皮肤鳞癌组织中MMP

皮肤鳞癌组织中MMP

【关键词】皮肤肿瘤；免疫组织化学；明胶酶B；抗原CD34；微血管密度Expression of MMP9 in skin squamous cell carcinoma and its significance in microangiogenesis

【Abstract】 AIM: To detect the role and the significance of MMP9 in microangiogenesis in skin squamous cell carcinoma (SCC) and to observe the relation between the expression of MMP9 and microvessel density (MVD) in SCC. METHODS： Immunohistochemical SP staining was used to examine MMP9 expression and the change of MVD under light microscope in 45 cases of SCC, 19 cases of Bowen disease, and 10 cases of normal skin. RESULTS：The expression of MMP9 in SCC group was significantly higher than that in Bowen disease group（P<）, while the latter was also significantly higher than that in normal skin group（P=， P<）. The level of MVD in SCC group was significantly higher than that in Bowen disease group （P<）, and the latter was significantly higher than that in normal skin group（P<）. CONCLUSION： MMP9 is highly expressed in SCC, and may be one of important factors in angiogenesis of SCC.

【Keywords】 skin neoplasms; carcinoma, squamous

cell immunohistochemistry; gelatinase B; antigens, CD34; microvessel density

【摘要】目的：探讨皮肤鳞状细胞癌（SCC）发生发展过程中基质金属蛋白酶9（MMP9）对微血管生成的意义. 方法： SCC45例, Bowen病19例、正常皮肤10例进行CD34,MMP9免疫组化染色. 检测 MMP9的表达和微血管密度（MVD）的变化，分析MMP9的表达与MVD之间，及它们与SCC临床病理特征之间的关系. 结果：在SCC 组中MMP9表达高于Bowen病组（P<）, Bowen病组中MMP9 表达高于正常皮肤组（P=, P<）. 在SCC 组中MVD值高于Bowen病组(P<)，Bowen

病组中MVD值高于正常皮肤组（P<）. 结论：MMP9可能是SCC促进微血管生成因子之一，与SCC的侵袭性相关.

【关键词】皮肤肿瘤；免疫组织化学；明胶酶B；抗原CD34；微血管密度0引言

癌细胞侵袭和转移能力与其诱导产生蛋白酶降解细胞外基质（ ECM），基底膜（BM）的能力密切相关. 基质金属蛋白酶（MMP）是其中最为重要的一组蛋白

酶，研究表明［1-2］，MMP 对肿瘤的侵袭和转移起重要的作用. Guttman 等［1］研究表明MMPs在肿瘤血管生成中也有重要作用. 明胶酶是MMPs的一个亚类，包括基质金属蛋白酶2（MMP2）和基质金属蛋白酶9（MMP9），近年MMP9 与肿瘤血管生成的关系逐渐被重视. MMP9 不仅是降解基底膜和ECM的关键酶，而且在肿瘤间质血管生成中起重要作用. 在皮肤鳞癌中，有关 MMP9 的研究报道很少，其结果也不完全一致. 我们通过免疫组织化学技术检测Bowen病(BD)，鳞状细胞癌（squamous cell carcinoma, SCC）组织中MMP9 和CD34 的表达，并对MMP9 的表达与微血管密度（MVD）做定量分析，探讨皮肤鳞状细胞癌、Bowen病、基底

细胞癌组织中MMP9 对血管生成的作用及其临床意义.

1材料和方法

材料石蜡包埋组织标本选自西安交通大学第二附属医院199901/20XX05病理确诊手术患者. SCC45 例，年龄45～95(平均)岁，男27例，女18例. Bowen 病19例，年龄45～87(平均)岁，男12例，女7例. 正常人皮肤10例对照，年龄46～78（平均）岁，男5例，女5例作鼠抗人MMP9 mAb（MAB0245）和CD34 mAb （(MAB0034)，免疫组化SP 试剂盒(KIT9710)及DAB试剂盒均购自福州迈新生物技术有限公司.

方法所有组织均经40 g/L甲醛液固定，常规石蜡包埋切片，连续切片5张，厚约4 μm. 采用SP 法，免疫组化染色程序按试剂盒说明书进行. 阳性对照采用自身对照,用PBS 代替一抗和二抗进行阴性对照. MMP9和CD34 均采用高温高压抗原修复.

MMP9结果判定：在不知任何背景资料的情形下,采用双盲法进行判定,以肿瘤细胞膜和/或细胞质出现淡棕黄色颗粒为阳性，并按着色强弱分级：无色为0，浅

黄色为1，深黄色为2，棕黄色为3；着色范围以在10×40高倍镜下随机选区5个视野（每个视野记数100个细胞）计数阳性细胞所占的百分数均值：＜25%为1, 25%~49%为2，50 %为3. 上述两项相加为MMP9的表达强度积分：＜2为阴性，＜3为弱阳性（+），3~4为阳性（），＞4为强阳性（）. MVD 计数参照文献［3-4］方法进行微血管计数，先在低倍镜（×100）下观察确定血管密度最高处，在（×200）视野下选择3个高血管密度区，计算单位视野（×200）平均血管数. 单个内皮细胞或内皮细胞簇，均作为一个血管计数，而直径大于约8个红细胞的血管，有较厚肌层的血管以及硬化区的血管不在计数范围内.

统计学处理: 采用SPSS 统计软件包进行处理,根据资料类型组间比较

分别采用方差分析和χ2检验，P<为有统计学意义.