抗体重排

抗体多样性的产生—基因重排

基因重排的分子机制

早在50年代，人们就认识到抗体分子的每一条链都是由高度多变的V区和相对不变的C区组成的，V区赋予抗体分子对抗原的特异性。抗体分子V区的多样性和C区的稳定性显然是矛盾的。Dreyer 和Bennett 于1965年首次提出假设，认为每条抗体链实际上至少由两个基因所编码，其中一个是恒定的，一个是可变的。1983年，Tonegawa (Nature, 302:575-581)在对产生抗体的骨髓瘤及浆细胞瘤进行研究时发现，产生抗体的细胞中Ig基因结构与其它不合成抗体分子的细胞中的结构不一样。

在所有物种中，胚系Ig基因的构成基本上相同。Ig重链和轻链(λ和κ链)基因座都由多个编码V区和C区蛋白质的基因组成，并被非编码的DNA所分隔。

抗体分子由4条（两对）多肽链组成，包括两条相同的轻链（L-chain）和两条相同的重链（H-chain）。轻链和重链在相对分子质量上有较大差别，前者约2.3x104，后者则介于5.3x104-7.0x104之间。所有Ig 分子都含有两类轻链中的一类，即κ型或λ型。Κ型和λ型轻链的恒定区和可变区的氨基酸序列是不同的。在小鼠中，95%的抗体轻链是κ型，而人类抗体轻链中，κ型和λ型各占50%左右。

免疫球蛋白重链基因DNA重排以后，大量间隔序列被切除，使位于J-Cμ之间的增强子序列得以发挥作用，增强基因转录。

IgH基因重排

基因重排与抗体多样性

1、正常淋巴细胞在发育中是多克隆性质, 但恶性肿瘤表现为单克隆性基因重排。如：t (14 18) (q32 q21) 是滤泡性淋巴瘤( FL) 中的一个常见的染色体易位,该易位导致bcl22 与IgH重排。所以, 通过基因重排检测不仅可以鉴别淋巴组织是肿瘤性增生还是反应性增生,而且使准确判断细胞起源, 完善淋巴瘤的分型成为可能。

另外，多发性骨髓瘤(multiple myeloma, MM) 是一种以产生单克隆免疫球蛋白为特点的异常浆细胞恶性增殖性疾病。生理情况下B 细胞的发育成熟需经历IgH 基因重排, IgH 基因编码为多克隆性; 而该病患者在B 细胞发育的生发中心阶段发生IgH 的V、D、J基因片段特异性重排, 基因编码一致。IgH 克隆性的基因重排常被认为是MM的重要佐证。

由此可见，IgH基因重排技术是检测淋巴细胞克隆性增生的金标准，应用于恶性淋巴瘤的早期诊断和鉴别诊断有重大意义，特别是对于经常规HE、免疫组化检测仍不能确诊的病例有较好的用途和前景。2、ALL是儿童最常见的白血病，其中B-ALL又占了绝大多数。分子生物学技术证明，当多能干细胞向B细胞分化时，最早出现的可被检测出的变化是IgH基因的重排。IgH基因V-D-J片段的重排是产生抗体多样性和特异性的主要机理。不同的B细胞克隆发生不同类型的重链基因重排。由于恶变B细胞通常是一个细胞恶性

增生的结果，IgH基因重排呈单克隆，可以作为淋巴系统肿瘤克隆的特异性基因标志。而MRD 是ALL 复发的主要原因之一, 当白血病完全

缓解后, 常规形态学检查无法证实MRD 的存在,而常用的单独检测基因重排的方法因为各基因重排特异性的问题导致MRD 中的应用受到限制, 因而在ALL 病程中对IgH基因重排进行联合的动态监测, 极大的提高MRD 检出的特异性和敏感性, 对了解病程情况以及指导临床用药具有很重要的临床意义。

参考文献：

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[2] 施姗姗，胡长路：IgH重排在B-细胞淋巴瘤诊断和治疗中的临床意义《临床肿瘤杂志》2008年第 5期

[3] 崔蕾，李志刚，高超，吴敏媛：儿童急性淋巴细胞白血病IgH基因重排的定量检测研究《中华检验医学杂志》 2007年第10期[4] 姚锦李惠民王玉明刘华俞镁佳李斌何迪：实时定量PCR检测B 细胞非霍奇金淋巴瘤患者外周血和骨髓IgH基因重排及临床意义《临床血液学杂志》2008年第2期

[5]钟梅, 吕亚莉, 李冰, 赵坡用IgH、TCR基因重排技术检测疑难淋巴组织增生性病变《肿瘤防治研究》