丙泊酚中长链脂肪乳注射液在Beagle犬内的生物等效性和药动学_杨欣怡
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
·1271·
◇ 定量药理学 ◇
中国临床药理学与治疗学 中国药理学会主办
CN 34-1206 / R，ISSN 1009-2501 http： / / www． cjcpt． com
2015 Nov； 20（ 11） ： 1271 － 1276
丙泊酚中 /长链脂肪乳注射液在 Beagle 犬内的生物等效性和药动学
·1272·
Chin J Clin Pharmacol Ther 2015 Nov； 20（ 11）
1 材料与方法
1． 1 仪器 美国 Waters 公司的 Waters Quattro Micro API 三 重 四 极 杆 串 联 液 质，ESI 离 子 源， MassLynx4． 1 数据处理系统； GL-16G-Ⅱ型高速冷 冻离心机（ 上海安亭科学仪器厂） ； BF-2000 氮气 吹干仪（ 北京八方世纪科技有限公司） ； AB135-S 型电子分析天平［梅特勒-托利多仪器（ 上海） 有 限公司］； WZ-50C6 微量注射泵（ 浙江史密斯医学 仪器有限公司） 。 1． 2 药品与试剂 受试制剂： 丙泊酚中 /长链脂 肪乳注射液，规格： 50 mL∶ 0． 5 g，安徽丰原药业有 限公司生产。参比制剂： 丙泊酚中 /长链脂肪乳注 射液，规格： 50 mL∶ 0． 5 g，北京费森尤斯卡比医药 有限公司生产。甲醇（ 色谱纯） （ 德国默克集团公 司） ； 乙腈（ 色谱纯） （ 德国默克集团公司） ； 氨水 （ 分析纯） （ 上海苏懿化学试剂有限公司） ； 二氯甲 烷（ 分析纯） （ 国药集团化学试剂有限公司） 。 1． 3 实验动物 Beagle 犬 8 只，♀、♂各半，体质 量 8． 6 ～ 13． 8 kg。南京安立默科技有限公司提 供，动物合格证： SCXK（ 苏） 2010-0002，饲养于清 洁级环境。 1． 4 色谱及质谱条件 色谱柱： Phenomenex Luna C18 2． 0 mm × 50 mm，3 μm； 流 动 相： 乙 腈 ∶ 0． 1% 氨 水 = 72 ∶ 28，流 速： 0． 25 mL / min； 柱 温： 40 ℃ ； 样品盘温度： 4 ℃ ； 进样量： 20 μL。
内 标 麝 香 草 酚 储 备 液 的 配 制： 精 确 称 取 10． 01 mg 的麝香草酚对照品置于 25 mL 棕色容 量 瓶 中，用 甲 醇 溶 解 并 稀 释 至 刻 度，得 到 400 μg / mL 的麝香草酚储备液，再用甲醇稀释至 15 μg / mL 作为内标的工作液。
分别 量 取 不 同 浓 度 的 丙 泊 酚 工 作 液 各 20 μL，依次配制成含待测物丙泊酚血浆浓度为 0． 05、0． 1、0． 2、0． 5、1、2、5、10 μg / mL 的样品，按 “1． 5”项下依法操作，并以上述色谱、质谱条件进 行测定，建立丙泊酚的标准曲线。分别以待测物 丙泊酚浓度（ X，μg / mL） 为横坐标，待测物丙泊酚 色谱峰 面 积 （ As） 与 内 标 麝 香 草 酚 色 谱 峰 面 积 （ Ai） 的比值（ Y = As / Ai） 为纵坐标，用加权（ 1 / X2 ） 最小二乘法进行线性回归运算。 1． 7． 3 精密度及准确度 精密量取丙泊酚低、中
2015-01-08 收稿 2015-09-20 修回 邵凤，女，硕士研究生，研究方向： 新药研发与临床药代动力学。 Tel： 13655554382 E-mail： 773671125@ qq． com 陶春蕾，通信作者，女，副主任药师，研究方向： 新药研究与开发和 临床药代动力学。 Tel： 13905514586 E-mail： 1225433686@ qq． com
中国临床药理学与治疗学 2015 Nov； 20（ 11）
·1273·
1、中 2 和高质控对照溶液各 20 μL 置具塞试管 中，30 ℃ 氮气吹干后，精密加入 Beagle 犬空白血 浆 200 μL，配制成丙泊酚血浆浓度 （ 0． 08，0． 4， 1． 6 和 8 μg / mL） 的质量控制（ QC） 样品，按“1． 5”
1． 7． 4 提取回收率和基质效应 分别精密量取 丙泊酚浓度为低、中 1、中 2、高对照液和内标各 20 μL 于试管中，加 460 μL 乙腈，涡旋混匀，取上 清液 20 μL 进样分析。得到丙泊酚和内标麝香 草 酚 的 峰 面 积 值 APRO 和 ATHY； 精 密 量 取 200 μL Beagle 犬空白血浆，加入 400 μL 乙腈，涡 旋 振 荡 1 min 后，于 1． 5 mL 离 心 管 中 12 000 r / min 离 心 5 min，取 全 部 上 清 液 于 试 管 中，加入 400 μL 水，涡旋震荡后，加入 2 mL 二氯 甲烷，于 3 00wk.baidu.com r / min 离心 10 min，定量移取下层
周期双交叉试验的设计，两周期时间间隔为 7 d。 8 只 Beagle 犬采用 DAS 3． 2． 8 软件随机分成 A、B 两组，试验前禁食 12 h，并按动物体重计算每只 动物的给药剂量（ 4 mg / kg） 。次日晨前肢静脉采 集空白血后依照随机表静脉注射受试制剂或参比 制剂，静脉给药后送回笼中，待取完前 6 h 的血样 后再喂食。静脉给药后 1． 0、2． 0、3． 0、4． 0、5． 0、 10． 0、20． 0、30． 0、40． 0、60． 0、90． 0、120． 0、180． 0、 240． 0、360． 0 min 采集静脉血，共计 16 个采血点， 采血量为 3 mL。血样取出后立即移入涂有肝素 的试管内，3 500 r / min 离心 10 min，移取上层血 浆，冷冻保存于 － 20 ℃ 冰箱中至测定。一周后 交叉给药。 1． 7 方法学验证 1． 7． 1 专属性 取空白血浆、空白血浆加标准工 作液 和 内 标 以 及 受 试 者 给 药 后 血 浆 样 品，按 照 “1． 5”项下处理，在色谱质谱条件下进行分析，得 到色谱图 1。 1． 7． 2 线性关系及定量下线 对照丙泊酚储备 液的配制： 精确称取 50． 10 mg 的丙泊酚对照品 置于 25 mL 棕色容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至 刻度，得到 2 000 μg / mL 的丙泊酚储备液，用甲 醇 依 次 稀 释 成 浓 度 为 100、50、20、10、5、2、1、 0． 5 μg / mL 的对照溶液作为丙泊酚对照工作液， 另外再取一定量的丙泊酚储备液用甲醇稀释浓度 为 80、16、0． 4 和 0． 8 μg / mL 的溶液作为质控工 作液。
丙泊酚（ propofol） 是一种烷基酚类静脉用全 麻药，自 1989 年用于临床以来，因其具有其他静 脉麻 醉 药 难 以 相 比 的 优 点，如 起 效 快、作 用 时 间 短、副作用少等已成为临床应用最多的静脉麻醉 药之一［1-3］。但局部注射痛是其较突出的不良反 应，发生率高达 28% ～ 90% 。一方面由于丙泊酚 可以直接刺激血管内的疼痛感受器，另一方面丙 泊酚不溶于水，高脂溶性，可以激活激肽酶系统， 从而产生疼痛。而中 /长链脂肪乳已成为丙泊酚 乳剂 的 新 载 体，且 有 良 好 的 肝 脏 耐 受 性 的 效 果［4］。与其他丙泊酚剂型相比，丙泊酚中 / 长链 脂肪乳注射液水相中游离的丙泊酚量明显减少， 可以 明 显 减 少 疼 痛，使 药 物 的 制 剂 顺 应 性 更 好［5-6］。
杨欣怡1 ，邵 凤1 ，许 杨2 ，郭德应2 ，陶春蕾1
1 安徽中医药大学，合肥 230031，安徽； 2 安徽万邦医药有限责任公司，合肥 230031，安徽
摘要 目的： 评价受试制剂丙泊酚中 /长链脂肪乳 注射液（ 安徽丰原） 与参比制剂丙泊酚中 /长链脂 肪乳注射液（ 北京费森尤斯卡比） 在 Beagle 犬内 的生物等效性和药动学研究。方法： 8 只 Beagle 犬双周期交叉静脉推注丙泊酚中 / 长链脂肪乳注 射液受试制剂和参比制剂 4 mg / kg，洗脱期为一 周。用 LC-MS 法测定丙泊酚在 Beagle 犬内的血 药浓度，用 DAS 3． 2． 8 软件进行数据处理，分析 受试制剂和参比制剂丙泊酚中 / 长链脂肪乳注射 液的生物等效性和药动学。结果： 丙泊酚中 /长 链脂肪乳注射液参比制剂与受试制剂的消除相半 衰 期 t1/2 分 别 为 （ 46． 652 ± 12． 239） min 和 （ 44． 637 ± 11． 874） min； 药 峰 浓 度 Cmax 分 别 为 （ 4． 784 ± 1． 215） mg / L 和 （ 4． 802 ± 1． 111） mg / L； 达 峰 时 间 tmax 分 别 为 1 min 和 1 min； 药 时 曲 线 下 面 积 AUC0 － t 分 别 为 （ 39． 212 ± 18． 710 ） mg · min · L － 1 和 （ 41． 846 ± 15． 293） mg·min·L － 1 ； 曲 线 下 面 积 AUC0 － ∞ 分 别 为 （ 43． 146 ± 19． 308） mg·min·L － 1 和 （ 45． 264 ± 15． 599） mg·min·L － 1 ； MRT 分别为 （ 24． 273 ± 8． 998） min 和 （ 25． 743 ± 10． 706） min。与丙泊酚注射用乳剂参比制剂相 比，相对生物利用度 F 为（ 110． 2 ± 12． 0 ） % 。结 论： 采用 LC-MS 法能够快速、准确、简单地测定丙 泊酚在 Beagle 犬内的血浆浓度。Cmax 和 AUC 经
已有 文 献 关 于 丙 泊 酚 血 浆 药 物 浓 度 的 检 测［7-8］，但 尚 无 丙 泊 酚 中 长 链 脂 肪 乳 注 射 液 在 Beagle 犬的 药 动 学 研 究。本 课 题 组 采 用 LC-MS 法，血样处理采用沉淀和萃取法的结合来检测丙 泊酚中长链脂肪乳注射液在 Beagle 犬的血药浓 度，较之前的检测方法提取回收率和灵敏度都较 高，专属性更强，研究其在 Beagle 犬内的药动学， 比较受试制剂和参比制剂的生物等效性。
对数转换后进行多因数方差分析、双单侧 t 检验 和（ 1 － 2α） % 置信区间法，结果表明该两种制剂 静脉注射具有生物等效性。 关键词 丙泊酚中 /长链脂肪乳注射液； 丙泊酚； LC-MS； 生物等效性； 药动学
中图分类号： R965． 1 文献标志码： A 文 章 编 号： 1009-2501（ 2015） 11-1271-06
离子源： ESI； Capillary： 2． 8 kV； Extractor： 5V； RF Lens： 0． 5 V； Source Temp： 120 ℃ ； Desolvation Temp： 320 ℃ ； Desolvation（ L / h） ： 450； Cone（ L / h） ： 60； 负离子方式检测，扫描方式为选择离子监测 （ SIR） ，用 于 定 量 的 离 子 分 别 为 丙 泊 酚 m / z： 177． 21，锥 孔 电 压 为 35 V； 内 标 麝 香 草 酚 m / z： 149． 26，锥孔电压为 15 V。 1． 5 血浆样品处理 取血浆样品 200 μL，加入 内标麝香草酚 20 μL，混合均匀后加入 400 μL 乙 腈，涡旋 振 荡 1 min 后，置 于 1． 5 mL 离 心 管 中 12 000 r / min 离心 5 min。而后取出全部上清液 于试管中，加入 400 μL 水和 2 mL 二氯甲烷，于 3 000 r / min 离心 10 min。移 取 下 层 液 于 30 ℃ 氮气 吹 干，加 入 500 μL 乙 腈 复 溶，涡 旋 后 取 20 μL 进样分析。 1． 6 Beagle 体内药动学设计方案 试验采用两
项下依法操作，每一浓度进行 6 样本分析，连续测 定 3 d，根据当日的标准曲线，计算 QC 样品的测 得浓度。根据 QC 样品结果计算本法的精密度和 准确度。
图 1 丙泊酚色谱图
A： 丙泊酚 m / z 177． 21； B： 内标麝香草酚 m / z 149． 26； C： 空白血浆； D： 空白血浆 + 丙泊酚 + 内标； E： Beagle 犬给药后 2 min 的血样。
◇ 定量药理学 ◇
中国临床药理学与治疗学 中国药理学会主办
CN 34-1206 / R，ISSN 1009-2501 http： / / www． cjcpt． com
2015 Nov； 20（ 11） ： 1271 － 1276
丙泊酚中 /长链脂肪乳注射液在 Beagle 犬内的生物等效性和药动学
·1272·
Chin J Clin Pharmacol Ther 2015 Nov； 20（ 11）
1 材料与方法
1． 1 仪器 美国 Waters 公司的 Waters Quattro Micro API 三 重 四 极 杆 串 联 液 质，ESI 离 子 源， MassLynx4． 1 数据处理系统； GL-16G-Ⅱ型高速冷 冻离心机（ 上海安亭科学仪器厂） ； BF-2000 氮气 吹干仪（ 北京八方世纪科技有限公司） ； AB135-S 型电子分析天平［梅特勒-托利多仪器（ 上海） 有 限公司］； WZ-50C6 微量注射泵（ 浙江史密斯医学 仪器有限公司） 。 1． 2 药品与试剂 受试制剂： 丙泊酚中 /长链脂 肪乳注射液，规格： 50 mL∶ 0． 5 g，安徽丰原药业有 限公司生产。参比制剂： 丙泊酚中 /长链脂肪乳注 射液，规格： 50 mL∶ 0． 5 g，北京费森尤斯卡比医药 有限公司生产。甲醇（ 色谱纯） （ 德国默克集团公 司） ； 乙腈（ 色谱纯） （ 德国默克集团公司） ； 氨水 （ 分析纯） （ 上海苏懿化学试剂有限公司） ； 二氯甲 烷（ 分析纯） （ 国药集团化学试剂有限公司） 。 1． 3 实验动物 Beagle 犬 8 只，♀、♂各半，体质 量 8． 6 ～ 13． 8 kg。南京安立默科技有限公司提 供，动物合格证： SCXK（ 苏） 2010-0002，饲养于清 洁级环境。 1． 4 色谱及质谱条件 色谱柱： Phenomenex Luna C18 2． 0 mm × 50 mm，3 μm； 流 动 相： 乙 腈 ∶ 0． 1% 氨 水 = 72 ∶ 28，流 速： 0． 25 mL / min； 柱 温： 40 ℃ ； 样品盘温度： 4 ℃ ； 进样量： 20 μL。
内 标 麝 香 草 酚 储 备 液 的 配 制： 精 确 称 取 10． 01 mg 的麝香草酚对照品置于 25 mL 棕色容 量 瓶 中，用 甲 醇 溶 解 并 稀 释 至 刻 度，得 到 400 μg / mL 的麝香草酚储备液，再用甲醇稀释至 15 μg / mL 作为内标的工作液。
分别 量 取 不 同 浓 度 的 丙 泊 酚 工 作 液 各 20 μL，依次配制成含待测物丙泊酚血浆浓度为 0． 05、0． 1、0． 2、0． 5、1、2、5、10 μg / mL 的样品，按 “1． 5”项下依法操作，并以上述色谱、质谱条件进 行测定，建立丙泊酚的标准曲线。分别以待测物 丙泊酚浓度（ X，μg / mL） 为横坐标，待测物丙泊酚 色谱峰 面 积 （ As） 与 内 标 麝 香 草 酚 色 谱 峰 面 积 （ Ai） 的比值（ Y = As / Ai） 为纵坐标，用加权（ 1 / X2 ） 最小二乘法进行线性回归运算。 1． 7． 3 精密度及准确度 精密量取丙泊酚低、中
2015-01-08 收稿 2015-09-20 修回 邵凤，女，硕士研究生，研究方向： 新药研发与临床药代动力学。 Tel： 13655554382 E-mail： 773671125@ qq． com 陶春蕾，通信作者，女，副主任药师，研究方向： 新药研究与开发和 临床药代动力学。 Tel： 13905514586 E-mail： 1225433686@ qq． com
中国临床药理学与治疗学 2015 Nov； 20（ 11）
·1273·
1、中 2 和高质控对照溶液各 20 μL 置具塞试管 中，30 ℃ 氮气吹干后，精密加入 Beagle 犬空白血 浆 200 μL，配制成丙泊酚血浆浓度 （ 0． 08，0． 4， 1． 6 和 8 μg / mL） 的质量控制（ QC） 样品，按“1． 5”
1． 7． 4 提取回收率和基质效应 分别精密量取 丙泊酚浓度为低、中 1、中 2、高对照液和内标各 20 μL 于试管中，加 460 μL 乙腈，涡旋混匀，取上 清液 20 μL 进样分析。得到丙泊酚和内标麝香 草 酚 的 峰 面 积 值 APRO 和 ATHY； 精 密 量 取 200 μL Beagle 犬空白血浆，加入 400 μL 乙腈，涡 旋 振 荡 1 min 后，于 1． 5 mL 离 心 管 中 12 000 r / min 离 心 5 min，取 全 部 上 清 液 于 试 管 中，加入 400 μL 水，涡旋震荡后，加入 2 mL 二氯 甲烷，于 3 00wk.baidu.com r / min 离心 10 min，定量移取下层
周期双交叉试验的设计，两周期时间间隔为 7 d。 8 只 Beagle 犬采用 DAS 3． 2． 8 软件随机分成 A、B 两组，试验前禁食 12 h，并按动物体重计算每只 动物的给药剂量（ 4 mg / kg） 。次日晨前肢静脉采 集空白血后依照随机表静脉注射受试制剂或参比 制剂，静脉给药后送回笼中，待取完前 6 h 的血样 后再喂食。静脉给药后 1． 0、2． 0、3． 0、4． 0、5． 0、 10． 0、20． 0、30． 0、40． 0、60． 0、90． 0、120． 0、180． 0、 240． 0、360． 0 min 采集静脉血，共计 16 个采血点， 采血量为 3 mL。血样取出后立即移入涂有肝素 的试管内，3 500 r / min 离心 10 min，移取上层血 浆，冷冻保存于 － 20 ℃ 冰箱中至测定。一周后 交叉给药。 1． 7 方法学验证 1． 7． 1 专属性 取空白血浆、空白血浆加标准工 作液 和 内 标 以 及 受 试 者 给 药 后 血 浆 样 品，按 照 “1． 5”项下处理，在色谱质谱条件下进行分析，得 到色谱图 1。 1． 7． 2 线性关系及定量下线 对照丙泊酚储备 液的配制： 精确称取 50． 10 mg 的丙泊酚对照品 置于 25 mL 棕色容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至 刻度，得到 2 000 μg / mL 的丙泊酚储备液，用甲 醇 依 次 稀 释 成 浓 度 为 100、50、20、10、5、2、1、 0． 5 μg / mL 的对照溶液作为丙泊酚对照工作液， 另外再取一定量的丙泊酚储备液用甲醇稀释浓度 为 80、16、0． 4 和 0． 8 μg / mL 的溶液作为质控工 作液。
丙泊酚（ propofol） 是一种烷基酚类静脉用全 麻药，自 1989 年用于临床以来，因其具有其他静 脉麻 醉 药 难 以 相 比 的 优 点，如 起 效 快、作 用 时 间 短、副作用少等已成为临床应用最多的静脉麻醉 药之一［1-3］。但局部注射痛是其较突出的不良反 应，发生率高达 28% ～ 90% 。一方面由于丙泊酚 可以直接刺激血管内的疼痛感受器，另一方面丙 泊酚不溶于水，高脂溶性，可以激活激肽酶系统， 从而产生疼痛。而中 /长链脂肪乳已成为丙泊酚 乳剂 的 新 载 体，且 有 良 好 的 肝 脏 耐 受 性 的 效 果［4］。与其他丙泊酚剂型相比，丙泊酚中 / 长链 脂肪乳注射液水相中游离的丙泊酚量明显减少， 可以 明 显 减 少 疼 痛，使 药 物 的 制 剂 顺 应 性 更 好［5-6］。
杨欣怡1 ，邵 凤1 ，许 杨2 ，郭德应2 ，陶春蕾1
1 安徽中医药大学，合肥 230031，安徽； 2 安徽万邦医药有限责任公司，合肥 230031，安徽
摘要 目的： 评价受试制剂丙泊酚中 /长链脂肪乳 注射液（ 安徽丰原） 与参比制剂丙泊酚中 /长链脂 肪乳注射液（ 北京费森尤斯卡比） 在 Beagle 犬内 的生物等效性和药动学研究。方法： 8 只 Beagle 犬双周期交叉静脉推注丙泊酚中 / 长链脂肪乳注 射液受试制剂和参比制剂 4 mg / kg，洗脱期为一 周。用 LC-MS 法测定丙泊酚在 Beagle 犬内的血 药浓度，用 DAS 3． 2． 8 软件进行数据处理，分析 受试制剂和参比制剂丙泊酚中 / 长链脂肪乳注射 液的生物等效性和药动学。结果： 丙泊酚中 /长 链脂肪乳注射液参比制剂与受试制剂的消除相半 衰 期 t1/2 分 别 为 （ 46． 652 ± 12． 239） min 和 （ 44． 637 ± 11． 874） min； 药 峰 浓 度 Cmax 分 别 为 （ 4． 784 ± 1． 215） mg / L 和 （ 4． 802 ± 1． 111） mg / L； 达 峰 时 间 tmax 分 别 为 1 min 和 1 min； 药 时 曲 线 下 面 积 AUC0 － t 分 别 为 （ 39． 212 ± 18． 710 ） mg · min · L － 1 和 （ 41． 846 ± 15． 293） mg·min·L － 1 ； 曲 线 下 面 积 AUC0 － ∞ 分 别 为 （ 43． 146 ± 19． 308） mg·min·L － 1 和 （ 45． 264 ± 15． 599） mg·min·L － 1 ； MRT 分别为 （ 24． 273 ± 8． 998） min 和 （ 25． 743 ± 10． 706） min。与丙泊酚注射用乳剂参比制剂相 比，相对生物利用度 F 为（ 110． 2 ± 12． 0 ） % 。结 论： 采用 LC-MS 法能够快速、准确、简单地测定丙 泊酚在 Beagle 犬内的血浆浓度。Cmax 和 AUC 经
已有 文 献 关 于 丙 泊 酚 血 浆 药 物 浓 度 的 检 测［7-8］，但 尚 无 丙 泊 酚 中 长 链 脂 肪 乳 注 射 液 在 Beagle 犬的 药 动 学 研 究。本 课 题 组 采 用 LC-MS 法，血样处理采用沉淀和萃取法的结合来检测丙 泊酚中长链脂肪乳注射液在 Beagle 犬的血药浓 度，较之前的检测方法提取回收率和灵敏度都较 高，专属性更强，研究其在 Beagle 犬内的药动学， 比较受试制剂和参比制剂的生物等效性。
对数转换后进行多因数方差分析、双单侧 t 检验 和（ 1 － 2α） % 置信区间法，结果表明该两种制剂 静脉注射具有生物等效性。 关键词 丙泊酚中 /长链脂肪乳注射液； 丙泊酚； LC-MS； 生物等效性； 药动学
中图分类号： R965． 1 文献标志码： A 文 章 编 号： 1009-2501（ 2015） 11-1271-06
离子源： ESI； Capillary： 2． 8 kV； Extractor： 5V； RF Lens： 0． 5 V； Source Temp： 120 ℃ ； Desolvation Temp： 320 ℃ ； Desolvation（ L / h） ： 450； Cone（ L / h） ： 60； 负离子方式检测，扫描方式为选择离子监测 （ SIR） ，用 于 定 量 的 离 子 分 别 为 丙 泊 酚 m / z： 177． 21，锥 孔 电 压 为 35 V； 内 标 麝 香 草 酚 m / z： 149． 26，锥孔电压为 15 V。 1． 5 血浆样品处理 取血浆样品 200 μL，加入 内标麝香草酚 20 μL，混合均匀后加入 400 μL 乙 腈，涡旋 振 荡 1 min 后，置 于 1． 5 mL 离 心 管 中 12 000 r / min 离心 5 min。而后取出全部上清液 于试管中，加入 400 μL 水和 2 mL 二氯甲烷，于 3 000 r / min 离心 10 min。移 取 下 层 液 于 30 ℃ 氮气 吹 干，加 入 500 μL 乙 腈 复 溶，涡 旋 后 取 20 μL 进样分析。 1． 6 Beagle 体内药动学设计方案 试验采用两
项下依法操作，每一浓度进行 6 样本分析，连续测 定 3 d，根据当日的标准曲线，计算 QC 样品的测 得浓度。根据 QC 样品结果计算本法的精密度和 准确度。
图 1 丙泊酚色谱图
A： 丙泊酚 m / z 177． 21； B： 内标麝香草酚 m / z 149． 26； C： 空白血浆； D： 空白血浆 + 丙泊酚 + 内标； E： Beagle 犬给药后 2 min 的血样。