同型半胱氨酸与叶酸_维生素B_12_及维生素B_6的关系

作者单位:200025上海第二医科大学附属瑞金医院心脏科(汤群、陆国平、吴春芳、龚兰生),防保科(黄霞);苏州第三人民医院消化科(王毓明)#临床研究#

同型半胱氨酸与叶酸、维生素B12及

维生素B6的关系

汤群陆国平吴春芳王毓明黄霞龚兰生

=摘要>目的探讨正常人群血同型半胱氨酸(Hcy)水平分布及Hcy与年龄和性别的关系,Hcy 水平与叶酸,维生素B12及维生素B6之间的关系。方法应用高效液相色谱(HPL C)荧光检测法测定688例正常人血浆Hcy水平,用放射免疫方法测定叶酸及维生素B12水平,用96孔板微生物学法测定血清维生素B6水平。结果相关分析结果显示:血浆Hcy水平在正常人中呈非正态分布,随年龄增长血浆Hcy水平增加,男性比女性高。血浆Hcy水平与维生素B6、维生素B12及叶酸水平呈负相关(r 分别为-013548,-012916,-013276,P值均<0101)。高Hcy血症者较非高Hcy血症者其血维生素B6、维生素B12及叶酸水平均明显降低(P值均<0101)。结论正常人中增高的血浆Hcy浓度与体内的维生素水平低下有关。

=关键词>同型半胱氨酸;维生素B6;维生素B12;叶酸

The relationships between hyperhomocysteinemia and folic acid,vitamin B12and vitamin B6T A N G Q un,L U Guo-p ing,W U Chun-f ang,W AN G Yu-ming,H UA N G X ia,GON G Lian-sheng. Dep art ment of Cardiology,Rui Jin H osp ital,Shanghai Second M edical University,Shanghai200025, China

=Abstract>Objective T o ex plo re the plasma homocysteine(Hcy)level distribution of normal Chinese population and the relationship betw een Hcy lev el and ag e and sex,and to investigate the association betw een plasma Hcy and v itamin B6,vitamin B12,and folic acid.Method Plasma Hcy level of 688normal people w as measur ed by high-performance liquid chromatog raphy(HPL C),plasma folic acid and vitamin B12levels were measured by radio immunoassay,and serum vitamin B6was measured by microbial assay.Results Results shew t hat the distribution of Hcy values in normal subjects w as skewed. Hcy level increased w ith age,and Hcy level in males was hig her than in females.T he plasma Hcy level correlated negatively w ith vitamin B6,v itamin B12and folic acid lev els(r=-013548,-012916,-013276,P<0101).After adjustment for age and sex,Hcy still correlated negatively w ith vitamin B6, v itamin B12and fo lic acid(P<0101)1Conclusion Elevated Hcy levels of normal Chinese people w as significantly associated w ith the reduction of vitamins.

=Key words>Homocysteine;V itamin B6;Vitamin B12;Fo lic acid

国外前瞻性研究表明,血浆同型半胱氨酸又称高半胱氨酸(Hcy)水平升高与心脑血管疾病有着密切联系,并显示在动脉粥样硬化的发病机制中,高Hcy血症是一种独立的危险因素[1]。鉴于中国人中血浆H cy水平的分布及Hcy血症与叶酸、维生素B12及维生素B6水平的关系尚不明确,国内已有的报道病例数也较少,本研究观察了国人中血浆H cy 水平分布情况及H cy水平与叶酸、维生素B12及维生素B6之间的关系。

资料与方法

1.观察对象:整个筛选人群共1299人,女性833人,男性466人,年龄21~94岁,平均年龄(5718?1217)岁。其中正常人688例,年龄21~88岁,平均(5217?1219)岁,20~40岁120人,41~50岁229人,51~60岁125人,>60岁214人,男性177人(2517%),女性511人(7413%),均来自上海瑞金医院职工健康体检及心血管病房。对受试者均询问病史、家族史、吸烟史情况并测身高、体重及血压、血糖、肌酐、甘油三酯(T G)、总胆固醇(T C)、维生素B6、维生素B12及叶酸水平。正常人群排除心脑血管疾病、内分泌、消化系统疾病及营养不良疾

病。高血压病定义为收缩压(SBP)\140mm H g (1mm Hg=01133kPa)和(或)舒张压(DBP)\90 mm Hg或目前使用降压药者。冠心病患者包括有心肌梗死史和经冠状动脉造影证实的冠心病患者。

21高效液相色谱荧光检测法测定血浆Hcy水

平:空腹抽取静脉血2ml置Na2EDTA抗凝管中, 1000g/m in4e下离心5m in,取016ml血浆标本置-70e保存,待标本收集全后测定H cy。按Cornw ell法用高效液相色谱荧光检测仪(惠普公司)测定H cy。H cy的批内变异系数:1157%;批间变异系数:2119%。判别标准:正常对照组血浆H cy第90百分位数为判别高Hcy的界限,超过此值为高Hcy血症。

3.血清总维生素B6测定:血清中维生素B6采用酸提取。取血清015ml加入0105N盐酸115ml, 20psi高压灭菌5h,冷却后调至pH415~510。将1、2、4、6、8及16ng维生素B6标准溶液加入96孔板中建立标准曲线,其余各孔加被测血清标本150 L l。以上均作重复3孔测定。各孔再加入150L l维生素B6培养基及10L l Saccharmyce scarlsbergensis菌液,以12通道吸液器充分混和,另以试剂(培养基)作为空白对照,37e,培养16~18h。以免疫酶联测定仪在600nm波长处比浊。血清维生素B6浓度以ng/ml表示。

4.叶酸、维生素B12的测定:采用125I标记叶酸, 57Co标记维生素B

12

的核素双标记放射免疫法。患者样品及标准品各加200L l,加入工作液1000L l (Dithiothreithol0105L l+Tracer1000L l混匀成工作液),室温30min(15~28e);加入50L l NaOH/ KCN混匀,水浴30min(37e),加入1000L l结合剂混匀;室温60m in(15~28e),离心15min(3500r/ min),弃上清液;沉淀测定1m in(125I及57Co各1次)。

51统计学处理:采用美国SAS公司出版的SAS 统计软件包处理数据,检测结果以均值?标准差或95%可信区间表示,并应用t检验,方差分析,V2检验,相关分析,多元回归分析,Logistic回归等统计, P<0105为有显著性差异,所有检验均为双侧检验。

结果

11血浆Hcy在中国正常人中的分布:Hcy在正常人(n=688)中呈非正态分布(图1):均数?标准

差为(916?414)L mol/L,最小值为316L mol/L,最大值为6018L mol/L,偏态系数为318,峰态系数是3211,第90百分位数是1413L mol/L,以此为判别标准,超过此值为高Hcy血症。

图1Hcy在正常人中的分布

21血浆Hcy水平与年龄的关系:688名正常人中,年龄与H cy呈显著相关,r=0135,P<01001。因H cy在正常人中呈非正态分布,因此进一步作秩相关分析,结果仍显示年龄与H cy显著相关,秩相关系数(rs)=0143,P<0101(图2)。

图2年龄与Hcy的相关性

将正常人分20~40岁、41~50岁、51~60岁、>60岁四个年龄组,观察各年龄组中H cy水平的分布情况(表1),结果显示:按各年龄组分组后,20~ 40岁、41~50岁组之间无显著差异(P>0105),其余各组两两之间均有显著性差异(P<0101)。

表1正常人群各年龄组Hcy浓度分布情况(

x?s)年龄(岁)例数H cy(L mol/L)

20~401208.2?3.3

41~502298.2?3.0

51~601259.9?4.1*

>6021411.6?5.4+注:*与20~40岁、41~50岁组比较,P<0.01;+与20~40岁、41~50岁、51~60组比较,P<0101

根据性别分为两组,再分析不同性别中年龄与H cy水平的相关性,男性117例,年龄(4918?1412)