抗合成聚合材料抗菌防霉效力测定

抗合成聚合材料抗菌防霉

效力测定

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抗合成聚合材料抗菌防霉效力的测定

广东省微生物分析检测中心

抗合成聚合材料是指合成聚合材料在生产或后加工过程中添加抗菌仿佛物质或结构经特殊处理具有抗菌防腐性能的一种特殊合成聚合材料。目前主要产品有抗菌TF、PE、PF、PP、PVC、CA系列等，用于家用电器、食品包装材料、卫生用品、电缆、胶片等正愈来愈热，该制品的特殊质量指标即抗菌防腐能力如何测定，国外研究较早，提出了一些相关的评价试验方法，我国对这类拒水性的制品尚未有相应的行业指标和标准试验方法，近年来，根据市场的需求和摸索的一些经验，介绍如下

1、细菌增殖阻止效果振荡瓶法

试验菌株

大肠杆菌Escherichia coli （ATCC8739）

金黄色葡萄球菌 Staphyloccus aureus (ATCC6538)

肺炎杆菌Klebsiella pneumoniae (中国药检所 46101)

枯草芽孢杆菌 Bacillus subtilis (ATCC 9372)

培养基

营养肉汤：

1/20营养肉汤：将营养肉汤配好后用蒸馏水稀释20倍；

营养琼脂；

以上培养基均在下蒸汽高压灭菌15分钟。

1.3仪器和设备

普通微生物实验室常规仪器设备。

1.4式样的准备

将待测样品尽量剪碎，称取± g为一份，灭菌备用，灭菌方法根据不同材料而定，耐高温的可在 Mpa高压蒸汽灭菌 15分钟，不耐高温的可用不破坏该结构的消毒水或75%乙醇进行消毒；将与待测样品结构相同而未经抗菌处理的样品作为对照试样，与待测样做同样的处理。

1.5试验菌液的制备

将供试菌株，分别转接入营养肉汤，置37℃振荡培养18小时，用血球计数板计数菌液浓度，然后用1/20营养肉汤进行一系列稀释至1×105 ~2×

105cells/mL,备用。

1.6测试步骤

在250 mL三角瓶中加入1/20营养肉汤100mL，移取5 mL试验菌液加入上述三角瓶中，使瓶中含菌量为1×104 ~2×104cells/mL，采用稀释平板法测定振荡前瓶中的菌浓度。再向瓶中加入试样，37℃，120转/分振荡6~12小时，使试样和试验菌强行接触，振荡后稀释平板法测定三角瓶中的活菌数。

1.7结果计算：

细菌减少率%=（A-B）/A×100%

式中：A—振荡前（接种后，加入试样前）三角瓶中的菌液浓度；

B——振荡培养后试样三角瓶中的菌液浓度。

设空白对照（不加试样的震荡培养）四个供试菌减少率的平均值为X，试样四个供试菌的减少率平均值为Y，当X〈Y时，可判定细菌的增殖被抑制。

2、真菌生长繁殖阻止效果试验法

2.1供试菌株

白色念珠菌 Candida albicans (ATCC10231)培养基和试剂

察氏琼脂培养基蒸汽灭菌15分钟。

L磷酸盐缓冲液：Na

2HPO

4

, KH

2

PO

4

,蒸馏水1000 mL，pH为~，蒸汽灭

菌15分钟，使用时以蒸馏水稀释100倍。

试样的准备

处理同

试验菌液的制备

将新鲜培养的斜面菌种用灭菌磷酸盐缓冲液洗下，计数，并稀释到

105cells/mL,备用。

测试步骤

在250 mL三角瓶中加入磷酸盐缓冲液100 mL，移取5 mL试验菌液加入该三角瓶中，混匀，稀释平板法测定振荡前的活菌数（用察氏琼脂培养基，30℃培养3天），将这个活菌数计为A，再向瓶中加入克试样，30℃振荡培养1小时（240转/分，振幅12厘米）。振荡培养后，稀释平板法测定活菌数，该活菌数为B，空白和对照样同样振荡培养，振荡后测定活菌数空白为C，对照样为D。

结果计算

真菌减少率%=（A-B）/A ×100%

当︱（A-C）/A︱×100〈10和︱（A-D）/A︱×100〈30时，试验结果有效。

3、防霉性能测定法

3.1供试菌株

黑曲霉Aspergillus niger(ATCC9642)

绳状青霉Penicillium funiculosum(ATCC9644)

球毛壳霉Chaetomium globosum(ATCC6205)

绿粘帚霉Gliocladium virens(ATCC9645)

出芽短梗霉Aureobasidium pullulans(ATCC9348)

培养基和试剂

营养盐溶液：KH

2PO

4

NH

4NO

3

NaCL

将上述组分溶于1000 mL蒸馏水中，用LNaOH调pH，灭菌后~。

营养盐琼脂培养基：即营养盐溶液加琼脂15 g/L；

PDA琼脂培养基

孢子浸润剂： g/L二辛基磺基琥珀酸钠(Dioctyl Sodium Sulfosuccinate)以上均蒸汽灭菌15分钟。

试样的准备

片状样品：裁成50×50mm（长×宽）的方块或直径为50mm的圆片；

棒状或筒状样品：截成76mm长。

表面用不破坏该结构的消毒水或75%乙醇进行消毒。

混合孢子悬浮液的制备

于28~30℃培养7~20天的菌种斜面分别用孢子浸润液洗下孢子，用直径为5mm 的玻璃珠打散，然后用无菌玻璃棉过滤，制成孢子悬浮液，各孢子悬浮液用营养盐溶液稀释至适合浓度，等量混合，使其孢子浓度为1×105 ~2×

105spores/mL，作为混合孢子悬浮液，备用。

测试步骤

3.5.1存活力控制

将25×25mm的无菌滤纸贴于营养盐琼脂平板上，用无菌喷雾器把混合孢子悬浮液喷在上面，然后将平板置28~30℃培养14天，控制湿度至少85%，霉菌在滤纸上应该生长良好，如果不生长，重复本试验。

样品测试

将待测样品置于倒好的营养盐琼脂平板上，用无菌压力喷雾器（压力为

110Kpa）把混合豹子悬浮液喷在上面，至整个表面湿润。盖好样品，置

28~30℃培养21天，控制湿度至少85%。

为消除误差，每个样品至少做三次重复。如果样品的两面材料是不同的，两面均需做同样的试验。

结果评价

培养结束后，根据样品上面霉菌的生长情况进行评价。

样品上霉菌的生长评价

不生长 0

微量生长（〈10%〉 1

少量生长（10~30%） 2

中等生长（30~60%） 3

严重生长（60%至整个覆盖） 4