第六章 实验动物实验室的生物安全防护要求
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四. 废弃物和尸体处理
3.动物尸体的处理 安乐处死后的动物尸体,取材完毕后,经121℃ 30min 高压灭菌处理后,集中送环保部门处理。朊病毒感染动物 的处理原则参见第 9章。动物生物安全三级( ABSL-3 )实 验室及以上级的实验室的感染动物尸体需经高压蒸汽灭菌, 才能移出实验室。 4. 动物咽拭子的处理 用于病原分离和 PCR 检测的咽拭子,按照各自的要求 处理后,进行病毒分离和PCR检测,剩余的标本经121℃, 30min高压消毒处理。 5. 病原分离培养物的处理 病原分离的培养物,不论是阳性还是阴性结果,均需 经121℃,30min高压消毒处理。
1. 限制的工具不能作为常规的饲养工具。
2. 工具的设计应合理,不要仅考虑实验的便利,主要考 虑尽量减少动物的不适,避免伤害。
3. 尽量减少限制的时间,以达到实验目的为基准。 4. 在限制过程中,如果发生损伤或严重的行为改变,应 暂停或禁止限制,并给予处理或治疗。 5. 保证实验人员和周围人员的安全。
2. 使用实验室得到认可后,根据申请表中申请的动物种属和数 量,安排实验动物的饲养和使用。 3. 实验动物必须在指定的区域内饲养和使用,禁止在实验室饲 养动物。实验操作结束时,动物须返回指定的饲养区域内, 不能在实验室内过夜。 4. 动物实验应在实验室内指定的区域进行。
二. 含有感染性材料的动物实验要求
实验后的护理或用麻醉方法处死。
6. 实验过程中要求保证实验动物的良好生活条件,包括饲 养环境、符合需求的饲料及细心的护理等。
7. 研究人员和实验动物操作人员应接受实验动物的基本知 识和操作技能等方面的培训。
8. 使用过程中要求保证周围环境和实验人员的安全。
第二节 实验过程的行为规范
实验过程的行为规范
1. 实验动物饲养和使用应遵守国家有关法律和规定。
2. 应明确使用实验动物的理由和目的。 3. 明确实验所使用动物的种类和数量,动物的数量应满足 统计学的要求。 4. 完善操作规程,避免或减轻因实验对动物造成的不适和
痛苦。包括使用适当的镇静、镇痛或麻醉方法;禁止不 必要的重复。
5. 严格按程序实施实验后动物的处理,包括麻醉、止痛、
四.废弃物和尸体处理(1)
1. 血液和体液标本的处理 用于抗体、抗原、病原微生物、生化指标等检查 的血液和体液,按照要求进行处理并检测,检测后的标本 经121℃,30min高压消毒处理。 2. 动物脏器组织的处理 动物器官组织,尤其是用于病原微生物分离的组 织按照标准程序进行处理;用于病理切片的组织,均需要 经过甲醛固定后再进行切片。剩余的组织经121℃,30min 高压消毒处理。
三. 小动物的饲养
小动物主要指小鼠、大鼠、豚鼠等啮齿类动物,其饲 养应遵循下列原则: 1. 使用动物必须按国家标准或实验特殊要求检验合格,充 分准备后进入系统,饲养人员应按实验设施规定程序要 求进入系统。 2. 及时观察动物饮食、精神状况,有无异常表现,患病或 死亡。 3. 动物应可自由进食、饮水。定期检查水、料是否充足并 及时补给。同时保证其他饲养条件完备。
1. 涉及感染性材料的操作要在生物安全柜中进行,并防止泄露 在安全柜底面。操作包括感染动物的解剖、组织的取材、 采血及动物的病原接种。 2. 动物笼具在清洗前先做消毒处理。 3. 污物、一次性物品需放入医疗废物专用垃圾袋中,经高压灭 菌后方可拿出实验室。 4. 动物尸体用双层医疗废物专用垃圾袋包裹后,放入标有动物 尸体专用的容器中,用消毒液喷雾容器表面后,运至解剖 区域剖检。 5. 生物安全柜使用后应用消毒液擦拭、揩干。
• • • • 物理限制 手术操作 饮食的限制 废弃物和尸体处理
一. 物理限制
指在实验过程中(包括检查、收集标本、给 药、治疗或实验操作等),用手或工具限制动物 活动的过程。 根据实验内容不同,限制时间有差异,但要 求尽量缩短限制时间。有些动物,如狗和灵长类 动物可以通过简单的训练达到目的。
物理限制的主要原则和要求
三. 饮食的限制
实验用动物原则上要求随时饮食,如果一些实验需要
动物限制食物或水的摄入量,应保证动物存活所需要的最
低需求量。根据研究的目的,食物的限量应经过科学的论 证,其限量的标准应容易操作,如正常摄入量的百分比或 动物体重的百分比。对于水分的限量摄入,一定要防止动 物发生脱水现象,并要保持动物的膳食平衡。
6. 废液需按比例倒入有消毒液的桶中,倒入时需沿容器壁轻 倒并戴眼罩,防止溅入眼中。 7. 如果有感染性物质溅到生物安全柜上、地上以及其他地方, 应按“菌(毒)外溢在台面、地面和其他表面”处理。
8. 每天工作结束时,Biblioteka Baidu用消毒液擦拭门把手和地面等表面区 域。
9. 废物放入高压灭菌器内时需同时粘贴指示条,物品移出前 观察指示条是否达到灭菌要求。颜色不符时需重复高压 灭菌。 10. 高压灭菌器需每月做灭菌测试一次,并作记录。
第三节 实验动物使用程序和要求
感染动物实验室的生物安全
实验动物的来源 (本底的调查和检测、饲养)
实验室动物进入实验室 动物实验操作 感染动物的观察、饲养与清洁 死亡动物
废气动物、动物尸骸与废弃物品处理
一. 实验动物的基本使用程序和要求
1. 实验室如需要使用实验动物,应首先向生物安全和伦理委员
会提出申请,填写申请表(见附件“实验动物使用申请 表”)。
二. 手术操作
有些实验需要对动物进行手术,即打开或刺穿动物的身体,
对动物的物理或生理机能产生较大的损害,同时,实验人员也 容易被血液 / 体液污染或被器械、针头刺伤,存在潜在生物污 染的威胁,因此必须做到: 1. 操作一定要使用适当的镇静、镇痛或麻醉方法。
2. 禁止不必要的重复操作。 3. 不提倡一个动物进行多个手术实验,但为充分利用动物资源, 经动物伦理委员会许可,在可能的条件下可以实施。 4. 严格实验操作规程,防止发生血液/体液外溅和针刺伤,避免 生物污染。 5. 手术后的动物、标本及所用器具材料等须按规定程序处置。
第六章 实验动物实验室
的生物安全防护要求
主要内容
第一节 实验动物的护理和使用原则
第二节 实验过程的行为规范
第三节 实验动物使用程序和要求
第四节 动物生物安全实验室设施与防护要求
第五节 无脊椎动物使用安全原则
第一节 实验动物的护理和使用原则
实验动物是经过科学的育种、繁殖生产,遗传背景 清楚,携带的微生物状况明确,并对其生态学、生物学、 生物化学、形态结构了解的特殊动物,因此,对其护理 和使用也有严格的要求。