维生素 C 注射剂稳定性考察

实训一 维生素 C 注射剂稳定性考察

目的

1．掌握应用恒温加速试验法测定维生素C 注射液有效期的方法。 2．了解应用化学动力学方法预测注射剂稳定性的原理。 内容 应用恒温加速试验法测定维生素C 注射液有效期。 原理

在研究制剂的稳定性以确定其有效期（或贮存期）时，室温留样考察法虽结果可靠，但所需时间较长（一般考察 2~3 年），而加速试验法（如恒温加速试验法等）可在较短时间内，对有效期或贮存期作出初步的估计。

维生素C 的氧化降解反应，已由实验证明为一级反应，以lgCr 对t 作图呈一直线关系，由直线斜率求出反应速度常数K ；再利用Arrhenius 公式，以lgK 对1/T 作图呈一直线，将直线外推至25℃时的lgK 值，求得K 25℃；最后求出 25℃时的t 0.9，即为该药的贮存期。

影响维生素C 溶液稳定性的因素，主要有空气中的氧、pH 值、金属离子、温度及光线等。维生素C 的不稳定主要表现在放置过程中颜色变黄和含量下降。 中国药典规定，对于维生素C 注射液应检查颜色，照分光光度法在420nm 处测定，吸收度不得超过0.06。维生素C 的含量测定采用碘量法，主要利用维生素的还原性，可与碘液定量反应，反应式如下：

OH

O

O

HO H

OH

OH

+

I 2

HI

2

步骤

1．仪器、设备

酸式滴定管（25ml ）、移液管（1ml ）、锥形瓶（250ml ）、烧杯（100ml ）、洗瓶（500ml ）、恒温水浴箱、冰箱（200立升）、铁架。

2．药品

维生素 C 注射剂（5ml ）、碘液（0.1mol/L ）、丙酮、稀醋酸、淀粉指示剂。 3．操作步骤 （1）稳定性加速试验

①实验温度及取样时间 将同一批号的维生素C 注射剂样品分别置4个不同温度（70℃、80℃、90℃、100℃）的恒温水浴箱中，间隔一定时间（70℃间隔24小时，80℃间隔12小时，90℃间隔6小时，100℃间隔3小时）取样，每个温度的间隔取样数均为4 。样品取出后，应立即使之冷却或置冰箱保存，然后分别测定样中剩余维生素C 的含量。

②实验方法 将同一批号的维生素C 注射液用纱布包好分别置不同温度的恒温水浴中。待注射液温度升至水浴温度时，立即取样（作为零时间样品）并开始计时。然后，按规定间隔时间取样，每次取5支安瓿用冰浴冷却后立即测定或冷却后置冰箱保温待测。

（2）维生素 C 含量测定方法

将每次取样的5支安瓿内的维生素C 注射液混合均匀，精密量取1ml ，置100ml 碘量瓶中，加蒸馏水15ml ，丙酮2ml ，摇匀，放置分钟，加稀醋酸4ml 与淀粉指示液1ml ，用0.1mol/L 碘液滴定至溶液显蓝色并持续30秒不褪（每1ml0.1mol/L 的碘液相当于8.806mg 的维生素C ）。将每次测定消耗碘液的毫升数α记录于表11-2中

（3）原始记录与计算

将各个试验温度下按规定时间所取样品消耗碘液量，记录于表1中，将零时间样品所消耗碘液的毫升数（即初始浓度α0）作为100%相对浓度，各时间所取样品消耗碘液的毫升数α与其相比，得到各自的相对浓度Cr （%）。Cr （%）值计算如下：

%100(%)0

⨯=

αα

r c （4）速率常数的求解

①将各实验温度的lgC r 对t 作图。

②根据一级反应公式lgC r =（-K/2.303）t + lgC 0，以lgC r 对t 作图，由直线的斜率求出各实验温度下的反应速率常数Kr ，记录入表2中。

（5）室温下有效期的预测 ①求室温下的反应速度常数K 25℃

将求得的各试验温度下的K值与其绝对温度记录于表2中。并Arrhenius

公式：lgK=(-Ea/2.303R)* 1/T+lgA，以lgK对1/T作图，得一直线，从直线外

推至25℃时的lgK，求出室温下的反应速度常数K25

℃。

②求室温贮存期t09

按公式t0.9=0.1054/K计算出维生素C注射液在室温（25℃）时的贮存期。

提示

1．验中所用维生素C注射液应使用同一批号。为了使有效期预测结果的准确性提高，试验温度至少应取4个，取样间隔时间要依试验温度高低来考虑，低温时取样间隔时间较长；温度高时取样间隔时间较短，取样点以4~5次为宜。

2．测定维生素C含量所用的碘液，如果前后一致（即同一瓶碘液），则碘液的浓度不必精确标定；否则碘液的浓度必须精确标定。如碘液浓度一致，维生素C注射液含量也可不必计算，只比较各次消耗的碘液毫升数即可。

3．在维生素C含量测定过程中，加丙酮的是消除维生素C注射液中其他强还原性成分对维生素C含量的影响。因为维生素C易氧化，为了避免氧化反应的发生，加亚硫酸氢钠作为抗氧剂，而亚硫酸氢钠的还原性比烯二醇基更强，必定首先与碘发生反应而消耗碘液，从而影响维生素C的含量测定。而丙酮能与亚硫酸氢钠起反应，从而可避免这一作用的发生。

4．在含量测定时，维生素C分子中的烯二醇基具还原性，特别是在碱性条件下，在空气中及易氧化，故在测定维生素C含量时可加入一定量的醋酸，使保持一定的酸性，从而减少维生素C受碘以外其他氧化剂的影响。

5．加速实验过程中要注意安全，防止水浴锅烧干及爆破伤人。样品较多，编号不要弄错。

6．加速实验后测定样品含量时，应将5只安瓶中注射液混匀（所用容器要干燥）后，取样测定。

思考

1．恒温加速实验法的理论依据是什么？如何设计实验？应注意的问题有

哪些？

2．药物制剂的实际有效期应如何确定？

实训报告

1．原始记录与计算

表1 原始数据

2．各实验温度下的反应速率常数

表2 各实验温度下的反应速率常数

3．室温下有效期的预测