002 104 75 8 , 2 94 50 80 4 , 4 4 0 001 108 14 1 , 1 75 54 14 9 , 2 4 0 011 91 39 9 , 1 8 54 38 4 , 4 1 0 002 108 8 4 , 0 8 57 7 0, 1 0 0 003 108 3 373 6 , 524 5 57 2 236 5 , 274 6 0 001
∃关键词 % 醌氧化还原酶 基因多态性 低出生体重
R elationship between polym orphism of quinone oxidoreductase NQO1 gene and low birth weight
LI J ing, WU D i, YANG Yan - F ang et al D epartm ent of H em atology, theF irst Aff iliated H osp ital of Bao touM edical C ol lege, B aotou 014010, Inner M ongolia, Ch ina
1 2 调查方法 1 2 1 问卷调查 采用统一问 卷调查表, 由 经培训的 调查员 对每个孕妇进行 逐一 询问, 获 得详 细人 口统 计学 资料, 包括 一般情况、 病史、健 康状 况、职 业史、吸 烟 饮酒 史、饮 食习 惯、月经和生育史、生活居住环境情况等。
1 2 2 新生儿调查 根据产房病 例记录了解 新生儿出 生时状 况, 包括孕周、新生儿性别、出生体重等。 1 2 3 血样收集及 DNA 提取 用 EDTA 抗凝管经无菌操作取 母亲外 周 血 2 m ,l 4( 保 存, 24 h 内 按 标 准 法 提 取 基 因 组 DNA。 1 2 4 基因型检测 NQO 1 ( C6O 9T ) 扩增 上游引 物: 5) -
2 2 NQO 1基因型频率及 遗传平 衡检验 对病 例组 和对照 组 NQO 1 C609T 基因型频率进行了遗 传平衡检 验, 两组的基因 型 频率观察值和期望值 之间无统计学差异 ( 2 = 1 59, P > 0 05; 2 = 0 12, P > 0 05), 表明病例组 和对照组的 NQO 1基因 型频 率符合 H ardy- W e inberg遗传平衡定律。 2 3 NQO 1基因型分析 结果 2 检验结 果 NQO 1各 基因型 在 对照组和病例组的分 布存在差异, 有统计学意义 ( 2 = 11 60, P < 0 01) 。见表 2。