中药栀子提取方法的比较和工艺条件优化

栀子为茜草科植物栀子的干燥果实 ,能清热泻火 ,凉血 解毒 ,主治病热心烦 ,黄胆尿赤等症 。栀子所含化学成分有 栀子苷 、栀子素 、去羟栀子苷等[1 ] 。为了充分利用药材资源 , 减少浪费 ,确保临床疗效 ,本文以栀子苷含量为考察指标 ,对 栀子的不同提取工艺进行比较 ,优选出栀子的最佳提取工 艺。 1 仪器与试药
因 素
水平
A
B
C
D
浸泡时间/ h 乙醇浓度/ % 溶剂用量/ 倍 流速/ mL·min - 1
1
24
55
8
3
2
48
65
10
5
3
72
75
12
8
4. 3. 2 试验方法及试验数据 准确称取栀子 10 g ,粉碎成
粗粉 ,分别根据表 2 的试验条件进行试验 ,制备栀子提取液 ,
减压浓缩 ,转移至 100 mL 量瓶中 ,用甲醇定容 ,摇匀 。精密
中国医院药学杂志 2004 年第 24 卷第 6 期 Chin Hosp Pharm J ,2004 J un ,Vol 24 ,No. 6
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中药栀子提取方法的比较和工艺条件优化
李其兰1 ,陈红专2 ,张跃军1 , 高申蓉1 , 陶缨3 ( 1. 湖北省中医院 , 湖北 武汉 430061 ; 2. 湖北中医学院 ,湖北 武汉
2
0. 3177 6. 83 > 0. 05
2
2. 4997 53. 76 < 0. 05
2
0. 4767 10. 25 > 0. 05
2
0. 0465
注 : F1 - 0. 05 (2 ,2) = 19. 00 5 讨论
以栀子苷在提取物中的含量为考评指标 ,实验结果表
明 :栀子优选的最佳提取工艺是加 10 倍量 55 %乙醇浸泡 24 h 后渗漉 ,流速为 5 mL ·min - 1 。用此工艺提取栀子苷得率 高 ,本项研究为工业化生产提供了方法依据 。 参考文献 : [1 ] 杨云 , 冯卫生主编. 中药化学成分提取分离手册 [ M ] . 北京 :
Agilent 1100 series 高效液相色谱仪 ,SPD - 0A 型紫外检 测器 (美国惠普公司) ;栀子 (购于武汉银杏中药饮片厂 ,由本 校生药教研室鉴定为茜草科植物栀子 Gardenia jasmi noi des Ellis 的干燥果实) ; 栀子苷对照品 (中国药品生物制品检定 所) ;乙腈为色谱纯 ;水为注射用水 ;其余试剂均为分析纯 。 2 方法及结果 2. 1 色谱条件[2 ] 色谱柱 :Beckman C182ODS ( 4. 6 mm × 250 mm ,10μm) ;流动相 :乙腈2水 (15∶85) ;柱温 :30 ℃;检测 波长 :238 nm ;流速 : 1. 0 mL ·min - 1 。理论塔板数按栀子苷 计算应不少于 1500 ,保留时间是6. 24 min 。其色谱图见图 1。
[ 作者简介 ] 李其兰 ,女 ,主任药师 ,电话 :027288929176
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中国医院药学杂志 2004 年第 24 卷第 6 期 Chin Hosp Pharm J ,2004 J un ,Vol 24 ,No. 6
4. 2 提取方法比较 精密称取栀子0. 2 g ,粉碎成粗粉 ,用 甲醇定容 25 mL ,称重 ,超声处理 20 min ,再称重 ,用甲醇补 足减少的重量 ,滤过 。精密量取续滤液 10 mL ,甲醇定容至 25 mL ,按2. 1项下条件测定栀子苷含量 ,测得栀子中栀子苷 的含量为2. 92 %。分别对 3 种不同提取方法的浸提物进行 含量测定 ,并与栀子中栀子苷含量进行比较 ,见表 1 。结果 表明 :渗漉法所得浸提物中栀子苷含量明显高于水煎法和乙 醇回流法 ,故认为渗漉法为最佳提取方法 。 表 1 3 种提取方法结果比较 Tab 1 The results of t hree different extraction met hods
Chinese Medicine , Hubei Wuhan 430061 ,China)
ABSTRACT :OBJECTIVE To optimize t he extraction process of gardenoside in Gardenia. METHODS Several extraction process2 es were used ,such as decocting met hod , t he refluxing met hod , leakaging met hod. The optimum extraction was investigated by t he ort hogonal design. Gardenoside was determined by HL PC. RESUL TS The optimum extraction conditions were 10 fold of 55 % et hanol ,marinating 24 h and t he velocity of flow was 5 mL·min - 1 . The content of gardenoside and extraction rate were fairly high. CONCL USION This optimized process is simple ,stable and efficient . KEY WORDS : Gardenia ; gardenoside ; ort hogonal design ; xtraction process
4. 3. 1 正交设计表 根据栀子苷的理化性质 ,考虑到渗漉
过程中的浸泡时间 、乙醇浓度 、溶剂用量 、流速等因素对提取
的影响 ,每个因素选择三个水平 ,以 L9 (34) 正交表进行实验 研究 ,从而优选最佳提取工艺 ,见表 2 。 表 2 正交设计因素水平表 Tab 2 Ort hogonal design wit h different factors and levels
K3
12. 14
9. 21
10. 93 12. 22
R
1. 93
5. 19
2. 11
0. 73
表 4 方差分析结果
Tab 4 Result of t he analysis of variance
方差来源 离差平方和 自由度
方差
F值 P值
A
B
C D (误差)
0. 6353 4. 9994 0. 9533 0. 0929
取 1 mL 至 50 mL 量瓶中 ,用甲醇定容 ,混匀 ,按2. 1项下条
件测定栀子苷的含量 ,并计算 ,结果见表 3 。
4. 3. 3 结果分析 根据各因素的影响来看 ,其影响大小顺
序是 B > C > A > D ,即乙醇浓度 > 溶剂用量 > 浸泡时间 > 流
速 。由此可以推导出最佳工艺为 A1B1 C2D2 , 即加 10 倍量
Study on different extraction process of gardenoside in Ga rdenia and optimization
L I Qi2Lan ,CHEN Hong2Zhuan , ZHAN G Yue2J un ,et al ( The Pharmaceutical Department , Hubei Hospital of Traditional
中国中医药出版社 ,1998. 231. [ 2 ] 中国药典. 一部[ S] . 2000. 201. [3 ] 赵淑杰 , 杨颖 ,梁大雪 ,等. 栀子及不同炮制品中栀子苷的含
量分析[J ] . 中国中药杂志 , 1994 ,19 (10) : 601. [ 收稿日期 ]2003203204
提取方法
药材量 g
进样量 浸提物栀子 栀子苷得率
μL
苷含量/ g·L - 1
%
水煎法
10
10
乙醇回流法
10
10
渗漉法
10
10
3. 12 3. 18 5. 17
53. 5 54. 5 88. 7
注 : 栀子苷得率 = 浸提物栀子苷含量/ 栀子中栀子苷含量 ×100 %
4. 3 栀子渗漉提取最佳工艺确定
430061 ;3. 湖北大学 ,湖北 武汉 430060)
[摘要 ] 目的 :优选栀子中栀子苷的提取工艺 。方法 :比较多种提取工艺 ,如水煎法 ,乙醇回流法 ,渗漉法 ,应用正交设计筛选 栀子苷的提取工艺 ,采用高效液相色谱法测定该成分含量 ,作为评价指标 。结果 :最佳工艺为渗漉法 ,最佳条件是加 10 倍量 55 %乙醇浸泡 24 h 后渗漉 ,流速为 5 mL·min - 1 。栀子苷含量与提取率均较高 。结论 :优选得到的工艺简便易行 、稳定性好 。 [ 关键词 ] 栀子 ;栀子苷 ;正交设计 ;提取工艺 [ 中图分类号 ] R283. 6 [ 文献标识码 ] A [ 文章编号 ] 100125213 (2004) 0620327202
替硝唑分散片的制备与质量控制
陈连剑1 ,李成1 ,李婷1 ,罗雪香1 ,刘杜妙2 ,宏瑞琼2 ,郭江2 ,赖毅勤2 (1. 深圳市福田人民医院 ,广东 深圳 518033 ;
D
g·L - 1
1
1
1
1
1
5. 26
2
1
2
2
2
5. 17
3
1
3
3
3
2. 93
4
2
1
2
3
4. 72
5
Hale Waihona Puke 2231
3. 58
6
2
3
1
2
3. 13
7
3
1
3
2
4. 42
8
3
2
1
3
4. 57
9
3
3
2
1
3. 15
K1
13. 36
14. 40
12. 96 11. 99
K2
11. 43
13. 32
13. 04 12. 72
图 1 色谱图 (A2对照品 ; B2样品) Fig 1 Chromatogram (A2control sample ;B2sample) 2. 2 对照品溶液制备[3 ] 精密称取栀子苷对照品1. 9 mg 溶于甲醇 ,用甲醇定容至 10 mL ,混匀 ,即得对照品溶液 。
2. 3 供试品溶液制备 精密称取浸提物0. 5 mL , 转移至 10 mL 量瓶中 ,用甲醇定容后 ,精密量取 1 mL ,用甲醇定容 10 mL ,即得供试品溶液 。 3 栀子苷含量测定 3. 1 线性关系 分别吸取对照品溶液0. 6 ,0. 8 ,1. 0 ,1. 2 , 1. 4 mL ,各置于 5 mL 量瓶中 ,用甲醇定容 ,混匀 ,分别取 10 μL 进样 ,按上述色谱条件测定峰面积 。以栀子苷浓度为横 坐标 ,峰面积为纵坐标 ,得回归方程 Y = 11207 X + 9. 69 , r = 0. 9997 。结果表明栀子苷在 20～60 μg 之间范围内线性良 好。 3. 2 精密度试验 精密吸取同一供试品 6 次 ,进样测定 ,平 均栀子苷峰面积346. 58 ,RSD 为1. 79 %。 3. 3 回收率试验 精密称取已知含量的浸提物 1 g ,分成 5 份 ,每份约 0. 2 g ,精密 称 量 , 分 别 加 入 栀 子 苷 对 照 品 溶 液 (0. 19 g·L - 1) 0. 5 mL ,按照供试品溶液的制备方法进行制 备 ,测定栀子苷的量 ,平均回收率为98. 73 % ,RSD 为2. 17 %。 4 栀子提取工艺优选 4. 1 栀子提取 4. 1. 1 水煎法 称取栀子 10 g ,粉碎成粗粉 ,水煎 2 次 ,每 次均加水 100 mL 并煎煮 1 h ,合并滤液 ,静置 ,滤过 ,滤液浓 缩至 50 mL 。 4. 1. 2 乙醇回流法 称取栀子 10 g ,粉碎成粗粉 ,加 65 % 乙醇 100 mL 回流提取 4 h ,滤过 ,滤液回收乙醇并浓缩至 50 mL 。 4. 1. 3 渗漉法 称取栀子 10 g ,粉碎成粗粉 ,加 100 mL 65 %乙醇浸泡 24 h 后进行渗漉 ,渗漉流速为 5 mL ·min - 1 。 渗漉液减压回收乙醇并浓缩至 50 mL 。
55 %乙醇浸泡 24 h 渗漉 ,流速为 5 mL·min - 1 。从方差分析 表 (见表 4) 中可知因素 B 具有显著性影响 ,在生产过程中必
须保证 。
表 3 正交设计表及结果
Tab 3 Ort hogonal design and t he results
试验号 A
因 素
B
C
栀子苷含量