核磁共振实验室操作规程
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
核磁共振实验室操作规程
1. 打开空压机电源(电源开关向上推);
2. 打开空压机的排气口;
3. 取下磁体样品腔上端的盖子
4. 将样品管插入转子中,然后用定深量筒控制样品管的高度。这个步骤不能缺少,如果样品管插入的太长,有可能会损坏探头。
二、常规样品的测试
1.双击桌面上的图标,进入topspin
2.1主界面,调出最近做过的一张谱图。
2. 在命令行中输入“new”回车,跳出一窗口,建立一个新的实验,输入name、Solvent、Experiment等实验参数。其中1H选proton,13C选C13CPD,点击OK。
3.“ej”回车,打开气流,放入样品管;”ij”回车,关闭气流,样品管落入磁体底部。
4.“lock solvent(选用的溶剂)”回车,进行锁场,待锁场完场后,进行探头匹配调谐和自动匀场。
7.“ased”回车,调出采样参数,根据具体的样品设置NS、DS、D1等。
8.“getprosol”回车,调脉冲参数。所有参数不用改动,尤其PL1不能修改。
9.“rga”回车,自动增益,“zg”回车,开始采样。带采样完毕后,按进行傅立叶变换和自动相位校正
13. 实验完毕后,脱锁、停止旋转,输入“ej”命令,把样品管吹出,取出样品管;“ij”关掉气流。
14、对样品数据处理,然后打印图谱
填写实验记录
三、注意事项
1. 实验前空压机必须打开,保证气流流畅;
2. 打开气流前,查看样品腔的上盖是否取下;
3. 不要带具有磁性的物质靠近磁体;
4. 本台电脑数据转移使用光盘,不允许使用其它工具如U盘等
常见问题
1.购买核磁管和氘代溶剂?
答:核磁管和常用的溶剂可以在校试剂库购买。
也可向试剂代理公司购买,例如:青岛腾龙、百灵威、创美、
柏卡、腾达远等公司,联系方式网上搜索即可。
2.核磁管如何清洗?
答:
a.用原先的溶剂(非氘代)清洗;
b.不知道原先的溶剂时,则用二氯甲烷、丙酮清洗;
c.如果仍洗不掉,在适当的溶剂中用超声波振荡,或者用棉棒擦洗(可能会损坏核磁管);
d.如果必要的话,用混酸(HNO3/H2SO4,不可用铬酸)溶解;
e.上述一步或多步完成后,再用蒸馏水、丙酮反复洗三次,空气中干燥或低温烘干。
3.样品需要避光怎么办?
答:可用锡箔纸包裹核磁样品管,并在登记本上注明样品需要避光,我实验室的自动进样器设置有避光装置,可尽量减少样品检测时被光照。
4. 难以溶解的样品怎么办?
答:
a. 更换其他溶剂,或使用混合溶剂;
b. 根据溶剂的沸点,适当提高温度;
c. 用固体核磁谱仪检测。
NMR数据处理方法(VNMR6.1C)
一、调用图谱
点击主菜单main menu—file—(set directory—parent-change—load—wft)。此时如果能看到你需要打开的文件,则选择该文件(注意: 每次只能选定一个文件, 选定两个以上不能调用),然后点菜单中的load,显示屏上方输入wft↙, 如果此时看不到你需要打开的文件,则set directory—parent—change来改变路径,直到进入正确的路径,然后点return,选择你需要打开的文件,点击菜单中的load,输入wft↙,此时已经能够看到图谱了。
二、图谱的处理
1、相位校正及相关处理图谱调出后, 输入aph进行相位自动校正(也可以点击菜单中的phase手动调整相位)→输入vsadj自动调整峰高到满屏的最大峰高(也可以手动调整峰高)→点击或输入dscale显示标尺→点击full显示完整谱图,dg显示参数。
2、定标输入ds,显示图谱, 把光标移到TMS附近→输入nl →点击ref→输入0。也可定溶剂峰的化学位移值如: D2O: 4.75(H谱); 碳谱: CDCl3: 77(C谱)。
3、窗函数的应用对于氢谱,输入lb=1,或者lb=’n’,对于碳谱,输入lb=1或者2,然后输入wf t↙, 目的使谱图的S/N加大,但是它是以牺牲分辨率为代价的。
4、基线调平对所有的峰进行积分,然后输入bc即可。
5、查看图谱的精细结构点击box,选定要查看的部分,点expand进行放大,点full显示整个图谱。
6、积分点击part intergral进行积分→输入cz对积分清零→点击Lvl/Tlt对基线进行调平,点击reset进行分段积分→鼠标左键在所需积分峰的左右两边点击即可, 积分完毕后再输入dc调平,输入vp=12,抬高谱图的高度, 输入dpir以便显示分段积分值。
7、化学位移的显示图谱调出经1-2-3后, 点击th调节阈值(门槛)的高度(门槛(显示黄线)以上化学位移值可以显示出来),输入dpf显示th以上各峰的化学位移值。
8、局部放大图谱的处理图谱调出经过步骤1-2-3后, 点击box选定所要放大的范围,输入inset回车→选定位置,左键定位,右键调整大小,中键调整高度→s1(或者s2,s3等)保存当前图谱,r1(或者r2,r3等)调出相应的图谱,其它步骤和处理同正常的一维谱图。
9、DEPT的处理调出谱图后, 输入wft进行处理,处理过程同前,处理完毕后输入dssa同时显示DEPT的四组图谱。也可以自动处理,自动处理过程如下:点击菜单中的main menu —analyze—DEPT—full analysis(这个菜单不仅包括分析,还包括打印全套dept图谱)。10、二维图谱的处理调出谱图后, 输入wft、wti进行窗函数处理、wft1da进行变换、wti 再进行窗函数处理、wft2da进行二维谱图的变换、对于H—H 二维可以进行对称化处理, 用foldt命令处理即可, 如再要显示二维谱图可用dconi命令, dconi相当于一位谱图的处理命令ds。(具体处理过程从略)
三、打印图谱
1、一维图谱的打印输入vp=12,这样就可以在谱图下方留出空间打印积分值。输入pl pltext(谱图的文本文件名) pscale(谱图的标尺) pir(谱图的积分) ppf(谱图的化学位移) page(打印标志)进行打印,其中pscale为打印标尺,pir打印积分,ppf打印化学位移值,pltext打印文本参数,除了这个命令之外还可以自己编辑宏命令进行打印,本工作站编辑了一个名为zjzh的宏命令,它的内容是:vp=12 pl pltext pscale pir vp=vp+90 ppf(‘top’) vp=vp-90 page。