葡萄糖脱氢酶融合表达载体的构建
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草杆 菌 来 源 的 该基 因序 列相 同 ， 粗提 酶 液 比活 力 高达 ３ ５ ｍｇ 结 论 运 用 分 子 生 物 学技 术 获 得 葡 萄 糖 脱 氢 酶 且 ７ Ｕ／ 。 基 因， 功 构 建 了葡 萄 糖 脱 氢 酶 的 融 合 表 达 栽 体 ， 酶 的后 续 纯化 工作 提 供 了条 件 。 成 为 【 关键 词】 葡糖 脱 氢酶 ； 基 因表 达 ； 枯 草 杆 茵 ； 聚 合 酶链 反 应 Ｄ ：０３ ６ ／．ｓ ．６ ２９ ５ ．０ １０ ．０ 文 献 标 志 码 ： ０Ｉｌ ． ９ ９ｊｉ ｎ １ ７ －４ ５ ２ １ ． ２ ０ ３ ｓ Ａ 文章 编 号 ：６ ２９ ５ （０ １０ －１ ３０ １ ７—４ ５ ２ ｌ ） ２０ ３—２
ｐ Ｔ２ ｂｗｉ ｈ ｌｃ ｓ ｅ ｙ ｒ ｇ ｎ ｓ ｅ ｅ ｔ ｎ ｒ ｄ ｃ Ｍ １ ９ｔ ｄ ｃ ｘ ｒ ｓｉｎａ ｄｔ ｅｅ ｍｉｅｔ ｅｅ ｚ ｍｅ Ｅ ２ ｔ ｔ ｅｇ ｕ ｏ ｅｄ ｈ ｄ ｏ ｅ ａ ｅｇ ｎ ，ｏ ｉｔｏ ｕ ｅＪ ０ ｏｉ ｕ ｅｅ ｐ ｅｓｏ ｎ Ｏ ｄ ｔｒ ｎ ｈ ｎ ｙ ｈ ｎ
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【 要 】 目 的 为 方 便 葡 萄 糖 脱 氢 酶 的 纯 化 ， 建 葡 萄 糖 脱 氢 酶 融 合 表 达 栽 体 。 方 法 通 过 聚 合 酶 链 反 应 摘 构 （ Ｃ ） 枯 草 杆 菌 基 因 组 中扩 增 葡 萄 糖 脱 氢 酶 基 因， 源 序 列 比 较 分 析 后 连 接 到 融 合 表 达 载 体 ｐ Ｔ ２ ， 入 Ｐ Ｒ从 与 Ｅ ２ｂ 导 Ｊ １ ９ 导 表 达 ， 定 葡 萄糖 脱 氢 酶 酶 液 比 活 力 。 结 果 构 建 的 葡 萄 糖 脱 氢酶 融合 表 达 栽 体 中 目的基 因序 列 与 枯 Ｍ Ｏ诱 测
Ｌｉ ＺＨＯＵ Ｌｉ ｎ Ｃ ｌｅ ｅｏ ｄｉａ ｃｅ ｃ ｎ ｂ ｒ ｔｒ ｄ ｃｎ Ｊｉｎ ｓ ｉｅ ｓｔ Ｚ ｅ ｊａ ｇ， ｉ ｎ ｓ ｕ， － ｇ（ ｏ ｌｇ ｆ Ｍｅ ｃ ｌＳ ｉｎ ｅａ ｄ Ｌａ ｏ ａ ｏ ｙＭｅ ｉｉｅ， ａ ｇ ｕＵｎ ｖ ｒｉ ｐｉ ｙ， ｈ ｎ ｆ ｎ Ｊ ａ ｇ ｕ
检 验 医学 与 临床 ２ １ ０ １年 １月 第 ８卷 第 ２期
Ｌ ｂＭｅ ｉ，ａ ｕ ｒ ０ １Ｖｏ． ， ． ａ ｄＣｌ Ｊｎ ａｙ２ １ ， １８ Ｎｏ ２ ｎ
・
・
１３ ・ ３
论 著 ・
葡 萄 糖 脱 氢 酶 融合 表 达 载 体的 构 建
戴锦 程 ， 韩 菲 ， 王 岩 ， 戴 榴 ， 丽 萍（ 苏大 学基 础 医 学与 医学技 术 学院 ， 周 江 江苏镇 江 ． １ ０ ３ ２２ １ ）
Ｃｏ ｓｒ ｃｉｎｏ ｕ ｉｎ ｅ ｐ ｅｓ ｎ ｖ ｃｏ ｆｇｕ ｏｅБайду номын сангаас ｈ ｄ ｏ ｅ ａｅ ｎ ｔｕ ｔ ｆｆｓｏ ｘ ｒｓｉ ｅｔｒ ｏ ｌｃｓ ｅ ｙ ｒｇ ｎ ｓ ｏ ｏ
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草杆 菌 来 源 的 该基 因序 列相 同 ， 粗提 酶 液 比活 力 高达 ３ ５ ｍｇ 结 论 运 用 分 子 生 物 学技 术 获 得 葡 萄 糖 脱 氢 酶 且 ７ Ｕ／ 。 基 因， 功 构 建 了葡 萄 糖 脱 氢 酶 的 融 合 表 达 栽 体 ， 酶 的后 续 纯化 工作 提 供 了条 件 。 成 为 【 关键 词】 葡糖 脱 氢酶 ； 基 因表 达 ； 枯 草 杆 茵 ； 聚 合 酶链 反 应 Ｄ ：０３ ６ ／．ｓ ．６ ２９ ５ ．０ １０ ．０ 文 献 标 志 码 ： ０Ｉｌ ． ９ ９ｊｉ ｎ １ ７ －４ ５ ２ １ ． ２ ０ ３ ｓ Ａ 文章 编 号 ：６ ２９ ５ （０ １０ －１ ３０ １ ７—４ ５ ２ ｌ ） ２０ ３—２
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【 要 】 目 的 为 方 便 葡 萄 糖 脱 氢 酶 的 纯 化 ， 建 葡 萄 糖 脱 氢 酶 融 合 表 达 栽 体 。 方 法 通 过 聚 合 酶 链 反 应 摘 构 （ Ｃ ） 枯 草 杆 菌 基 因 组 中扩 增 葡 萄 糖 脱 氢 酶 基 因， 源 序 列 比 较 分 析 后 连 接 到 融 合 表 达 载 体 ｐ Ｔ ２ ， 入 Ｐ Ｒ从 与 Ｅ ２ｂ 导 Ｊ １ ９ 导 表 达 ， 定 葡 萄糖 脱 氢 酶 酶 液 比 活 力 。 结 果 构 建 的 葡 萄 糖 脱 氢酶 融合 表 达 栽 体 中 目的基 因序 列 与 枯 Ｍ Ｏ诱 测
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１３ ・ ３
论 著 ・
葡 萄 糖 脱 氢 酶 融合 表 达 载 体的 构 建
戴锦 程 ， 韩 菲 ， 王 岩 ， 戴 榴 ， 丽 萍（ 苏大 学基 础 医 学与 医学技 术 学院 ， 周 江 江苏镇 江 ． １ ０ ３ ２２ １ ）