百里香挥发油的提取及应用研究
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百里香挥发油的提取及应用研究
摘要:文章以百里香为材料,采用水蒸气蒸馏法提取百里香挥发油,并对其挥发油的主要应用进行研究。
在提取挥发油的过程中分别考察了蒸馏时间和加水量两种因素对挥发油提取率的影响。
然后在接种了大肠杆菌的平板中分别放入沾了四个不同浓度挥发油
和无菌水的滤纸片,放置在30℃温箱中培养24小时。
实验证明,百里香挥发油对大肠杆菌具有抑菌作用。
关键词:百里香挥发油;水蒸气蒸馏法;抑菌性
中图分类号:tq461 文献标识码:a 文章编号:1674-0432(2012)-12-0033-1
百里香属唇形科,是常用中药,传统药理认为百里香具有抗菌、抗痉挛、抗昆虫毒液、杀菌、强身、促结疤的作用。
百里香含挥发油含量高,品质优,在医药、食品加工、精细化工及日常生活中被广泛应用[1]。
本实验采用水蒸气蒸馏法从百里香中提取挥发油[2],分别考察了蒸馏时间和加水量两种因素对挥发油提取率的影响,并进行了体外抑菌作用的研究[3]。
1 材料与方法
1.1 材料
百里香、大肠杆菌、滤纸。
药品:蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、琼脂、无水乙醇等。
仪器:恒温水浴锅、高压蒸汽灭菌锅、恒温振荡培养箱等。
1.2 实验方法
1.2.1 百里香挥发油的提取分别取经粉碎、过40目筛后的百里香样品,称取50g,设蒸馏时间分别为150min、180min、210 min、240min和270min。
而加水量分别为250ml、300ml、500ml、600ml,各进行重复试验,观察结果并记录[5]。
1.2.2 接种培养基的制备将保存的大肠杆菌置于30℃温箱中
培养1天,在超净台里将菌种试管斜面注入适量无菌水(约5ml),接种环轻刮菌落,摇晃混匀制成菌悬液,分别用移液器取0.1ml菌悬液注入平板,用三角耙涂布均匀,涂三个平板,放入30℃温箱中,2天后观察是否有菌落生长。
1.2.3 滤纸片实验法由于百里香挥发油难溶于水,故先用无水乙醇按照1:1的比例稀释后,再用无菌水依次稀释成浓度为5%、2.5%、1.25%、0.625%,备用。
分别配置不同浓度的乙醇溶液作为对照,在超净工作台里将平板划分成五个区,每两张滤纸片(直径0.6cm)为一帖,用镊子夹着滤纸片在不同浓度的挥发油中和无菌水中轻轻粘一下后,取出贴在平板的指定位置放入培养箱中培养,培养温度为30℃,培养24h后观察结果。
1.2.4 数据分析出油率按以下公式计算:出油率(%)=挥发油得率/供试品量×100%,重复测定3次取其平均值。
计算公式:生长率=(对照组菌落直径-给药组菌落内径)/对照组菌落直径×100%,抑制率=1-生长率
2 结果与分析
2.1 不同蒸馏时间对挥发油的提取结果
由表1可知,蒸馏时间为210分钟时出油率最高。
所以确定最佳蒸馏时间为210min。
2.2 不同加水量对挥发油的提取结果
由表2可看出,百里香挥发油出油率的多少与加水量有很大的关系。
若投料量为50克时,加水量以10倍左右出油率最高。
2.3 百里香挥发油对大肠杆菌的抑菌作用
由表3可看出,接有大肠杆菌的实验组培养基中都产生了抑菌圈且直径随挥发油浓度的增加而增大。
3 讨论
本实验通过采用水蒸气提取法对百里香挥发油进行提取,操作简便安全,而且不污染环境[9]。
提取挥发油时,不同的外界因素,如提取过程中投料量、加水量及蒸馏时间等对挥发油的提取都有很大的影响。
多次的实验结果证明:百里香挥发油提取时,最佳的加水量应为投料量的10倍左右,最佳蒸馏时间为210分钟。
通过抑菌试验表明,百里香对大肠杆菌具有抑制性且抑菌圈直径的大小随着百里香挥发油浓度的提高而增大。
参考文献
[1] 彭梦侠,刘小玲,黄思敏,陈惠.水蒸气蒸馏实验的改进.嘉应学院化学与环境学院,2009,13(6).
[2] 谢捷,曹铭希,朱兴一,王平.闪式辅助水蒸气蒸馏提取陈皮挥发油工艺的优化研究.浙江工业大学药学院制药工程教育部重点实验室,2008.
[3] 刘晓辉.四种香料植物挥发油的提取及应用研究[硕士学位论文].吉林农业大学,2008.
[4] 张抒.百里香精油成分含量及组分的比较研究.东北林业大学园林植物与观赏园艺,2007.
[5] 赵秋堂,施健,丁亚明.玫瑰精油的实验提取.无锡卫生高等职业技术学院,2010.
作者介绍:王红涛(1981-),女,吉林白山人,通化师范学院生命科学学院助教,研究方向:分子生物学、蛋白质与基因工程、环境微生物学研究。