牛多杀性巴氏杆菌病病原的分离与鉴定

牦牛 、犏牛等突然 发 病 、死 亡 , 前后 共 发 病 7 头 , 发 病 率 为 0187% (7 /801) ;死亡 7 头 ,致死率为 100% ( 7 /7 ) 。其临床 症状 :病初体温高达 41～42 ℃,精神沉郁 ,口吐白 ,饮食欲 减退或废绝 ,呼吸加快 ,有痛苦性干咳 ,流涎 ,肌肉震颤 ,腹 痛 ,下痢 ,粪便初为粥状 ,后为液状 ,间或杂有黏液 、黏膜碎片 及血液 ,气味恶臭 ;随着病情的发展在颈部 、咽喉部及胸前的 皮下结缔组织出现弥漫性炎性水肿 ,可视黏膜发绀 ;肺部听 诊有支气管音及水泡音 ,有的听到胸腹摩擦音 。病理变化 : 脾有小点出血 ;肝肿胀 ,质脆 ,个别牛肝表面有坏死灶 ;肾稍 肿 ;淋巴结明显水肿 ;肺脏表面有肝变区 ,呈大理石样花纹 , 有纤维素性胸膜炎变化 ;心冠脂肪 、心内外膜出血明显 ,心包 积水 ;咽喉 、颈 、四肢等部皮下有浆液性浸润 ,切开流出深黄 色透明的液体 ,间或杂有血液 ,咽周围组织和会咽软骨韧带 呈黄色胶样浸润 ,上呼吸道黏膜卡他性潮红 。笔者于 2003 年 10月初对其进行实验室检查 ,确诊为牛多杀性巴氏杆菌 病 ,并采取了相应的预防措施 ,再无新病例发生 ,现将结果报 告如下 。 1 材料与方法 1. 1 材料 1. 1. 1 病料 无菌采取牛心 、肝 、脾 、肺 、肾等脏器 7 份 ,置 4 ℃冰箱 ,待检 。 1. 1. 2 培养基 5%犊牛血清营养肉汤 、血清琼脂平板 、普 通琼脂平板 、鲜血琼脂平板 、各种生化试验培养基均由动物
J TCVM
耐药性和错过治疗时机 [3, 4 ] 。 参考文献 : [ 1 ] 蔡宝祥. 家畜传染病学 (第四版 ) [M ] 1北京 :中国农业
出版社 , 2001, 46～49. [ 2 ] 曹澍泽. 兽医微生物与免疫学技术 [M ]. 北京 :农业出版
2005年第 3期
实验技术
社 , 1992, 25～261 [ 3 ] 李 峰. 波尔山羊羔羊大肠杆菌病的诊治 [ J ]. 中国兽医
[ 1 ] CHOTIAN , S. Isolation , identification and serotyp ing of pasteurella multocida isolation from pneumobic lungs of Bo2 vine and their sensitive to several antibioties. Jurnal Imu Ternak dan veterier, 1997, 2 (3) : 198～203.
取肝 、脾 、肾等病料触片 ,革兰氏染色镜检 ,观察到革兰氏
医学系传染病实验室自制 。
阴性小杆菌 ;美兰染色镜检 ,观察到大量两极浓染的小杆菌 。
1. 1. 3 实验动物 健康昆明系小白鼠 2只 ( 16 ～18 g) ,均 2. 2 菌落形态与培养特性
购于青海兽医生物制药厂 。
血清肉汤培养 24 h后轻度浑浊 ,连续培养 4～6 d,有菌
乳 糖 -
麦芽糖 -
甘露醇 +
表 1 巴氏杆菌生化试验结果
蔗 糖 靛基质 甲基红 V - P
H2 S
+
+
-
-
-
注 :“ + ”产酸 ,“ - ”阴性 ,“ ”产酸产气 , 三糖铁反应模式 = + / + 。 +; -
尿 素 -
枸橼酸 +
硝酸盐 -
运动力
+/+ +; -
2只小白鼠于 24～36 h内死亡 ,剖检采取脏器进行细菌 分离 ,获得与原分离菌株一致的小杆菌 。 2. 5 药敏试验
(11青海大学农牧学院 ,青海西宁 810003; 21湟源县农牧局 ) 中图分类号 : S855. 12 文献标识码 : A 文章编号 : 1000 - 6354 (2005) 03 - 0035 - 02
牛多杀性巴氏杆菌病 ,又称“牛出败 ”,全称“牛出血性 啉 ) 、CM P (氯霉素 ) 、CRO (头孢三嗪 ) 、CTD (头孢他啶 ) 、CTX
[ 2 ] 万马单智. 防治牛出败病的体会 [ J ]. 青海畜牧兽医杂 志 , 2003, 33 (2) : 47.
[ 3 ] 连玉意. 牛巴氏杆菌病的诊治 [ J ]. 中国兽医科技 , 2001, 31 (3) : 35～36.
[ 4 ] 汪力宽. 水牛巴氏杆菌病的防治 [ J ]. 中国兽医杂志 , 2000, 26 (5) : 35.
复方磺胺间甲氧嘧啶缓释型注射液 ,由磺胺间甲氧嘧啶
ν{ 收稿日期 : 2004 - 10 - 15
项目来源 :重庆市科委科技攻关项目 (7856) 作者简介 :张桂枝 (1972 - ) ,女 ,在读硕士 ,主要从事兽医药理学与毒
理学研究 。罗永煌为通讯作者 。
( SMM )与甲氧苄啶 ( TM P)通过环糊精包合而成 ,具有缓释 长效 、复方增效等作用 。为评价该制剂的安全性 ,笔者进行 了急性毒性 、蓄积毒性和耐受性研究 ,旨在为临床应用提供 科学依据 。 1 材料与试剂 1. 1 试验动物
科技 , 2000, 30 (4) : 37～381 [ 4 ] 李梦元. 规模化养猪场大肠杆菌的耐药性监测及血清流
行病学调查 [ J ]. 中国兽医学报 , 2004, 24 (1) : 16～181
牛多杀性巴氏杆菌病病原的分离与鉴定
张红见 1 ,韩志辉 1 , 李成业 1 , 童成岚 1 ,芦宝林 2
(链霉素 ) 、P IP (氧哌嗪青霉素 ) 、R IF (利福平 ) 、SXT (复合磺 胺 ) 、TET (四环素 ) 、TOB (妥布霉素 ) 、VAN (万古霉素 )等 23 种 ,批号 : 20020606。 1. 2 方法 1. 2. 1 病原菌检查 病料进行触片 ,分别进行革兰氏染色 、 美兰染色 、镜检 。 1. 2. 2 细菌分离培养 将病料分别无菌接种到 5%犊牛血 清营养肉汤 、血清琼脂平板 、普通琼脂平板 、鲜血琼脂平板 , 37 ℃培养 18～24 h,并进行细菌的纯化培养 。 1. 2. 3 生化试验 钩取纯培养物无菌接种于上述各种生化 试验培养基中 , 37 ℃培养 24～48 h。 1. 2. 4 动物试验 将纯培养物制成菌悬液给 2只小白鼠腹 腔注射 , 0. 2 m l/只 。 1. 2. 5 药敏试验 将纯化好的细菌用灭菌生理盐水洗下 , 并且与麦氏比浊管比浊 , 选取 112 ×109 个活菌 /m l浓度的 菌悬液 , 用灭菌棉拭子均匀涂布鲜血清琼脂平板 , 经室温干 燥 3～5 m in后 , 分别贴上各种药敏纸片 , 每块平板贴 3片 , 37 ℃培养 18～24 h判定结果 ,判定标准参照美国实验室标 准委员会 (NCCLS)药敏纸片扩散法法规 。 2 结果 2. 1 病原菌检查
明 、湿润 、表面光滑 、边缘整齐的露珠样菌落 ,不溶血 。
νζ
2. 3 生化试验
收稿日期 : 2004 - 09 - 14
结果见表 1 。
Fra Baidu bibliotek
作者简介 :张红见 ( 1970 - ) ,男 ,讲师 ,主要从事动物传染病教学与 研究 。
2. 4 动物试验
2005年第 3期
实验技术
J TCVM
三葡糖萄铁糖 +
1. 1. 4 药敏试验 购自上海伊华医学科技有限公司 , 抗菌 膜产生 ,液体清彻 ,管底有粘稠液体 ;在普通琼脂平板上生长
素种类为 AKN (丁胺卡那 ) 、AM P (氨苄青霉素 ) 、CAR (羧苄 贫瘠 ;在鲜血琼脂培养基上形成灰白色 、圆形 、微隆起 、半透
青霉素 ) 、CFP (头孢哌酮 ) 、CFX (头孢呋新 ) 、CFZ (头孢唑
members of the genus Pasteurella [ J ]. American Journal of Veterinary Research, 1991, 52 (12) : 2016～2022.
复方磺胺间甲氧嘧啶缓释型注射液的毒性研究
张桂枝 ,罗永煌 ,李 竞 ,周廷宣
(西南农业大学动物科技学院 , 重庆 402460) 中图分类号 : S859. 7 文献标识码 : A 文章编号 : 1000 - 6354 (2005) 03 - 0036 - 02
抑菌圈的测量结果见表 2。
表 2 巴氏杆菌抑菌圈的测量结果 / cm
抗生素
抑菌圈 直 径
抗生素
抑菌圈 直 径
抗生素
抑菌圈 直 径
CRO VAN R IF CFP P IP CTD CM P KAN
5. 120 2. 751 2. 529 3. 388 4. 647 2. 567 3. 452 1. 339
[ 5 ] DVM ,M S, Rossmanith, S. E. R. ,M S,W ilt, G. R. and DVM , M S,W u, G. , Characterization and comparison of antim icro2 bial suscep tibilities and outer membrane p rotein and p las2 m id DNA p rofiles of Pasteurella hemolytic and certain other
及时隔离病畜 ,迅速分离病原并做药敏试验 ,筛选高敏药物 进行治疗 ,对尚未发病的牛只紧急接种牛出败疫苗 ,以便减 少本病的发生 。 3. 4 药敏试验结果表明 ,巴氏杆菌对 CRO、R IF、CFP、GEN、 N I、P IP、CTD、CM P、NOR、AM P、ERY、AKN、TET、VAN、STR、 CFZ、SXT高敏 ,对 CTX、CAR、CFX中敏 ,对 KAN、OXA、TOB 耐药 [5 ] 。通过药敏试验筛选经济 、疗效好的高敏药物进行治 疗 ,既可取得良好的治疗效果 ,又可为以后该病的治疗提供 参考依据 。 参考文献 :
OXA NOR AM P ERY GEN A KN TET STR
2. 899 1. 957 3. 095 3. 457 3. 220 3. 775 2. 249
NI CFX CAR CTX CFZ TOB SXT
-
2. 880 1. 988 2. 179 2. 146 2. 200 0. 929 2. 766
-
注 :“ - ”无抑菌圈 。
3 小结与讨论 3. 1 根据流行病学 、临床症状 、病理变化和实验室诊断 ,确 诊为牛多杀性巴氏杆菌 。 3. 2 由于巴氏杆菌为条件性致病菌 ,且该病多因冬春两季 气温骤变 、潮湿 、营养缺乏等诱因导致机体抵抗力下降 ,病原 菌侵入机体 ,经淋巴循环 ,而发生内源性感染 [2 ] 。此次发病 可能与当时气候骤变 、降雪降温和饲料较为缺乏有关 。这与 连玉意 [3 ]的“牛巴氏杆菌病的诊治 ”和汪力宽 [4 ]的“水牛巴 氏杆菌病的防治 ”中报道的基本一致 。 3. 3 平时要加强饲养管理 ,避免牲畜受寒 、拥挤 ,保持牛场 清洁卫生 ,定期杀虫灭鼠 ,作好平时的预防消毒工作 ,发病时
败血病 ”,是由多杀性巴氏杆菌引起的一种以高热和败血症 (头孢噻肟 ) 、ERY (红霉素 ) 、GEN (庆大霉素 ) 、KAN (卡那霉
为特征的急性传染病 [1 ] 。2003年 10月初 ,湟源县某牛场的 素 ) 、N I(呋喃妥因 ) 、NOR (氟哌酸 ) 、OXA (苯唑青霉素 ) 、STR