菌种选育保藏与复壮

孟德尔（G. J. Mendel 1822-1884 ）
（2）摩尔根 果蝇试验
美国的生物学家与遗 传学家，发现染色体的 遗传机制，创立染色体 遗传理论，现代实验生 物学奠基人。 1933年，摩尔根获得 诺贝尔生理医学奖。 J. H. Morgan(1866-1945)
（3）1868年，年轻的瑞士 化学家、医生米歇尔 （Miesher,F.1844～ 1895）从细胞核中分离出 核酸。
培养基传代培养（斜面、平板）
生活态
基本方法 休眠态
寄主传代培养
低温（液氮、低温冰箱） 干燥（沙土管、真空干燥）
一、菌种保藏
（一）低温保藏法 （二）低温定期移植法 （三）石蜡油低温保藏法 （四）干燥保藏 沙土管法、滤纸保藏法、大小米保藏法 （五）甘油管保藏法 （六）真空冷冻干燥法 （七）液氮超低温保存
噬 菌 体 感 染 试 验
植物病毒重建实验
HRV：车前草病毒；TMV：烟草花叶病毒
实验证明，遗传信息的流向与DNA的传递是一致的。
2.遗传物质的分子结构和化学组成 （1）遗传物质的化学 组成 （2）遗传物质的结构 （3）DNA的复制：半 保留、半不连续复制。
Biblioteka Baidu3.遗传物质在细胞中的存在形式
三、诱变育种
诱变育种： 人为地将对象生物置于诱变因子中，使 该生物体发生突变，从这些突变体中 筛选具有优良性状的突变株的过程。
（一）突变： 自发突变 诱发突变 定向育种
（二）诱变的基本原理 1.诱变剂
物理诱变剂 诱变剂 化学诱变剂
生物诱变剂
2. 诱变剂作用机理
（1）物理诱变因子诱变机理 （2）化学诱变剂诱变机理 （3）生物诱变剂诱变机理
（1）真核生物 DNA与组蛋白结合。 （2）原核生物 不与组蛋白结合，呈环状。 （3）质粒 共价闭合DNA分子。 （4）基因与染色体。
二、自然选育
（一）菌种退化变异的原因 （二）自然选育的目的和适应条件 （三）自然选育的方法
1. 2. 3. 4. 通过表现形态来淘汰不良菌株 通过目的代谢物产量的考察 纯度考察 传代的稳定性试验
二、菌种的提纯与复壮
菌种提纯与复壮的方法： （一）菌种的提纯 （二）通过寄主体进行复壮 （三）淘汰已经衰退的个体
防止菌种衰退的措施
1）减少传代次数； 2）创造良好的培养条件；
3）利用单核体传代；
4）经常进行纯种分离，并对相应的性状指标进行检查； 5）采用有效的菌种保藏方法。
第三节 国内外主要的菌种保藏机构（自学）
Thanks! Any questions?
Friedrich Meischer
（4）证明核酸是遗传物质的3个经典实验：
证明核酸是 遗传物质的 3个经典实验
细菌转化试验
烟草花叶病毒 的拆合实验
噬箘体 感染试验
细菌转化实验
肺炎链球菌：S型（菌体具荚膜，菌落表面光滑，有
致病能力）
R型（菌体无荚膜，菌落表面粗糙，无
致病能力）
1928年，F.Griffth作了3组实验:
紫外线对DNA的损伤及其修复
UV
嘧啶
嘧啶二聚体
光复活作用
光解酶 嘧啶
嘧啶二聚体
四、微生物的杂交育种
（一）杂交育种的目的 （二）杂交育种的程序 1菌种准备 2.杂交育种使用的培养基 3.杂交育种的方法
五、原生质体融合
原生质体 原生质体融合 原生质体融合技术的特点 微生物原生质体融合育种方法 （标记菌株筛选、原生质体制备、原生质体再生试验、 原生质体融合、融合子的选择） 出现问题及解决方法
第二章 菌种选育、保藏与复壮
菌种选育 菌种保藏与复壮 国内外主要的菌种保藏机构
2013年12月
第一节 菌种选育
一、微生物菌种选育的理论基础 （一）微生物的遗传性和变异性 遗传 变异 微生物的遗传性和变异性的特点
（二）遗传变异的物质基础
1.研究的历史 （1）孟德尔 豌豆试 验
奧地利 遗传学 家、修 道士孟 德尔
六、基因工程技术
DNA重组技术 DNA重组技术的基本程序 DNA重组的操作
第二节 菌种保藏与复壮
菌种保藏的目的和原则：
目的：在一定时间内使菌种不死、不变、不乱，以供研究、 生产、交换之用。 基本原则：1、挑选典型菌种的优良纯种。 2、尽量使用分生孢子、芽孢等休眠体 3、创造有利于休眠的保藏环境（如干燥、低 温）。 4、尽可能多的采用不同的手段保藏一些比较重 要的微生物菌株。
（一）国内菌种保存管理机构 （二）国外主要菌种收集保藏机构 (P47)
本章小结
1. 遗传物质研究历史 2.导致微生物退化变异的原因 3.微生物育种的方法 4.诱变育种、诱变剂、作用机理 5.菌种保藏的目的、原则和方法 6. 防止菌种衰退可采取的措施
思考题
1.微生物育种的方法有哪些？ 2.什么叫诱变育种？什么叫诱变剂？ 3.简述紫外线诱变育种的作用机理。 4.菌种保藏的基本方法有哪些？各方法适宜保藏的菌 种有何不同？为什么？