现代化学分析方法(仅供参考)

SEM 和TEM 统称为电子显微镜

扫描电镜测试样品表面形貌，而透射电镜测试内部形貌观察，或者晶体结构分析，特别是微区（微米、纳米）的像观察和结构分析

SEM不能做磁性材料，TEM得是液态样品

显微镜放大倍数受所用波长限制。电子显微镜使用电子作为光束来观察物体内部或表面的结构。普通光学显微镜是用可见光来观察物体的。由于电子的波长远小于可见光的波长，所以前者的极限分辨率远高于后者的极限分辨率。

“Collect”栏设定扫描次数一般是设置16或者32都可以，多扫几次为了准确一点，一般没啥关系

为什么减小激光器的功率可以减弱荧光对拉曼散射的干扰？

减小激光功率，被激发的分子少了，产生的荧光跃迁自然就少了

产生荧光所需要的激发能量高，产生拉曼所需的激发能量低，所以降低激光功率对荧光影响更大

荧光对拉曼干扰问题

在拉曼光谱中，通常斯托克斯线的强度大于反斯托克斯线，一般我们选用斯托克斯线部分。但荧光会严重干扰斯托克斯线而不干扰反斯托克斯线，对能产生荧光的试样只能损失灵敏度选反斯托克斯线。

室温时处于基态振动能级的分子很少，Anti-stocke线也远少于stocks线。温度升高，反斯托克斯线增加。从由光学介质和荧光组成的系统来看，Stokes过程和反Stokes过程都是熵不断增大的过程。虽然在反斯托克斯荧光制冷过程中光学介质的熵要减小．但由荧光带走的熵更大。介质中熵的变化△SM是一个很重要的量。正是由于熵的符号决定了在反斯托克斯过程中不可能产生激光。

相关内容还是要掌握的，比如什么是stocks和anti-stocks等

什么类型的数据属于二维数据?

荧光分光光度计的比色皿为什么需要四面透光

如果在一条直线上那是测吸光度的

荧光分光光度计入射光源和检测器的方向是垂直的这样在垂直方向上就不可

能有入射光

而激发的荧光在四个方向上都有在垂直方向上检测干扰最小所以四面透光

荧光光谱适用低温，是为了增加驰豫作用，提高灵敏度。那么原子吸收光谱分析中火焰原子化法，为什么要尽量采用低温火焰，不是只要保证待测元素充分离解吗？这其中是什么原因啊?

因为温度较低时，激发态上的原子数与基态原子数相比非常小，故可用基态原子数代表待测元素的原子数，而原子数与被测元素的浓度成正比，这是原子吸收光谱法的定量基础。尽管火焰温度越高越有利于离子的原子化，但同时高温产生的热激发态原子增多，这对定量是不利的。所以要尽量采用低温火焰，使基态原子的激发依赖于对光的吸收。

今天做了拉曼实验，到底拉曼用来测物质的什么啊？我知道红外是用测基团，物质的结构。拉曼也是是吗？

是物质结构，可以看肖老师课件的第27页。

（1）红外和拉曼都是振动光谱，从这一点上面来说，原理是一样的。但是红外是吸收光谱，而拉曼是散射光谱。

（2）至于波长，拉曼采用的是激光作为激发源，波长范围可以从紫外-可见-红外都可以，最常见的是可见光和NIR的。而红外只能选择红外光作为光源，包括从远红外到近红外，平时最常用的是中红外，4000cm-1到400cm-1。

（3）从选择法则上面来说，也就是什么样的振动是红外活性的，什么样的振动是拉曼活性的，也是不一样的。红外活性（也就是可以被红外检测到的振动）必须是分子偶极矩发生变化，而拉曼活性的振动必须是有分子的极化性发生改变才能被检测到。

（4）从信号强度来说，拉曼的信号很弱，通常10的6次方 ~ 8次方才有一个拉曼散射的光子。而相对来说，红外的信号要强！所以在实际应用中，红外更广泛一些！

（5）两者的光谱可以作为互补来确定分子的结构！

拉曼和红外他们的特征峰都很强，其中拉曼主要是测共价键的物质，而红外则是测OH基团等。通过这点可以考证你所测的物质用哪种方法会更好。

拉曼还有一点是会受荧光干扰，天然的提取物荧光干扰很大，用拉曼的效果会很差。

拉曼光谱分析技术是以拉曼效应为基础建立起来的分子结构表征技术,其信号来源与分子的振动和转动。拉曼光谱的分析方向有：

定性分析：不同的物质具有不同的特征光谱，因此可以通过光谱进行定性分析。结构分析：对光谱谱带的分析,又是进行物质结构分析的基础。

定量分析：根据物质对光谱的吸光度的特点,可以对物质的量有很好的分析能力。

除了原理上的区别外，二者的光源不同，红外需要能量较小的光源，常见的是能斯特灯，碳化硅棒及白炽线圈；拉曼则用光源一般采用能量集中、功率密度高的激光。二者检测器也有区别，红外检测器有热检测器、热电检测器和光电导检测器等检测器，拉曼检测器用光电倍增管检测器、半导体阵检测器或多通道的电荷藕合器件。用拉曼光谱分析时，样品不需前处理。而用红外光谱分析样品时，样品要经过前处理，液体样品常用液膜法和液体样品常用液膜法，固体样品可用调糊法，高分子化合物常用薄膜法，体样品的测定可使用窗板间隔为2.5-10 cm 的大容量气体池；另外，红外光谱主要反映分子的官能团，而拉曼光谱主要反映分子的骨架主要用于分析生物大分子；拉曼光谱和红外光谱可以互相补充，对于具有对称中心的分子来说，具有一互斥规则：与对称中心有对称关系的振动，红外不可见，拉曼可见；与对称中心无对称关系的振动，红外可见，拉曼不可见。小结红外和拉曼光谱法是很重要的分析方法，它们即有共同点又有区别，它们可以相互补充，都广泛用于测定化合物的结构以及定性分析。

红外光谱测试时候的样品制备方法

(1) 固体样品的制备

a.压片法:

b.糊状法:

(2) 液体样品的制备

a.液膜法

b.液体吸收池法

c.样品滴入压好的Kbr薄片上测试

(3)气态样品的制备:气态样品一般都灌注于气体池内进行测试。

(4)特殊样品的制备—薄膜法:

a. 熔融法: 对熔点低，在熔融时不发生分解、升华和其它化学变化的物质，用熔融法制备。可将样品直接用红外灯或电吹风加热熔融后涂制成膜。

b.热压成膜法: 对于某些聚合物可把它们放在两块具有抛光面的金属块间加热，样品熔融后立即用油压机加压，冷却后揭下薄膜夹在夹具中直接测试。

c.溶液制膜法: 将试样溶解在低沸点的易挥发溶剂中，涂在盐片上，待溶剂挥发后成膜来测定。如果溶剂和样品不溶于水，使它们在水面上成膜也是可行的。比水重的溶剂在汞表面成膜。

5.奶粉、牛奶中三聚氰胺所规定的上限是多少？国家的GB是什么方法？

分子结构

化学式（分子式） C3H6N6

相对分子质量 126.15

答：人群每天耐受摄入量为0.63毫克／公斤。GB为中华人民共和国强制性国家标准，由国家标准化管理委员会执行，是原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法。关于牛奶、奶粉三聚氰胺国家标准：

婴幼儿配方乳粉中三聚氰胺的限量值为1mg/kg，高于1mg/kg的产品一律不得销售；液态奶（包括原料乳）、奶粉、其他配方乳粉中三聚氰胺的限量值为2.5mg/kg，高于2.5mg/kg的产品一律不得销售；含乳15％以上的其他食品中三聚氰胺的限量值为2.5mg/kg，高于2.5mg/kg的产品一律不得销售。

《原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》GB/T22388-2008

标准规定了高效液相色谱法、气相色谱-质谱联用法、液相色谱-质谱/质谱法三种方法为三聚氰胺的检测方法，检测定量限分别为2毫克/千克、0.05毫克/千克和0.01毫克/千克。标准适用于原料乳、乳制品以及含乳制品中三聚氰胺的定量测定。检测时，根据被检测对象与其限量值的规定，选用与其相适应的检测方法。

三聚氰胺的检测方法

GB/T 22388—2008包括三个方法：第一法高效液相色谱法，第二法液相色谱-质谱/质谱法，第三法气相色谱-质谱联用法，检测时，应根据检测对象及其限量的规定，选用与其相适应的检测方法。

1、HPLC法：

原理:试样用三氯乙酸溶液-乙腈提取，经阳离子交换固相萃取柱（基质为苯磺酸化的聚苯乙烯-二乙烯基苯高聚物）净化后，用高效液相色谱测定，外标法测定。pH 为3.0柠檬酸和辛烷磺酸钠离子对试剂缓冲液。色谱柱：C8柱

2、LC-MS/MS法：