现代分析技术在药物分析中的研究与应用

现代分析技术在药物分析中的研究与应用

伴随社会进步及经济发展，健康生活得到越来越多人民群众的关注及重视，促使医药市场迎来全新的发展机遇及发展契机。质量作为保证药品生产安全性的基础，是药品分析学的研究重点内容，而做好药品生产及开发工作对于创造健康生活环境具有不可比拟的积极作用，客观上保证药物生产质量。该文以现代化分析技术为切入点分析其技术特点及研发阶段，就提出具体的药物分析应用要点进行深入探究，旨在为从业人员积累更多的工作经验。

标签：现代化分析技术；药物分析；研究及应用

近几年来，现代化分析技术手段被广泛应用于药物分析领域，得到越来越多从业人员的关注及重视，并且药物定量分析不止局限于测定药物中包含的微量元素，更需要检测药物中各项有机成分。按方法原理，药物分析手段可分为毛细管电泳法、色谱法、质谱法、光度分析法及其他分析法等，并且以往研究及相关研究资料中倾向于采取化学发光法、荧光光度法及分光光度法进行药物分析[1-2]。由此可见，相关技术人员以质谱联用技术、磷光光谱法及吸收光谱法为切入点分析其于药物分析测定方面的应用现状，尤其是联用技术进步，将高效液相色谱法与质谱法相结合或将毛细管电泳法与气相色谱法相结合，促使测定样品种类更为丰富多样，甚至由简单药剂向复杂生物样品拓展，成为临床药物分析的主要技术手段。鉴于此，该文针对现代分析技术在药物分析中应用的研究具有重要现实意义。

1 共振瑞利散射法

自上个世纪90年代末期出现共振瑞利散射法（英文简称RRS）以来，被广泛应用于生物大分子测定领域，例如：无机离子测定、蛋白质测定及核算测定等，属于新兴分析技术手段之一，并且与其他分析技术手段相比，具有灵敏度高及便捷快速等鲜明特点[3-4]。同时，共振瑞利散射法应用于药物分析领域的报道及研究较多，例如：选择共振瑞利散射法测定四环素類抗生素类药物及氨基糖苷类药物，甚至有学者利用共振瑞利散射法研究部分蒽环类抗癌药物与刚果红间相互作用原理，一定程度上提高药物定量测定准确性，初步取得令人满意的测定效果。

2 原子吸收光谱法

原子吸收光谱法（又称原子吸收分光光度法且英文简称AAS），起源于澳大利亚科学家率先发表的原子吸收光谱法分析文章，被广泛应用于分析化学领域得到越来越多从业人员的关注及重视，并且初步发现适用于原子吸收法测定金属离子多达十余种。近几年来，原子吸收法被应用于药物分析领域，侧重于测定药物中有机成分[5-6]。按技术原理，原子吸收光谱法可分为间接原子吸收法及直接原子吸收法。有学者经研究发现，选择直接原子吸收光谱法测定药物盐酸苯海拉明，其结果与药典法相比其相对平均偏差不超过0.4%且线性范围为5.0～50.0 μg/L。

有研究资料显示，多位学者分别发现选择间接原子吸收光谱法测定头孢类药物、氢溴酸山莨菪碱及胱氨酸药物均可取得令人满意的结果。由此可见，原子吸收光谱法与化学发光法原理相似，主要通过将原子吸收分光光度法与流动注射技术相结合，一定程度上减轻原子吸收光谱法中沉淀、手工分离、洗涤及稀释的难度，不止大大简化操作流程，更适用于批量生产，有利于控制其总体质量。有学者经研究发现，选择流动注射在线过滤稀释-原子吸收分光光度法测定克托普利、安乃近及诺氟沙星等药物能取得令人满意的结果，大大压缩总体检测时间。

3 磷光分析法

相较于荧光，磷光具有使用年限长、辐射波长长及磷光年限及强度对重原子及顺磁性离子极其敏感等鲜明特点。从磷光发展至分析应用各个阶段，历经十余年发展变革，先后形成固体基质室温磷光法、敏化/猝灭室温磷光法（又称能量转移室温磷光法）、胶束增稳室温磷光法、环境诱导室温磷光法及磷光传感器与磷光探针结合法等，被广泛应用于药物分析领域。同时，有学者以室温磷光传感器、低温磷光、流体介质室温磷光及固体基质室温磷光为切入点分析于药物分析中应用效果，发现上述分析技术适用于测定抗癌药物、维生素B2、四环素类、中草药有效成分及生物碱等药物。

4 现代化色谱法

自上个世纪初期俄罗斯植物学家明确提出色谱法概念以来，主要将碳酸钙视为固定相装入色谱柱中充分发挥石油醚流动作用实现上下洗脱分离植物色素，并且历经百余年发展，色谱法中涉及技术、方法及理论日趋成熟，例如：高效液相色谱及气相色谱等，其自动化水平不断增强，逐步研发出全新的检测器及固定相，尤其是新兴的全新色谱法凭借其自身应用优势，占据药物分析领域极其重要的地位及作用。按技术类型，现代化色谱法可分为高效液相色谱法、毛细管气相色谱法、毛细管电色谱法及超临界流体色谱法，而高效液相色谱法可细分为超高效液相色谱法及反相高效液相色谱法。

4.1 高效液相色谱法

高效液相色谱法（英文简称HPLC）是目前我国药物分析应用最为广泛的分析方法，适用于分离分析热不稳定性、离子、极性及高分子化合物，其实质为层析以流体为流动相柱，其测定过程为使用高压泵促使溶剂瓶中液体（即流动相）流入检测器、色谱柱及样器后排出其废液，确保样品再由样器进入随着流动相再次进入色谱柱。同时，样品中各被测组分于色谱柱中依次柱填料类型不同则以不同色谱原理为参照，例如：凝胶排阻、离子对、离子交换、分配原理及吸附作用等，出现相应的差速迁移实现色谱柱分离，再由流动相先后带出柱，经检测器转变为电信号，输入记录器中记录形成色谱峰。

目前我国药物分析中医超高效液相色谱法及反相液相色谱法为最为常用的高效液相色谱法。相较于传统HPLC，超高效液相色谱法（英文简称UPLC）分离原理与其相似，并且由HPLC速率理论范式方程可得出色谱分离度随着色谱柱

填料颗粒粒径下降而上升。一旦填料颗粒粒径下降至1.7 μm是理论板高度最小值区域不断被扩大，说明流量范围越宽则所获取的柱效越高，而UPLC主要通过改变色谱柱填料颗粒粒径改善其柱效，确保其以不损失高分离度为前提条件优化其流速，进一步提高其分析速度。此外，选择UPLC法测定咖啡酸、丹酚酸B 及迷迭香酸等化学成分时优势较为明显，例如：可重复性及便捷准确等。反向高效液相色谱（英文简称RP-HPLC）与正相高效液相色谱以流动相及固定相的相对极性为主要区别，而RP-HPLC固定相属于非极性，流动相属于相对极性，例如：以四氢呋喃、丙酮、乙腈、甲醇及水为典型代表的水互溶性有机溶剂等，能不断调节保留时间。由此可见，RP-HPLC是一种兼顾稳定性、灵敏度及选择性的新型分离分析技术手段，适用于药物定性定量分析。伴随柱填料技术快速发展，RP-HPLC分析应用范围不断扩大，被广泛应用于易解离样品及无机样品分析领域。为了控制样品分离过程中解离速度，普遍使用缓冲液控制流动相中pH值。值得注意的是，pH值过高存在造成硅胶溶解的可能性。

4.2 毛细管气相色谱法

毛细管气象色谱法（英文简称CGC）历经50余年发展，是一项技术相对成熟且应用较为广泛的复杂混合物分离分析技术，并且将气体视为流动相，具有气体年度小及色谱柱内流动阻力低等鲜明特点。同时，由于气体扩散系数较大且组分于两柱间传质速率较快，客观上加快分离速率。毛细管柱与填充柱间以毛细管柱属于无法安装填充剂的空心柱（又称开管柱）为主要区别，普遍将固定液相涂抹于固定化柱管内壁，并且开关柱渗透性较高且固定液量较少，促使毛细管柱具备吸附性小、柱流失低、柱效高、分析速度快及分离温度低等鲜明特点。此外，CGC法普遍采取程序升温，将FD视为检测器且可测定多组分含量。

近几年来，顶空气相色谱法及全二维相色谱法被广发应用于药物分析领域，逐渐展露出令人广阔的应用前景及惊人的应用优势，但是气相色谱法于药物分析中存在着一定的局限，尤其是无纯样品条件下，客观上加剧试样中未知物定性定量的工作难度，往往需要凭借质谱或红外线广谱等结构分析仪器实现二者联用。

5 结语

通过该文探究，认识到从现代化分析技术于药物分析中应用进展角度来看，选择灵光分析法、原子吸收光谱法及共振瑞利散射法进行药物有机组分定量测定能取得令人满意的结果，并且与其他分析技术手段相比，现代化分析技术手段具有灵敏度高及检测便利等鲜明特点，是药物分析研究的重点内容及热点内容。同时，将质谱法与毛细管电泳法、气相色谱法、液相色谱法相结合形成全新的分析技术手段，是实现复杂药物样品快速鉴定的有力途径，尤其是色质与萃取技术联用，促使复杂药物样品处理更为便捷，大大缩短分析时间，提高分析方法选择灵敏度。

综上所述，在新兴技术蓬勃发展的大背景下，拓展分析技术于药物分析领域中的应用范围是不可逆转的主流趨势。