高效液相色谱法测定洋甘菊中α-红没药醇质量浓度研究

25 Journal of China Prescription Drug Vol.15 No.3·药物研发·

洋甘菊（Matricaria chamomilla L.）又称母菊，为菊科母菊属的一年生或多年生草本，主要分为德国洋甘菊（German Chamomile）和罗马洋甘菊（Roman chamomilla）两种，原产于欧洲和亚洲西部温带地区[1-2]。洋甘菊挥发油的主要有效成分是母菊薁、α-红没药醇、金合欢烯、肌醇、春黄菊油等；其精油主要用于抑制发炎、愈合伤口，具有舒缓、修复肌肤、灭菌、收敛毛孔和促进皮肤组织再生等功效[3-4]。洋甘菊是一种极具开发潜力的药用植物和香料植物。

α-红没药醇（α-bisabolo），又称甜红没药醇、防风根醇，是自然界中存在较多的倍半萜化合物之一，主要源自于春黄菊精油中[5]；可用于愈合溃疡、溶解胆石，同时具有消炎、抑菌作用[6]。由于目前对洋甘菊成份分析研究较少[7-8]，并且对于洋甘菊中α-红没药醇含量的测定方法研究未见报道。为了充分开发利用洋甘菊的药用价值，本研究采用了高效液相色谱法对洋甘菊中α-红没药醇质量浓度进行研究，为α-红没药醇的开发应用提供技术支持，同时促进了现代中草药的发展。

1 实验材料

1.1试剂

α-红没药醇标准品（批号：ABS-00002290-100，中国食品药品检定研究院）、色谱甲醇（批号16040115，RCI Labscan Limited）、德国洋甘菊（批号Y0591********，广州南北行中药饮片有限公司）、罗马洋甘菊（批号Y060151115003，广州南北行中药饮片有限公司）

1.2仪器

RIGOL高效液相色谱仪（规格型号：L-3200，配有L-3500紫外可见检测器、L-3400柱温箱、L-3100溶剂组织器、L-3200高压输液泵），玻璃砂芯过滤装置（广州市丛源仪器有限公司），循环水真空泵（型号：SHZ-DⅢ，巩义市予华仪器有限责任公司），VGT-1990QT型号超声波清洗机（广东固特超声实业有限公司），DHG-9140A电热恒温鼓风干燥箱（上海申贤恒温设备厂），BIOMATE-3S紫外可见分光光度计（Thermo Scientific公司）。

2方法

2.1色谱条件

色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂色谱柱是Compass C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μｍ），以甲醇∶水＝80∶20为流动相，流速：1.0 mL/min，检测波长：204 nm，进样量：10 μL，柱温：25℃。

2.2样品前处理

分别取德国、罗马洋甘菊干燥花序粉末280.0 g、280.5 g，精密称定，装入5 000 mL圆底烧瓶中，加入2 800 mL的蒸馏水浸泡1 h，用电热套加热圆底烧瓶至沸腾，保持沸腾蒸馏6 h左右（直至精油提取量不在增加），分别收集德国、罗马洋甘菊精油。

2.3标准品溶液的制备

精密称取α-红没药醇标准品6.80 mg，置于10 mL容量瓶中，然后用流动相溶解并稀释至刻度线，摇匀，再过0.22 μｍ的滤膜，即得α-红没药醇标准品溶液0.68 mg/mL，备用。

2.4供试品溶液的制备

分别精密量取1 mL的德国、罗马洋甘菊精油置于10 mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度线，摇匀，过0.22 μｍ的滤膜，即得。

2.5标准曲线的制作

用移液枪精密量取上述α-红没药醇标准品溶液5 mL、2.5 mL、1.25 mL、0.625 mL，分别置于10 mL容量瓶中，分别加入流动相溶液稀释至刻度线，摇匀，配制成质量浓度分别为0.042 5 mg/mL、0.085 0 mg/mL、0.170 0 mg/mL、0.340 0 mg/mL、0.680 0 mg/mL的标准品溶液。

在2.1节色谱条件下分别对系列浓度标准品溶液进行进样分析，记录色谱图。然后以α-红没药醇标准品浓度为横坐标（X），以α-红没药醇峰面积为纵坐标（Y），建立α-红没药醇的线性回归方程为Y＝31 516.824 38 X，相关系数r2＝0.999 6。研究表明，α-红没药醇在0.042 5～0.068 0 mg/mL浓度间呈现良好线性关系（图1、图2）。

3方法学试验

3.1精密度试验

日内精密度：先配制好0.060 mg/mL的α-红没药醇标准品溶液，在2.1节色谱条件下每隔2 h（0、2、4、6、8 h）测定1次，

高效液相色谱法测定洋甘菊中α-红没药醇质量浓度研究

吴少莉

（广州市络捷生物科技有限公司，广州 510633）

【摘要】目的 建立一种用高效液相色谱仪检测洋甘菊中α-红没药醇质量浓度的方法，并对比测定不同产地洋甘菊中α-红没药醇的质量浓度。方法 采用以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的Compass C

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柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相为甲醇-水（体积比80∶20），流速：1.0 mL/min，检测波长：204 nm，柱温：25℃，进样量：10 μL作为测定洋甘菊样品中α-红没药醇质量浓度的色谱条件。结果 α-红没药醇在0.042 5～0.680 mg/mL质量浓度线性范围内线性关系良好，r2＝0.999 6，测得德国洋甘菊中α-红没药醇的质量浓度为0.045 mg/mL，罗马洋甘菊未测出α-红没药醇。结论 高效液相色谱法快速、简便、准确、成本低，可适用于洋甘菊中α-红没药醇的测定。

【关键词】高效液相色谱法；洋甘菊；α-红没药醇；挥发油

Determination of α-bisabolol in chamomile by HPLC WU Shao-li. Guangzhou City Complex BiologicalTechnology Co.， Ltd. Guangzhou 510633， China.

【Abstract】Objective Establish a reversed-phase high performance liquid phase chromatogram detection chamomile α-bisabolol concentration method， and the concentration of different origin of chamomile，α-bisabolol. Methods HPLC separation was carried out in aoctadecylsilane bonded silica as filler compass C18 column （4.6 mm×250 mm， 5 μm）of elite with methanol-water （Volumeratio 80∶20）as mobile phase at a flow rate of 1.0 mL/min. The detection wavelength was 204 nm and the column temperature was 25℃， amount of sample: 10 μL， as the conditions to detect determination of α-bisabololin chamomile. Results There is a good linearrange in 0.042 5～0.68 mg/mL，r2＝0.999 6. The determination of α-bisabololin German Chamomile by this method is 0.045 mg/mL， but the Rome Chamomile α-bisabolene not detected. Conclusion This method is simple， rapid， accurate， low cost， and reproducible for determination of α-bisabolene chamomile by HPLC.

【Key words】HPLC; Chamomile; α-bisabolol; Volatile oil

基金项目：广东省科技型中小企业技术创新专项

（2015A010101423）