菌落总数不确定度

菌落总数不确定度评定

食品的质量直接关系到消费者的身体健康,食品中微生物的测量是食品质量优劣的重要卫生指标之一，因此对食品中菌落总数进行测量不确定度的评定非常有必要。目前《GB 4789.2-2010 食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定》是食品中菌落总数测定的标准方法。我们对食品样品营养包进行卫生微生物菌落总数检测后进行不确定度的评定。 1.材料与方法 1.1 材料

1.1.1 样品：婴幼儿辅食营养包。 1.1.2 培养基：平板计数琼脂培养基。

1．1.3 主要仪器设备：立式高压蒸汽灭菌锅、鼓风电热恒温干燥器、电热恒温培养箱、超净工作台、恒温水浴锅。 1.2.检验方法

1.2.1 依据《 GB 4789.2-2010 食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定》进行测定。

1.2.2 检验过程：25g 样品+225mL 稀释液，均质 → 10倍系列稀释 → 选择2-3个适宜的样品匀液，各取1mL 分别加入无菌培养皿内 → 每皿加入15-20mL 平板计数琼脂培养基，混匀 → 培养 → 计数各平板菌落数 → 计算菌落总数

1.2.3 建立数学模型：设菌落总数为A ，试验结果为X ，则A=Xcfu/g ， 最佳∑==

=n

i

i x n

X A 1

1

1.2.4 不确定度来源及分析，见图1：

不确定度的因果关系图

2.结果与分析

2.1 试样在称重时天平带来的不确定度

本实验中称取样品25.0g ，0.1g 天平的最大允许误差为±0.1g ，可认为服从均匀分布，则其导致的不确定度： u rel （m ）=0.1／﹙25×3﹚=0.002309 2.2 稀释和取样过程中导致的不确定度

本实验中计数的稀释度为2个梯度，因此不确定度主要是由250mL 量筒、10mL 和1mL 刻度吸管的容量允许误差，容器和溶液温度与校准时温度不同引起的。

根据JJG196-1990《常用玻璃量器》检定规程规定，20℃时250mL 量筒的允许误差为±2.0mL ，10mL 刻度吸管的允许误差为±0.05mL ，1mL 刻度吸管的允许误差为±0.008mL ，取均匀分布，由容量允许差

测定温度

培养时间培养温度

重复性

样品均匀性

取样重复性V 样品

修约V 稀释

培养时间允差

时间

培养温度允差

培养条件

样品保存条件

温度

ΔV 稀释

稀释体积温度

取样体积取样

ΔV 样品

温度

菌落总数

引入的不确定度：

①由250mL量筒引入的不确定度：

u rel（V1）=2／（225×3）=0.005132

②由10mL刻度吸管引入的不确定度：

u rel（V2）=0.05／（9×3）=0.003208

③由1mL刻度吸管引入的不确定度：

u rel（V3）=0.008／（1×3）=0.004619

2.3 样品的均匀性引入的不确定度

本实验将样品充分混合后随机取样，可认为样品是均匀的，具代表性，由此所致的不确定度可忽略不计。

2.4 重复测量结果的不确定度评定

实验室对婴幼儿辅食营养包制备了10组样品,由实验室内同一人员在一段时间内按GB 4789.2-2010方法,同一样品做10组平行测定, 取样按GB 4789.2-2010规定进行, 样品均匀、稳定,得到10组样品菌落总数的测定结果,见表1

表1 检验结果及分析

从检验结果可知，如直接用贝塞尔公式计算合并样品标准差，由于数据的发散性较大，计算出的合并样品标准差很大，当样品均值较小时其不确定度则会较大，此时可以对上述数据取对数后，计算出样品检验结果对数的均值和残差，其计算结果见表1。根据贝塞尔公式，可计算出检测结果对数值标准偏差的合并样品标准差：

总体合成标准差：

扩展不确定度：

U=KUc

估计检测结果接近正态分布,且有足够大自由度,

取K=2 所以:U=

2.5 报告结果