动物细胞工程(PPT课件
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• 细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传物质改变，具 有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。
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9
如何界定原代培养和传代培养；细胞株和细 胞系？
随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖
细胞 悬浮 液
细胞株
细胞系 遗传物质改变
10代 细胞
50代 细胞
无限传 代
原代培养
传代培养
。 多数组织细胞固定在表面生长和分裂
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13
多细胞动物和人体的细胞 都生活在内环境中，根据你所 学的知识，认为体外培养细胞 应该模拟内环境的哪些内容呢？
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14
动物细胞培养条件：
1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液）
2、必须的营养物质 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、核酸、 嘌呤、嘧啶、激素、生长因子、动物血清等。）
拓展---动物组织或细胞培养的难易程度
幼体组织或细胞 ＞ 老龄组织或细胞 分化程度低的组织或细胞 ＞ 分化程度高的组织或细胞 肿瘤组织或细胞 ＞ 正常组织或细胞
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11
2、人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？
保存10代以内的细胞，因为其生物学特性未发生大 的变化，最接近于体内组织或细胞的生长特性，很适合 用于药物测试、基因表达等实验研究。
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5
动物细胞培养过程
动物胚胎或幼龄动
胰蛋白酶
加培养液
单个细胞
细胞
物的组织、器官 剪碎
制成 悬浮
液
细胞系 部分细胞“癌变”，细胞株
遗传物质改变，无 限传代
原 代 培 养
细 胞 贴 壁
细胞
50代细胞 剥离、分瓶
10代 细胞
动物细胞培养不能
传代培养
最终培养成动物体
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6
动物细胞生长特性
细胞贴壁：
葡萄糖、动 物血清
培养结果
植物体
细胞株、细胞系
培养目的
快速繁殖、培育 无病毒精植品pp株t 等
获得细胞 或细胞产物
17
动物细胞培养应用
• 大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、 单克隆抗体）
• 获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮 • 培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断
3、适宜的温度 36.5+（-）0.5度
保证细胞顺利的 生长增殖
4、充足的氧气和适宜的酸碱度 O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）
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15
问题： 1、培养基的类型
（1）天然培养基：营养价值高，成分复杂 （2）合成培养基：成分明确，便于控制试验条件
2、动物细胞培养液的主要成分是什么？ 较植物组织培养基有何独特之处？
3、在动物细胞培养过程中，为什么要用胰蛋白酶对 取出的动物组织进行处理？
胰蛋白酶处理动物组织，可以使动物组织细胞 间的胶原纤维和细胞外的其他成分酶解，获得单 个细胞;成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细 胞的生长和增殖.
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12
进一步思考：
①.植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗？ 否
②.胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什
悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上， 称为细胞贴壁。
要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。
细胞的接触抑制：
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会 停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。
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7
细胞贴壁过程
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8
有关概念:
• 原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。 培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代培养。
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10
思考讨论
1.动物细胞培养取材时，一般是取胚胎组织或幼龄动 物的组织或器官，请解释原因。
细胞的衰老与动物机体的衰老有着密切的关系，细胞的增殖 能力与供体的年龄有关，幼龄动物细胞增殖能力强，有丝分 裂旺盛，老龄动物则相反。所以，一般来说幼年动物的组织 细胞比老年动物的组织细胞易于培养。同样，组织细胞的分 化程度越低，则增殖能力越强，所以更容易培养。
动物细胞与组织培养
动物细胞融合 单克隆抗体制备 细胞核移植
体细胞克隆
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3
一、动物细胞培养
• 概念:就是从动物机体中取出相关的组织, 将它分散成单个细胞，然后,放在适宜的 培养基中,让这些细胞生长和增殖。
植物组织培养
在无菌和人工控制的条件下,将离体的植物 器官、组织、细胞，培养在人工控制的培养 基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈 伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。
• 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞 悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养， 称为传代培养。
• 细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞， 大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这 种传代细胞为细胞株。
• 细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状 态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养 条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。
么成份？
胰蛋白酶水解蛋白质 蛋白质
③.细胞膜的主要成份是什么？胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？
蛋白质和磷脂
能
④.既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个 细胞要注意什么问题呢？能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？ 为什么？
注意时间的控制
不能，因为两者的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与 胰蛋白酶的最适PH较接近
主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素 和动物血清等。
独特之处有：1、液体培养基（动物体细胞
大都生活在液体的环境） 2、成分中有动
物血清等
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16
植物组织和动物细胞培养的比较
比较项目
植物组织胞的全能性
细胞增殖
固体培养基 液体培养基
培养基特有成分
蔗糖、植物 激素
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4
阅读课本P44，简述动物细胞培养的基
本过程
1、动物细胞培养的原理是什么？ 细胞增殖
2、从动物机体中要取出哪些相关组织？并 解释 原因。
动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 它们细胞增殖能力强，分裂旺盛，分化 程度低，容易培养。
3、组织分散成单个细胞的方法是什么？其理论依 据是什么？ 4、动物细胞体外培养需要满足哪些条件？
动物细胞工程
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1
提问：
❖ 植物细胞工程常用的技术手段有哪些？
植物组织培养技术、 植物体细胞杂交技术
动物细胞工程常用的技术手段：
动物细胞培养技术、 动物细胞核移植技术、 动物细胞融合技术、 生产单克隆抗体技术
动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。
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2
动物 细胞 工程 技术
动物细胞工程 的基础
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如何界定原代培养和传代培养；细胞株和细 胞系？
随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖
细胞 悬浮 液
细胞株
细胞系 遗传物质改变
10代 细胞
50代 细胞
无限传 代
原代培养
传代培养
。 多数组织细胞固定在表面生长和分裂
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多细胞动物和人体的细胞 都生活在内环境中，根据你所 学的知识，认为体外培养细胞 应该模拟内环境的哪些内容呢？
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动物细胞培养条件：
1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液）
2、必须的营养物质 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、核酸、 嘌呤、嘧啶、激素、生长因子、动物血清等。）
拓展---动物组织或细胞培养的难易程度
幼体组织或细胞 ＞ 老龄组织或细胞 分化程度低的组织或细胞 ＞ 分化程度高的组织或细胞 肿瘤组织或细胞 ＞ 正常组织或细胞
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2、人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？
保存10代以内的细胞，因为其生物学特性未发生大 的变化，最接近于体内组织或细胞的生长特性，很适合 用于药物测试、基因表达等实验研究。
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动物细胞培养过程
动物胚胎或幼龄动
胰蛋白酶
加培养液
单个细胞
细胞
物的组织、器官 剪碎
制成 悬浮
液
细胞系 部分细胞“癌变”，细胞株
遗传物质改变，无 限传代
原 代 培 养
细 胞 贴 壁
细胞
50代细胞 剥离、分瓶
10代 细胞
动物细胞培养不能
传代培养
最终培养成动物体
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6
动物细胞生长特性
细胞贴壁：
葡萄糖、动 物血清
培养结果
植物体
细胞株、细胞系
培养目的
快速繁殖、培育 无病毒精植品pp株t 等
获得细胞 或细胞产物
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动物细胞培养应用
• 大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、 单克隆抗体）
• 获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮 • 培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断
3、适宜的温度 36.5+（-）0.5度
保证细胞顺利的 生长增殖
4、充足的氧气和适宜的酸碱度 O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）
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问题： 1、培养基的类型
（1）天然培养基：营养价值高，成分复杂 （2）合成培养基：成分明确，便于控制试验条件
2、动物细胞培养液的主要成分是什么？ 较植物组织培养基有何独特之处？
3、在动物细胞培养过程中，为什么要用胰蛋白酶对 取出的动物组织进行处理？
胰蛋白酶处理动物组织，可以使动物组织细胞 间的胶原纤维和细胞外的其他成分酶解，获得单 个细胞;成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细 胞的生长和增殖.
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进一步思考：
①.植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗？ 否
②.胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什
悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上， 称为细胞贴壁。
要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。
细胞的接触抑制：
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会 停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。
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细胞贴壁过程
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有关概念:
• 原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。 培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代培养。
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思考讨论
1.动物细胞培养取材时，一般是取胚胎组织或幼龄动 物的组织或器官，请解释原因。
细胞的衰老与动物机体的衰老有着密切的关系，细胞的增殖 能力与供体的年龄有关，幼龄动物细胞增殖能力强，有丝分 裂旺盛，老龄动物则相反。所以，一般来说幼年动物的组织 细胞比老年动物的组织细胞易于培养。同样，组织细胞的分 化程度越低，则增殖能力越强，所以更容易培养。
动物细胞与组织培养
动物细胞融合 单克隆抗体制备 细胞核移植
体细胞克隆
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一、动物细胞培养
• 概念:就是从动物机体中取出相关的组织, 将它分散成单个细胞，然后,放在适宜的 培养基中,让这些细胞生长和增殖。
植物组织培养
在无菌和人工控制的条件下,将离体的植物 器官、组织、细胞，培养在人工控制的培养 基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈 伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。
• 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞 悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养， 称为传代培养。
• 细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞， 大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这 种传代细胞为细胞株。
• 细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状 态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养 条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。
么成份？
胰蛋白酶水解蛋白质 蛋白质
③.细胞膜的主要成份是什么？胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？
蛋白质和磷脂
能
④.既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个 细胞要注意什么问题呢？能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？ 为什么？
注意时间的控制
不能，因为两者的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与 胰蛋白酶的最适PH较接近
主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素 和动物血清等。
独特之处有：1、液体培养基（动物体细胞
大都生活在液体的环境） 2、成分中有动
物血清等
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植物组织和动物细胞培养的比较
比较项目
植物组织胞的全能性
细胞增殖
固体培养基 液体培养基
培养基特有成分
蔗糖、植物 激素
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阅读课本P44，简述动物细胞培养的基
本过程
1、动物细胞培养的原理是什么？ 细胞增殖
2、从动物机体中要取出哪些相关组织？并 解释 原因。
动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 它们细胞增殖能力强，分裂旺盛，分化 程度低，容易培养。
3、组织分散成单个细胞的方法是什么？其理论依 据是什么？ 4、动物细胞体外培养需要满足哪些条件？
动物细胞工程
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提问：
❖ 植物细胞工程常用的技术手段有哪些？
植物组织培养技术、 植物体细胞杂交技术
动物细胞工程常用的技术手段：
动物细胞培养技术、 动物细胞核移植技术、 动物细胞融合技术、 生产单克隆抗体技术
动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。
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动物 细胞 工程 技术
动物细胞工程 的基础